新建MicrosoftOfficePowerPoint演示文稿

1、认识和在生活领域的应用主讲人：宋伟笛组员： 王增科 窦吉成 王伟召 邱雪珂一、高效液相色谱仪的介绍和使用二、HPLC食物中类胡萝卜素的分析三、HPLC在未来与其他技术领域的搭接四、本次演示总结高效液相色谱柱实体图 原理示意图就是分离作用。通俗讲，就是分离开待测组分和其他干扰组分，有利于分别定性、定量。 以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法。用常压输送液体流动相的方法为经典液相色谱法，色谱法的柱效能低、分离周期长。高效液相色谱法(high performance liquid chromatography I-HPLC)是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种色谱方法，是现代分离侧定的重要手段。与

2、经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点:a、高压;b、高速;c、高效 d、高灵敏度根据分离机制的不同，液-液色谱法液-固色谱法离子对色谱法离子交换色谱法离子色谱法（目前应用最有效和广泛的方法）空间排阻色谱法1.日常操作条件： 温度：1030度，相对湿度80% 远离高电磁干扰，高震动设备 有良好的通风设备2.流动相选择（水）纯水机和超纯水机制备或者重蒸水两次到三次（新鲜水，水质要求高，时间存放要短）。推荐市场购买纯净水水温18.2度的超纯水（通过0.2um的滤膜过滤，除去有机物、无机离子和空气）使用流动相尽量要清洁 流动相交换时防止沉淀避免泵内堵塞有气泡每次分析结束后，要反复冲洗进

3、样口，防止交叉污染3、泵的保养：柱子在任何情况下都不能碰撞，弯曲或者强烈震中当柱子和色谱仪联接时，管路一定要清洁干净注意流动相的脱气避免使用高粘度的溶剂作为流动相进样品的提纯与进样量的的控制每天分析结束后，要用适当的溶剂进行冲洗 食品的化学安全性问题是人们关注的热门课题。食品是人类生活中不可缺少的必需品。各种食品具有不同的特性和营养成分，直接关系人体的健康。在食品生产过程中往往需要添加防腐剂、抗氧化剂、人工合成色素、甜味剂、保鲜剂等化学物质，其含量过高对人体健康不利。此外食品在生产、包装和运输过程中可能会被化学物质污染，如发生农药残留1、兽药残留2等危害人体健康。通过食物链的富集，人类从食品中

4、摄取了种类繁多且浓度高于环境浓度的有毒、有害物质，而这些有害物质的化学结构与性质经动植物体后变得更为复杂。因此，食品分析的重要性日益重要。（1）材料破碎 天然类胡萝卜素是存在于生物组织细胞中的。如不把细胞破碎，是不可能将其中的类胡萝卜素有效地萃取出来的。因此，“材料的破碎”，准确地讲是指细胞的破碎，破碎的程度应达到“亚细胞级”。（2）萃取 类胡萝卜素的萃取一般与材料的破碎同步进行，方法包括研磨和剪切。（化合物的相似相容原理）应注意的事项包括:快速、除氧、温度、PH（3）温度 由于其线型和刚性结构,类胡萝卜素分子HPLC条件的改变比其它化合物要敏感的多（1）类胡萝卜素的HPLC色谱行为特征：通常

5、会选择450nm左右的波长。当其吸光系数已知时,就可以根据其峰面积对化合物进行定 量分析。（2）固定相的选择： 在类胡萝卜素的正相HPLC分离中,最常用的固定相是硅胶优点：此方法不必测出校正因子，消除了某些条件的影响，也不需要严格定量进样，适用于液相试样的常规分析。02468101202468Ai/AsWi常数AsAiWi内标标准曲线法Ai/As-Ai/As-测定参比液体与标准液体的峰面的比值测定参比液体与标准液体的峰面的比值WiWi参比液体与内标液体浓度的比值参比液体与内标液体浓度的比值1.绿色蔬菜和水果：所有绿色植物组织的细胞的叶绿体内包含有同样的主要色素:叶绿素a和b、-胡萝卜素、叶黄素

6、、紫黄质和新黄质。2.黄-橙-红色水果和蔬菜：黄-橙-红色水果中类胡萝卜素的组分是十分多样化的。同样的颜色可以由不同的类胡萝卜素来产生。最典型的例子为番茄(番茄红素)和红辣椒(辣椒红素)。 1、维持皮肤粘膜层的完整性，防止皮肤干燥，粗糙；2、构成视觉细胞内的感光物质；3、促进生长发育，有效促进健康及细胞发育，预防先天不足。促进骨骼及牙齿健康成长；4、维护生殖功能；5、维持和促进免疫功能 在分析食物中类胡萝卜素的的组成方面,HPLC提供了一个很有效的方法。PDA（二极管阵列检测器）可以在选定的波长范围内与色谱过程同步对组分检测。这意味着可在HPLC上提供每种色谱组分的在线的电子吸收光谱图作为结构鉴定的第一参考信息。1、在当今的应用（nowadays)2、在未来几十年的应用(future)边缘化到大众化从手机的实例（指纹、虹膜识别）APP HPLC 在未来中的应用完全是一种假想，好