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文档简介
1、实验实验1:检测生物组织中的糖类、:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质还原糖还原糖 + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀脂肪脂肪 + 苏丹苏丹(或苏丹(或苏丹)染液)染液橘黄色(或红色)橘黄色(或红色) 蛋白质蛋白质 + 双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色淀粉淀粉 + 碘碘蓝色蓝色水浴加热水浴加热一、可溶性还原糖的检测:一、可溶性还原糖的检测:(1)原理:还原糖)原理:还原糖 + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀。砖红色沉淀。水浴加热水浴加热还原糖:主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。还原糖:主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。 蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。含糖量较
2、高,颜色为无色或近于无色的植物组织。含糖量较高,颜色为无色或近于无色的植物组织。(2)选材:苹果、梨)选材:苹果、梨(3)试剂:斐林试剂)试剂:斐林试剂甲液:质量浓度为甲液:质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液的氢氧化钠溶液乙液:质量浓度为乙液:质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液的硫酸铜溶液等量混合,现用现配等量混合,现用现配还原糖的检测结果还原糖的检测结果Cu2O(砖红色)(砖红色)砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃二、脂肪的检测二、脂肪的检测(1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。)选材:经浸泡去种皮的花生种子。(2)检测过程:)检测过程:制
3、片制片选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央制成临时装片:滴制成临时装片:滴1 2滴蒸馏水,盖上盖玻片滴蒸馏水,盖上盖玻片染色:在薄片上滴加染色:在薄片上滴加2 3滴苏丹滴苏丹染液,染色染液,染色2 3min洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为为50%的酒精的酒精1 2滴滴镜检观察:镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。然后用高倍镜观察。切片:切片:花生种子(浸泡花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片。),去皮,将子叶削成薄片。橘黄色小圆颗粒橘黄色小圆颗粒
4、即为脂肪颗粒即为脂肪颗粒苏三(苏丹苏三(苏丹)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪)三、蛋白质的检测:三、蛋白质的检测:(1)原理:蛋白质)原理:蛋白质 + 双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色络合物紫色络合物(2)选材:黄豆、鸡蛋清()选材:黄豆、鸡蛋清(稀释稀释)、牛奶、豆浆)、牛奶、豆浆(3)试剂)试剂: 双缩脲试剂双缩脲试剂双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质)双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质)在碱性条件(在碱性条件(NaOHNaOH)下,蛋白质中的肽键)下,蛋白质中的肽键与与CuCu2 2作用生生紫色络合物。作用生生紫色络合物。A液液:质量浓度为:质量浓度为0.1g/mL N
5、aOHB液:质量浓度为液:质量浓度为0.01g/mL CuSO4先加先加A液后加液后加B液液注意事项:注意事项:(1)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,否则反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻否则反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净。底,且试管不易洗刷干净。 (2)过量的双缩脲试剂)过量的双缩脲试剂B会与试剂会与试剂A反应,使溶液反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。呈蓝色,而掩盖生成的紫色。鉴定物质鉴定物质生物材料生物材料所用试剂所用试剂颜色变化颜色变化还原糖还原糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉苹果、梨苹果、梨斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀花生种子花生种子苏丹苏丹染液染液苏丹苏丹染液染液橘黄色橘黄色红色红色豆浆、牛奶、鸡蛋清豆浆、牛奶、鸡蛋清双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色面粉、马铃薯匀浆液面粉、马铃薯匀浆液碘液碘液蓝色
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