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文档简介
1、选修一复习提纲 专题一 传统发酵技术的应用1、 果酒制作1、 酵母菌,真核生物, 型,出芽生殖,最适温度20。2、菌种来源:附着在葡萄皮上的野生型酵母菌,人工培养的酵母菌。3、发酵条件:温度 ,发酵液呈酸性。发酵过程中“通气”使酵母菌进行 大量繁殖。“密封”使酵母菌 。发酵1012天左右。4、酒精鉴定:酸性条件
2、160; 及酒精反应呈现 色。5、葡萄酒呈红色:红葡萄细胞的 失去选择透过性,液泡内的色素进入发酵液。二、果醋制作 1、醋酸菌,原核生物, 型,二分裂生殖,最适温度3035。2、菌种来源:可以从食醋中分离醋酸菌,也可以购买。3、原理:氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛
3、变为醋酸。反应简式: 。4、发酵条件:温度 ,不断充入 ,发酵78天左右。5、果醋鉴定:PH试纸测试对比;观察白色菌膜(醋酸菌在液面大量增殖形成)。6、流程:挑选葡萄冲洗榨汁 果酒( 果醋) 选择新鲜葡萄先冲洗后去枝梗防止杂菌感染
4、,注意不要反复冲洗,否则酵母菌数量减少,影响发酵。发酵液装瓶后保留1/3的空间。右图各部件作用出料口: ; :醋酸发酵时连接充气泵; :排出酒精发酵时产生的CO2。排气口连接一个长而弯曲的胶管作用 。三、腐乳制作1、毛霉,丝状真菌,真核生物, 型,孢子生殖。2、菌种来源:自然条件下
5、来自 ;工厂化生产中直接接种优良菌种。3、原理:毛霉、青霉、酵母、曲霉等参及了豆腐发酵,起主要作用的是 。毛霉等产生的蛋白酶将Pr分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。4、流程:让豆腐上长出毛霉 密封腌制5、注意:含水量
6、;的豆腐适合作腐乳。1518,一定湿度条件下,5天后豆腐表面布满白色菌丝。加盐析出豆腐中的水分,使豆腐变硬,在后期制作过程中不会过早酥烂。盐浓度过低不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败;盐浓度过高会影响腐乳的口味。越接近瓶口被杂菌污染的可能性越大,盐要铺的厚些。卤汤直接关系到腐乳的 、 、 。卤汤由 及 配制而成。卤汤中酒的含量控制在 。加酒可以抑制微生物的生长,同时能使腐乳具有
7、独特的香味。酒精含量过高,腐乳成熟时间将会延长;酒精含量过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败。香辛料可以调制腐乳风味,也具有防腐杀菌作用。4、 泡菜制作1、乳酸菌,原核生物, 型,二分裂生殖。2、 分布:空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道。常见的有乳酸链球菌和乳酸杆菌。3、 原理:在无氧条件,乳酸菌将葡萄糖分解成 。 常用于生产酸奶。4、 是白色粉末,易溶于水,味道咸涩,常作食品添加剂,一般不危害人体健康(人体摄入总量达到
8、160; g时中毒),膳食中的亚硝酸盐绝大部分随尿液排出,但特定条件下会转变成致癌物质- 。 是白色晶体,味道咸,常作调味剂。5、 含量测定 法。原理:盐酸酸化条件下,亚硝酸盐及对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,及N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色。将显色样品及标准显色液目测比较,估算亚硝酸盐含量。步骤:配制溶液制备标准显色液 。6、流程:选择原料加工原料加泡菜盐水和调味料
9、装坛发酵成品 7、注意:泡菜坛内的白膜是由 繁殖形成的。泡菜盐水中清水及盐的质量比约为 。盐水煮沸为了 ,冷却后使用为了保证 ;提取剂增加亚硝酸盐的溶解度;氢氧化钠中和过多的乳酸;氢氧化铝乳液吸附样品滤液的杂质,使泡菜汁透明澄清。蔬菜放置过久或腌制时,蔬菜中的 会被硝酸还原菌还原成 危害健康。温度 、食盐用量 、腌制时间 易造成细菌增殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制 &
10、#160;d后,亚硝酸盐的含量开始下降。专题二 微生物的实验室培养 1、 培养基1、概念:按照 的不同需求,人工配制的营养基质。2、种类:按培养基物理特点不同分为 培养基和 培养基;按用途不同分为 培养基和 培养基;按化学成分不同分为 培养基和 培养基。3、营养成分:水、 、 和 。此外还有pH、 及 。4、配
11、制步骤:计算称量溶化定容 倒平板或斜面5、倒平板:灭菌后冷却到 左右倒平板,培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙。平板倒置防止 。培养基溅在皿盖和皿底间的平板不用。6、制备的培养基在恒温箱中培养1-2d后无菌落生长,说明培养基制备合格。二、无菌技术防止外来杂菌的入侵,还能有效避免操作者自身被微生物感染。 1、消毒,用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括 和 )。常用方法:煮沸消毒法,杀死微生物细胞和部分芽孢; 法,杀死不
12、耐高温液体中的微生物但不破坏营养成分;化学药剂消毒法;紫外线消毒法。2、灭菌,用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子;常用方法: 灭菌、 灭菌、 灭菌(100KPa、121、维持15-30min)。3、菌落,由 繁殖而来的子细胞群。芽孢,一种休眠体;孢子,一种生殖细胞。 三、接种方法1、 法:通过接种环在固体培养基表面连续划线逐步稀释分散。接种环第一次灼烧,杀死接种环上原有的微生物;每次划线前灼烧,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使划线菌种来源于
13、0; ;划线结束灼烧,杀死接种环上残留的菌种,避免污染环境和感染操作者。灼烧后冷却避免接种环温度过高杀死菌种。2、 法:将一系列梯度稀释的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面培养。3、培养基表面菌落 、 、 基本一致,符合目的菌特点,说明接种操作成功。四、微生物计数方法 1、 计数法,利用计数板在显微镜下计数,但不能区分活菌及死菌。计数板上有1mm2×0.1mm的计数室,每个计数室400个小格。2、 计数法,在稀释度足够高的菌液中聚集在一起的微生
14、物被分散成单个细胞,形成单个菌落,选择菌落数在 之间的平板计数。菌落数比活菌实际数 ,因为 。统计结果用 数来表示。五、菌种保藏1临时保藏法:斜面管藏法,接种试管放在 冰箱中保藏,以后每36个月转移一次。2长期保存法:甘油管藏法,放在 的冷冻箱中保存。六、分离微生物的方法 土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落1、尿素分解菌的分离 尿素分解菌能合成 酶将尿素分解成氨。氨使培养基的PH升高。以 为唯一氮源
15、的培养基中加入 指示剂,培养尿素分解菌,指示剂变 色。2、 纤维素分解菌的分离 纤维素酶是一种复合酶, 酶和 酶将纤维素分解为纤维二糖, 酶将纤维二糖分解成葡萄糖。筛选方法: 法。原理:刚果红和纤维素形成红色复合物,并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,培养基上出现以 为中心的透明圈。专题三 植物组织培养技术一、植物组织培养的基本过程1、 原理: 。 细胞
16、分化的实质: 。2、全能性表达的条件: 和适宜环境条件(如营养物质、激素、温度等)3、基本过程: 丛芽、生根(试管苗)完整植株4、愈伤组织:排列疏松而无规则, 的薄壁细胞。二、菊花的组织培养1、材料选取:未开花植株的茎上部新萌生的 。2、营养:MS培养基,一般添加植物激素(浓度、使用顺序、用量比例都会影响实验)。 和 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。先用生长素,后用细胞分裂素利于细胞
17、60; ,但细胞 ;先用细胞分裂素,后用生长素细胞既 也 ;同时使用分化频率提高。生长素及细胞分裂素用量比值 时利于根分化、抑制芽形成;比值 时利于芽分化、抑制根形成;比值适中时促进 形成。3、过程:制备MS培养基 消毒接种培养移栽栽培3、 月季的花药培养 1、被子植物花粉发育:花粉,单倍体生殖细胞,由花粉母细胞经过 分裂形成。过程: 时期单核期居中期单核靠边期双核期2
18、、产生花粉植株( 倍体植株)的途径花药中的花粉 胚状体 丛芽诱导生根移栽 愈伤组织 这两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中 及其 。花粉植株高度不育,单倍体育种时需经 处理幼苗使其恢复为正常可育植株。3、 材料选择: 期花药培养成功率最高,选完 的花蕾,即月季的 期。4、 花粉发育期确定: 法红色;细胞核不易着色用焙
19、花青-铬矾法 色。5、接种:灭菌的花蕾,无菌条件下除去 、 和 ,培养基上接种花药。专题四 酶的研究及应用 一、果胶及果胶酶1果胶,不溶于水,由 聚合而成,果汁加工中影响出汁率,使果汁浑浊。2果胶酶,分解果胶的一类酶的总称,能将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。3酶活性用 表示,影响条件有温度、pH和酶的抑制剂等。二、加酶洗衣粉-含有 的洗衣粉。酶直接添加到洗衣粉中会降低酶活性,需将酶包裹起来及其他成分隔离。常用酶制剂有
20、 酶、 酶、 酶、 酶。其中应用最广泛、效果最明显的是 酶和 酶 。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子肽,使污迹从衣物上脱落。3、 酵母细胞固定化1、固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。包括 法、 法和 法。 多用包埋法,而 更适吸附或结合。细胞个大难以被吸附或结合,而酶分子很小易从包埋材料中漏
21、出。2、步骤:酵母细胞的 配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液及酵母细胞混合固定化酵母细胞使用固定化酵母细胞发酵(看到 产生,闻到 )3、注意:溶解海藻酸钠小火间断加热防止 。冷却至常温加酵母细胞,防止温度过高抑制甚至杀死酵母细胞。 溶液使海藻酸钠胶体发生聚沉,形成凝胶珠。4、比较:直接使用酶,催化效率高,低污染。但对环境条件敏感,易失活;难回收,成本高,影响产品质量。 ,既能及反应物接触,又能及产物分离,可反复利用。但不利于催化一系列的酶促
22、反应。应用:高果糖浆的生产,需要固定葡萄糖异构酶,将葡萄糖转化为果糖。 ,成本低、操作容易。但反应物不易及酶接近。专题五、血红蛋白质的分离 1、方法: 法,据 分离。较小的易进入凝胶内部通道,行程长,后洗脱下来;较大的凝胶外部移动,路程短,先洗脱下来。2、电泳:迁移率取决于蛋白质带电性质、电量、形状和大小。常用方法: 凝胶电泳、 凝胶电泳。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中迁移率完全取决于 。3、步骤:样品处理、 、 和 。红细胞的洗涤,去除 。低速短时间离心,除去上层黄色血浆,下层暗红色红细胞加五倍体积 洗涤。血红蛋白的释放:在 和 作用下破裂。分离血红蛋白溶液:离心后分层,第1层无色透明,甲苯层;第2层白色薄层固体,脂溶性物质的沉淀层;第3层红色透明液体,血红蛋白的水溶液;第4层暗红色,沉淀物。透析:透析袋小分子自由进出,大分子
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