100713高三生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1、专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一 研究思路（二）统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 应用： 统计样品中活菌的数目原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。一 研究思路（二）统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 应用： 统计样品中活菌的数目原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。注意：一般选择菌落数在30-300的平板进行记数。一 研究思路（二）统计菌落数

2、目2.稀释涂布平板计数法: 第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。组，因此结果不具有说服力。一 研究思路（二）统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法: 第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。一 研究思路（三）设置对照一 研究思路（三）设置对照主要目的是排除实验组中非

3、测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结果的影响，提高实验结果的可信度。一 研究思路（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染：判断培养基中是否有杂菌污染：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结果的影响，提高实验结果的可信度。一 研究思路（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染：判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结

4、果的影响，提高实验结果的可信度。一 研究思路（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染：判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用：判断选择培养基是否具有筛选作用：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结果的影响，提高实验结果的可信度。一 研究思路（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染：判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用：判断选择培养基是否具有筛选作用：完全培养基（

5、营养成分齐全）接种后培养完全培养基（营养成分齐全）接种后培养观察菌落数目。观察菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结果的影响，提高实验结果的可信度。二 实验设计二 实验设计1. 实验设计的内容包括：二 实验设计1. 实验设计的内容包括：实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计1. 实验设计的内容包括：2. 实验流程：实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计1. 实验设计的内容包括：2. 实验流程：实验

6、方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。（1）土壤取样）土壤取样二 实验设计1. 实验设计的内容包括：2. 实验流程：（1）土壤取样）土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。好的信封中。实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。二 实验设计（2）样品的稀释）样品的稀释二 实验设计（2）样品的稀释）样品的稀释将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个稀

7、释度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。 因为不同微生物在土壤中含量不同，其目因为不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在的是保证获得菌落数在30300之间。之间。 不同。不同。为了结果接近真实值，可将同一稀释度菌液涂为了结果接近真实值，可将同一稀释度菌液涂布到布到3个或个或3个以上的平板上，经培养，计算出个以上的平板上，经培养，计算出菌落的平均数。菌落的平均数。计算公式：计算公式：每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =（cv）m计算公式：计算公式：每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =（cv）m某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板

8、上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml） ( )a. 2.34108b. 2.34109c. 234d. 23.4 某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml） ( )a. 2.34108b. 2.34109c. 234d. 23.4 b b计算公式：计算公式：每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =（cv）m二 实验设计2. 实验流程：（3）微生物的培养与观察二 实验设计2. 实验流程：（3）微生物的培养与观察培养皿编号：104、105、106各编号

9、三个培养皿。二 实验设计2. 实验流程：（3）微生物的培养与观察培养皿编号：104、105、106各编号三个培养皿。每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15ml。二 实验设计2. 实验流程：（3）微生物的培养与观察培养皿编号：104、105、106各编号三个培养皿。每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15ml。用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤稀释液各0. 1ml，转动培养皿，使土壤稀释液与培养基混合均匀。二 实验设计2. 实验流程：（3）微生物的培养与观察培养皿编号：104、105、106各编号三个培养皿。每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15ml。用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤稀

10、释液各0. 1ml，转动培养皿，使土壤稀释液与培养基混合均匀。冷却倒置放入3037摄氏度的恒温培养箱中培养。观察纪录。三 操作提示三 操作提示1. 无菌操作2. 做好标记3. 规划时间四 操作提示三 操作提示1. 无菌操作2. 做好标记3. 规划时间四 结果分析与评价五 课题延伸五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?2. 怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？3. 怎样鉴定某细菌能够怎样鉴定某细菌能够分解尿素分解尿素？五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?2. 怎样判断细菌

11、分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？3. 怎样鉴定某细菌能够怎样鉴定某细菌能够分解尿素分解尿素？借助借助生物生物化学化学的的方法方法五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?借助借助生物生物化学化学的的方法方法co（nh2）2 + h2oco2+2nh3脲酶2. 怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?借助借助生物生物化学化学的的方法方法co（nh2）2 + h2oco2+2nh3脲酶通过通过检测培养基检测培养

12、基ph变化变化来判断来判断2. 怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?2. 怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？3. 怎样鉴定某细菌能够怎样鉴定某细菌能够分解尿素分解尿素？借助借助生物生物化学化学的的方法方法通过通过检测培养基检测培养基ph变化变化来判断来判断五 课题延伸1.怎样对怎样对分离的菌种作进一步的分离的菌种作进一步的鉴定鉴定?2. 怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？怎样判断细菌分解尿素的化学反应是否发生？3. 怎样鉴

13、定某细菌能够怎样鉴定某细菌能够分解尿素分解尿素？借助借助生物生物化学化学的的方法方法通过通过检测培养基检测培养基ph变化变化来判断来判断 在以在以尿素尿素为唯一氮源的培养基中加入为唯一氮源的培养基中加入酚红酚红指示剂指示剂。培养某种细菌后，如果。培养某种细菌后，如果ph升高，指升高，指示剂将示剂将变变红红 ，说明该细菌能够，说明该细菌能够分解分解尿素尿素。请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分

14、是该培养基按物理性质划分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分是该培养基按物理性质划分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。4 4例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分

15、解尿素的细菌所用的培养基配方请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分是该培养基按物理性质划分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。4 4葡萄糖葡萄糖例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要

16、的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分是该培养基按物理性质划分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分是该培养基按物理性质划

17、分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固体固体例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方请根据以上配方，回答下列问题：请根据以上配方，回答下列问题：(1)(1)该培养基含有微生物所需要的该培养基含有微生物所需要的_类营养类营养物质。其中最主要的碳源是物质。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)该培养基按物理性质划分是该培养基按物理性质划分是_培养基；培养基；按培养基的作用划分是按培养基的作用划分是_培养基。培养基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固体固体选择选择例：例：下面

18、是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方(3)(3)该培养基具有选择作用的原因是该培养基具有选择作用的原因是 。例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方(3)(3)该培养基具有选择作用的原因是该培养基具有选择作用的原因是 。该培养基中，唯一的氮源是尿素，只有能分解该培养基中，唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方(4)(4)该培养基中，可通过检测该培养基中，可通过检测phph的变化来判断的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是尿素是否被分解，依据的原理是 。例：例：下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方(4)(4)该培养基中，可通过检测该培养基中，可通过检测php