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文档简介
1、实验1:大肠杆菌的培养和分离按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基凝固剂凝固剂琼脂琼脂扩大培养,工业生产扩大培养,工业生产分离纯化,鉴定菌种,计数,保藏分离纯化,鉴定菌种,计数,保藏选择培养基选择培养基鉴定培养基鉴定培养基天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基成分作用主要来源碳源主要作能源物质无机碳(CO2)或有机碳(糖类)氮源合成含N类化合物N2,NH3,铵,硝酸盐尿素,牛肉膏,蛋白胨无机盐调节渗透压等水生长因子调节促生长维生素,AA,碱基等消毒:较为温和的方法,如酒精 注:消毒不能杀死芽孢灭菌:强烈,所有,完全无菌灭菌消毒技
2、术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min2、巴氏消毒法:70-75 下煮30min或 80 下煮15min(牛奶)3、化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线消毒(空气)(1)常用消毒的方法:常用消毒的方法:(2)常用灭菌的方法:常用灭菌的方法:1 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌2、干热灭菌:、干热灭菌:160-170 下加热下加热1-2h。3、高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌:100kPa、121 下维持下维持15-30min.紫外灯,过滤风,酒精灯,酒精棉球在火焰旁右手3指拿锥形瓶,2指拿封口膜使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰左手将培养皿打开一条
3、缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置从大肠杆菌斜面锥形瓶中的液体培养基接种好后在37度摇床振荡培养12h工具:接种环在接种前要灭菌分离方法:平板划线分离法原理:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。只能蘸一次、再次划线从上次末端开始、划好倒置培养1-2天、划线末端出现不连续的单个菌落 灼烧接种环冷却 划线 (第一区域)蘸取菌液灼烧接种环冷却 划线 (第二区域)灼烧接种环冷却 划线 (第三区域)灼烧接种环冷却 划线 (第四区域)灼烧接
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