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文档简介
1、1组织分离培养母种组织分离培养母种母种的转管母种的转管2组织分离培养母种3组织分离培养母种v 母种的来源包括从有关部门引种,以及采用组织分离和孢子分离等方法。v 用于组织分离的种菇,要选择头潮菇,外观好、大小适中、菌肉肥厚、尚未弹射孢子、无病虫害的菇体。弹射孢子的菇用于组织分离的种菇4组织分离实验v 一、实验用具:酒精灯1盏、火柴1盒、解剖刀1把、75%酒精1瓶、接种铲1把、酒精棉球10粒、培养皿2个。5组织分离实验v 二、实验材料:种菇2朵、试管斜面培养基4支。6组织分离实验v 三、方法步骤:1、清除种菇表面及菇脚的杂物,再用75%酒精消毒种菇表面、双手及接种工具。7组织分离实验v 2、点燃
2、酒精灯,用手把种菇沿柄纵向掰开,使子实体成对等的两半(也可用解剖刀切开),用经灼烧灭菌冷却后的接种铲在菌柄与菌盖交界处挑取大小约为10mm3的组织块,迅速转接到试管斜面培养基上,然后用酒精灯火焰对试管口和棉塞进行灭菌处理,再塞上棉塞。8组织分离实验v 3、将接种好的试管置于2628的温度下培养,710天菌丝即可长满试管。培养过程中,每天检查,发现污染应及时拣出,选择菌丝生长旺盛的试管用来转管。9母种的转管v 引进或分离获得的母种数量有限,往往不能满足生产的需要,因此要对初次获得的母种进行扩大繁殖,以增加母种数量。v 将试管菌种接到新的试管斜面培养基上扩大繁殖,称为转管。10母种的转管v 一、实
3、验用具:酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、接种铲1把、镊子1把、酒精棉球10粒(装在广口瓶中)。11组织分离实验v 二、实验材料:母种试管1支、试管斜面培养基4支。12母种的转管v 三、方法步骤:1、接种前,先将接种工具和培养基放入接种箱,用紫外灯消毒30分钟(用紫外灯消毒时,人应离开接种室,并在关灯30分钟后方可进入接种室)。洗净双手,擦干,用75%酒精棉球擦拭;接着点燃酒精灯,右手拿起接种铲或接种钩,用火焰灼烧灭菌,待其冷却。13母种的转管v 2、左手并握母种试管和斜面培养基试管;右手拿接种铲或接种钩,用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞,夹在其间,迅速用火焰封口。然后右手将接种铲或接种钩通过火焰伸入母种试管,在斜面培养基菌体上挑取少量菌种(稍带培养基),迅速接入试管斜面培养基的中央,并轻轻地按压,以防滑动。棉塞经火焰消毒后塞进试管口。14母种的转管v 3、将接种后的母种试管,贴上标签,在试管棉塞外包裹报纸或牛皮纸,捆扎在一起,放在2628的恒温培养箱中培养。待菌丝长满试管后
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