组织样液检测

1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1 1、实验原理：、实验原理：颜色反应颜色反应还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀脂肪脂肪+苏丹苏丹染液染液+苏丹苏丹染液染液橘黄色橘黄色红色红色淀粉淀粉+碘液碘液蓝色蓝色蛋白质蛋白质 +双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色 某些某些化学试剂化学试剂能够使能够使生物组织生物组织中的有关中的有关有有机化合物机化合物产生产生特定的颜色反应特定的颜色反应。常见的还原糖：常见的还原糖：葡萄糖、果糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖半乳糖1.1.怎样配制斐林试剂？怎样配制斐林试剂？ 用浓度为用浓度为 0.1g/ml

2、 0.1g/ml NaOH( NaOH(甲液甲液) ) 与等量的与等量的0.05g/ml 0.05g/ml CuSO CuSO4 4 ( (乙液乙液) ) 混合均匀而成。混合均匀而成。 NaOH + CuSO NaOH + CuSO4 4 Cu(OH) Cu(OH)2 2 蓝色沉淀蓝色沉淀 + + Cu(OH) Cu(OH) 2 2 + + 还原糖还原糖 Cu Cu 2 2 O O 砖红色沉淀砖红色沉淀 + + 问题思考问题思考2. 2. 为什么斐林试剂可检验还原糖的存在？为什么斐林试剂可检验还原糖的存在？ 斐林试剂的本质是斐林试剂的本质是Cu(OH)Cu(OH)2 2 的悬浊液，还原糖把的悬

3、浊液，还原糖把 Cu(OH)Cu(OH)2 2 还原成还原成Cu Cu 2 2 O O 沉淀。沉淀。3.3.为什么要用新配制的试剂？为什么要用新配制的试剂？ 因为斐林试剂稳定性较差，要因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配现用现配。斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂 甲液甲液乙液乙液A A液液B B液液成分成分质量浓度：质量浓度：0.10.1g/mLg/mL的的NaOHNaOH溶液溶液质量浓度：质量浓度：0.050.05g/mLg/mL的的CuSOCuSO4 4溶溶液液质量浓度质量浓度为为0.10.1g/mLg/mL的的NaOHNaOH溶溶液液质量浓度质量浓度0.010.01g/mLg/mL的的

4、CuSOCuSO4 4溶溶液液鉴定物质鉴定物质还原糖还原糖蛋白质蛋白质添加顺添加顺序方法序方法甲乙液等量混合甲乙液等量混合均匀均匀后后注入注入先先注入注入A A液液1ml1ml摇匀，摇匀，再再注入注入B B液液4 4滴摇匀滴摇匀反应条件反应条件水浴加热水浴加热不加热不加热反应现象反应现象砖红色沉淀砖红色沉淀紫色反应紫色反应斐林试剂与双缩脲试剂的异同分斐林试剂与双缩脲试剂的异同分析析4 4、实验选材：、实验选材： 实验选材应注意什么问题？能不实验选材应注意什么问题？能不能选用深色的实验材料？能选用深色的实验材料？（1 1）材料本身应为）材料本身应为白色或近于白色白色或近于白色，以，以免对实验结果

5、产生干扰；免对实验结果产生干扰；（2 2）材料应）材料应富含富含还原糖、脂肪或蛋白质还原糖、脂肪或蛋白质等相关物质，使现象明显。等相关物质，使现象明显。例、西瓜中富含果糖，甘蔗例、西瓜中富含果糖，甘蔗中富含蔗糖，可否用作检测中富含蔗糖，可否用作检测还原糖的材料？试说明原因。还原糖的材料？试说明原因。（一）还原糖的鉴定（一）还原糖的鉴定1、常用材料：苹果或梨的匀浆、常用材料：苹果或梨的匀浆2、试剂：、试剂：婓林试剂婓林试剂 还原性糖的检测还原性糖的检测(A(A为实验组；为实验组；B B为对照组）为对照组）浅蓝浅蓝棕色棕色砖红色砖红色 注意事项：注意事项： 还原糖有：还原糖有： 必须必须 颜色变化

6、：颜色变化：甲乙液必须甲乙液必须后再加入样液中后再加入样液中, 为什么不能用西瓜或甜菜？（2）蛋白质的鉴定）蛋白质的鉴定常用材料：常用材料：试剂：试剂：双缩脲试剂双缩脲试剂制备组织样液：鲜肝提取液或豆浆滤液制备组织样液：鲜肝提取液或豆浆滤液呈色反应：呈色反应：结论：说明组织样液中存在蛋白质结论：说明组织样液中存在蛋白质蛋白质（鸡蛋清稀释液）的检测蛋白质（鸡蛋清稀释液）的检测注意事项：注意事项：先加先加 ，再加，再加 鉴定前，留出一部分组织样液，以便鉴定前，留出一部分组织样液，以便颜色变化：颜色变化：变成变成橘黄橘黄 （三）脂肪的鉴定方法（三）脂肪的鉴定方法去浮色去浮色低倍低倍高倍高倍橘黄橘黄注意事项：注意事项： ，如厚薄不均就会导致观察时，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊。有的地方清晰，有的地方模糊。 酒精的作用是：酒精的作用是： 不同的染色剂所需的染色时间不同不同的染色剂所需的染色时间不同颜色变化：颜色变化：迁移训练迁移训练5 5：在人的唾液中加入双缩脲试剂，其结果是（在人的唾液中加入双缩脲试剂，其结果是（ ）A产生气泡产生气泡 B溶液呈蓝色溶液