脐血造血干细胞治疗血友病甲12例临床分析

1、脐血造血干细胞治疗血友病甲12例临床分析李其峰 张风菊 刘鸿雁 朱叶 汪兰荣（山东省定陶县人民医院内二科 274100）【中图分类号】r458【文献标识码】a【文章编号】2095-1752 （2013） 02-0132-01血友病甲在先天性出血性中最常见。对于这种终身性疾病，血友病甲的 治疗目前是替代疗法。我院应用脐血造血干细胞移植治疗血友病甲，获得明确疗 效。目前国内外尚未见报道。现将临床分析如下。1临床资料1.1 般资料，12例均为男性,年龄1630 （平均26.6）岁。fviii小于 1%4例j%5%8例。全部自幼诊断为血友病甲。1.2方法，取健康妇女，生育健康，第一胎，男性婴儿的脐带血

2、，在木 院重点实验室内，制备脐血干细胞稀释液10ml,lml含脐血造血干细胞 l×109个。经右侧股动脉，用套管针穿刺，用干细胞注射针，经导管注射， 右侧肝叶脐血干细胞稀释液7ml,左侧肝叶脐血干细胞稀释液3ml,拔出穿刺套管 针，穿刺点无菌加压包扎3天。注射冷沉淀960®每天2次，7天。促肝细胞生 长素120mg每天1次，14天。生长激素10u,脐周皮下注射，每晚1次，14天。13疗效标准。目前国内外没有判定疗效标准。木院规定：（1）有效， 治疗后fviiic浓度上升到50%,无需补充ffviii,无自发性出血。（2）好转，治 疗后fviiic浓度上升到25%,

3、需补充fviii减少。（3）治疗后fviiic浓度无改变， 需长期补充fviii,有自发性出血。1.4.结果，12例病人，经脐血造血干细胞治疗后观察6个月，所有12 例病人fviii浓度均上升，不需补充fviii,无自发性出血。见附表。2.讨论血友病甲约占先天性出血性疾病的85%,发病率国内一些地区fviii约 为（2.33.43） / 10万。血友病的分型：fviiic水平，0 1%,重型；1% 5%,中型；5%25%轻型；25%45%,亚临床型。发病的分子机制为， 基因突变，缺失，插入异常片段，基因重排等，导致fviii缺乏，血中fviii活性 (fviiic)降低，不能与ixa, 82+

4、及磷脂组成复合物，引起血液凝血酶的形成发 生障碍，凝血酶原不能转化凝血酶，纤维蛋白原不能转变为纤维蛋白，导致凝血 缺陷性出血，皮肤、关节、腹腔、肌肉等自发性出血3.fviii基因位于xq28距端 粒仅1.5mb,全长186kb,约占x染色体全长的0.1%,由26个外显子和25个 内显子组成，fviiimrna长9029 kb,编号2351个氨基酸，分子量300kpa的蛋 白质。现有研究结果提示：肝脏可能是合成fviii的主要器官，在肝细胞内质 网、高尔基器中，加工、修錨、组装成fviii,并分泌入血。我院用脐血干细胞治疗肝硬化、肝衰竭吋发现，治疗后36个月，fviii均升高。 血友病甲患者因晚

5、期肝病接受肝或脾移植时存活者不论存活时间长短，血浆fviii 水平恢复正常4。人体试验证明，发现女性患者接受男性供体的骨髓移植，女 性患者的某些肝细胞和胆管上皮细胞核内均可见y染色体标志物的表达，提示人 体肝细胞可以来源于肝外干细胞5。应用脐血干细胞，经股动脉、肝动脉注射， 进入肝血窦，在促肝细胞生成素、生长激素的作用下，促进脐血干细胞转变为永 久性肝细胞。使之基因正常，能正常合成fviii,使活性达到正常水平，从而达到 治愈血友病的目的。目前血友病甲的治疗以替代为主，无良好的治疗对策。基因治疗，重要 合适的载体将目的基因“载”入靶细胞,腺病毒等作为血友病乙基因治疗的载体， 载体靶细胞有肝细胞

6、等。或用基因转导的方法，将正常凝血因子fviii或ix编 码基因分别导入血友病甲或血友病乙患者体内，产生“基因替代”或“基因修复” 作用，以纠正血友病的基因缺陷，并持久分泌可满足止血需要的人fviii或fix 蛋白，由于fviii或fix的表达没有组织特异性，其止血水平远低于正常人体内 含量。因此血友病是基因治疗的理想手段。我国在20世纪90年代，成功完成了 基因治疗血友病乙的临床试验7。基因治疗血友病甲未获得成功，临床上仍不 能应用。脐血干细胞的生物特性，c d34+细胞含量较高，高于骨髓、外周血, 具有高度自我更新能力；且cd34+细胞属于初始髓系分化细胞(cd33+、c d34+、c d

7、71+),表面标记缺乏c d38+和hla-dro免疫细胞系统发育不完善， 所含的淋巴细胞、nk细胞、抗原递呈细胞、等较为幼稚，其抗原表达弱，细胞 毒性低。故不用做hla配型。gvhd发生率低8。我们所做12例患者无一例发 生不良反应和gvhdo脐血干细胞移植作为重要手段，在临床各领域都广泛开展，并取得了突破成绩，相信在血友病的治疗上会有更大突破。参考文献罗绍凯，洪文德，李娟主编.临床血液病学。科学出版社出版。北京。2004年2 月，第 1 版。531-537.王鸿利，王学锌血友病的诊断与治疗的专家共识，内科理论与实践。2009,4(3)： 236-244.3张之南，李学增主编.血友病的治疗。

8、科学技术文献岀版社岀版。北京。第1版304邓家栋，杨崇礼，张天楹等主编邓家栋临床血液学。上海科学技术出版社出版.2001年7月,第版.1242.魏尉，袁丁骨髓造血干细胞与肝脏再生相关性研究进展。实用医院临床杂志。2008.5 (3)： 118-119.7苏雁，吴润晖.儿童血友病的治疗。中国小儿血液与肿瘤杂志。2010., 15 (2)： 51-54.范娅涵，蒋天伦，蔡儒青等治疗用脐血造血干细胞的制备及初步临床应用。 中国输血杂志.2010,23 (3)表：血浆fviii水平6个月前后的结果例序 123456789 10 11 12治疗前() 3.7 0.7 4.6 2.4 0.8 3.6 4.1 0.9 2.2 3.1