夏建川生物治疗及在临床肿瘤治疗中的应用

1、结直肠癌结直肠癌 患者女患者女 70岁住院号：岁住院号：127551介入科介入科 入院诊断：直肠癌，肝转移入院诊断：直肠癌，肝转移 2003.7.202003.7.20第一次入院行直肠癌第一次入院行直肠癌Dixon切除术，手术后三周切除术，手术后三周第二次住院，对肝脏的病灶进行射频消融，射频消融后第二次住院，对肝脏的病灶进行射频消融，射频消融后2003.8.16-2004.12.16 进行进行8次次CIK细胞免疫细胞免疫治疗治疗, 出院情况：出院情况：80分；分； 第三次入院：第三次入院：2004.1.25-2004.3.26 行行4次自体次自体NK细胞治疗；细胞治疗；目前一般情况好，肝肾功能

2、正常，小便正常目前一般情况好，肝肾功能正常，小便正常, KPS 90分。分。到目前为此，共做到目前为此，共做3030次细胞免疫治疗。次细胞免疫治疗。20112011年年8 8月月2424号复号复查未见复发。患者查未见复发。患者每年到我们医院每年到我们医院接受接受6 68 8次细胞免疫治次细胞免疫治疗。疗。乳腺癌（病例一）乳腺癌（病例一） 病人，女，69岁，左乳腺癌术后患者。患者因左乳腺肿物3年于2004-7-29行左乳癌改良根治术，用环磷酰胺+阿霉素+5-氟脲嘧啶方案化疗2程，2004-10-22至2004-12-17行NK细胞回输6次,2005年4-9月行CIK细胞回输6次每年接受8次体细胞

3、免疫治疗。2007-11-20 PET-CT示未见复发。 2011-10-18 PET-CT检查未见复发。目前，患者每年接受68次细胞免疫治疗。病人病人 女女 5050岁岁 2009.3.17 PET-CT2009.3.17 PET-CT提示左乳肿物提示左乳肿物2009.3.20 2009.3.20 左乳区段切除左乳区段切除+ +左腋窝淋巴结清扫术左腋窝淋巴结清扫术术后病理：大小为术后病理：大小为2x1.5x1.5cm2x1.5x1.5cm，浸润性导管癌，浸润性导管癌，级，级，ER(-)ER(-)，PR(-)PR(-)，Her-2(-)Her-2(-)术后分期：术后分期：T1N1M0T1N1M

4、0，AA期期2009.4.10-09.8.7 2009.4.10-09.8.7 行剂量密集型行剂量密集型“ACTACT”化疗各化疗各4 4程程2009.8.31-09.10.14 2009.8.31-09.10.14 左乳左乳+ +左锁骨上放疗左锁骨上放疗2009.6-10.8 2009.6-10.8 细胞免疫治疗共细胞免疫治疗共2424次，其中次，其中NK 8NK 8次，次，D-CIK D-CIK 1212次，次，CIK 4CIK 4次，疗程间无长时间间隔。次，疗程间无长时间间隔。2011.82011.8至今至今 病情稳定，一般情况良好。病情稳定，一般情况良好。乳腺癌（病例二）乳腺癌（病例二

5、）病人 男 50岁 盲肠癌 （Dukes D, 肝转移） 200.12 CEA200.12 CEA升高，肠镜病理：腺癌升高，肠镜病理：腺癌级，级，PET-CTPET-CT：盲肠癌并肝转移瘤采用手术和化疗、生物治疗的综合治盲肠癌并肝转移瘤采用手术和化疗、生物治疗的综合治疗方案：术前新辅助化疗疗方案：术前新辅助化疗3 3次，术后辅助化疗次，术后辅助化疗9 9次，手术次，手术化疗期间均配合化疗期间均配合C225C225及细胞免疫治疗，之后进行以细胞及细胞免疫治疗，之后进行以细胞免疫治疗为主的治疗。免疫治疗为主的治疗。 具体过程：具体过程：08.1.7-08.2.4 08.1.7-08.2.4 XEL

6、OXXELOX化疗化疗3 3次次 2008.2.22 2008.2.22 右半肝切除术右半肝切除术+ +肝内一个转移瘤切除术肝内一个转移瘤切除术+ +区域区域淋巴结清扫术淋巴结清扫术 2008.3.11 2008.3.11 肝内另一个转移瘤射频消融治疗肝内另一个转移瘤射频消融治疗 2008.3.18 -08.7.8 CR+5Fu2008.3.18 -08.7.8 CR+5Fu化疗化疗1 1次，次，FOLFIRIFOLFIRI化疗化疗8 8次次 2008.1-09.1 2008.1-09.1 细胞免疫治疗细胞免疫治疗2222次，其中次，其中NK 6NK 6次，次，D-CIK 5D-CIK 5次，

7、次，CIK 10CIK 10次，次， D-T 1D-T 1次次 2009.1- 2009.1- 至今至今 病情暂稳定病情暂稳定肺癌肺癌 （病例一）（病例一） 患者男患者男70岁住院号：岁住院号：151182综合科综合科入院诊断：左上肺腺癌入院诊断：左上肺腺癌第一次住院行诱导化疗，后先后行第一次住院行诱导化疗，后先后行gamma刀治疗及射刀治疗及射频消融治疗，并于频消融治疗，并于2005.12.6-2007.6.21 共行共行CIKCIK治疗：治疗：2626次；次；DC-CIKDC-CIK治疗：治疗：1515次。出院时一般情况好，肿瘤次。出院时一般情况好，肿瘤标志物无升高，脑无占位，肺部病灶及纵

8、隔淋巴结均标志物无升高，脑无占位，肺部病灶及纵隔淋巴结均无活性无活性, ,到现在无瘤生存已到现在无瘤生存已3636个月，这个病人是综合个月，这个病人是综合治疗的范例。治疗的范例。 男，男，7676岁，非小细胞肺癌术后岁，非小细胞肺癌术后 20092009年年7 7月右侧胸腔出现胸水月右侧胸腔出现胸水 20092009年年8 8月开始链式月开始链式-CIK-CIK细胞免疫治疗细胞免疫治疗 8 8月月3 3日第一次抽血（病人日第一次抽血（病人50-60 ml50-60 ml） 8 8月月1010日开始第一程链式日开始第一程链式-CIK-CIK回输回输 到到1212月月2 2日，共抽血培养日，共抽血

9、培养9 9次，回输次，回输2727次次 每次回输细胞数量每次回输细胞数量8.238.2310107 74.84.810108 8 20092009年年1010月月1616日日CTCT证实胸水明显减少，病人一般情况良证实胸水明显减少，病人一般情况良好，自觉较前改善。好，自觉较前改善。肺癌肺癌 （病例二）（病例二） 女，女，6565岁，非小细胞肺癌岁，非小细胞肺癌 20092009年年8 8月开始链式月开始链式-CIK-CIK细胞免疫治疗细胞免疫治疗 8 8月月3 3日第一次抽血（病人日第一次抽血（病人50-60ml50-60ml） 8 8月月1010日开始第一程链式日开始第一程链式-CIK-CI

10、K细胞免疫回输（静脉细胞免疫回输（静脉/ /皮下）皮下） 到到1212月月2 2日，共抽血培养日，共抽血培养8 8次，回输次，回输2424次次 每次回输细胞数量每次回输细胞数量5 510107 72210108 8 目前病灶稳定，似较前略有缩小，病人一般情况良好，目前病灶稳定，似较前略有缩小，病人一般情况良好，自觉较前改善。自觉较前改善。肺癌肺癌 （病例三）（病例三）肿瘤细胞肿瘤细胞恶性增殖恶性增殖免疫逃逸免疫逃逸三、肿瘤的免疫基因治疗三、肿瘤的免疫基因治疗Immuno-gene therapy of cancer从广义上讲，根据免疫学的理论技术而建立的基因治从广义上讲，根据免疫学的理论技术而

11、建立的基因治疗方案，均属免疫基因治疗（疗方案，均属免疫基因治疗（Immune gene therapy或或Immunogene therapy） 。I ：493项项I/II: 160项项II : 118项项II/III: 7项项III: 19项项肿瘤的免疫肿瘤的免疫基因治疗基因治疗抗抗 原原 180 项项细胞因子细胞因子 247 项项500项项美国美国FDAFDA批准批准Provenge (sipuleucel-T)Provenge (sipuleucel-T)，一种治疗晚，一种治疗晚期前列腺癌的患者免疫活性细胞，这标志进入新癌症期前列腺癌的患者免疫活性细胞，这标志进入新癌症治疗：自身免疫活性

12、细胞治疗。（治疗：自身免疫活性细胞治疗。（2010.4.292010.4.29） PROVENGE由自身外周血单核细胞组成，包括在确定的由自身外周血单核细胞组成，包括在确定的培养期间用一种重组人蛋白，培养期间用一种重组人蛋白，PAP-GM-CSF已被活化的抗原已被活化的抗原提呈细胞提呈细胞(APCs)；前列腺酸性磷酸酶；前列腺酸性磷酸酶(PAP)，在前列腺癌组织，在前列腺癌组织中高表达的一种抗原，连接至免疫细胞激活剂粒中高表达的一种抗原，连接至免疫细胞激活剂粒-巨噬细胞集巨噬细胞集落刺激因子落刺激因子(GM-CSF组成组成)。刺激自体的。刺激自体的T淋巴细胞。将这些淋巴细胞。将这些经体外刺激的

13、细胞回输给前列腺癌患者，经体外刺激的细胞回输给前列腺癌患者， 从而达到治疗前列从而达到治疗前列腺癌患者的目的。腺癌患者的目的。Sipuleucel-T成为成为FDA历史上历史上第一个批准第一个批准上上市市的肿瘤疫苗的肿瘤疫苗。前列腺癌是一个比较理想前列腺癌是一个比较理想的生物治疗模型的生物治疗模型发病率高发病率高病情进展病情进展缓慢缓慢肿瘤相关肿瘤相关抗原表达抗原表达化疗疗效化疗疗效有限有限“非必需非必需”组织组织前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因PSA、PAP等等内分泌治疗无效的患者，此时内分泌治疗无效的患者，此时肿瘤负荷较小，机体具有一定肿瘤负荷较小，机体

14、具有一定的抗肿瘤能力的抗肿瘤能力Nat Rev Immunol. 2010, 10: 580-593. 肿瘤侵润性肿瘤侵润性T T细胞受体免疫基因治疗细胞受体免疫基因治疗 免疫基因治疗在的肿瘤临床中的应用免疫基因治疗在的肿瘤临床中的应用Science. 2006 Oct 6;314(5796):126-9. Epub 2006 Aug 31 经基因修饰的自体经基因修饰的自体DCDC细胞激活的细胞激活的T T淋巴淋巴细胞的制备细胞的制备T淋巴细胞淋巴细胞成熟成熟DC细胞细胞DC细胞刺激的自体细胞刺激的自体T淋巴细胞（淋巴细胞（DC-T）肿瘤抗原肿瘤抗原共培养共培养负载肿瘤抗原的负载肿瘤抗原的AA

15、V感染感染负载负载CEA CEA 抗原的抗原的DCDC刺激的刺激的T T淋巴细胞的表型淋巴细胞的表型一些抗原与肿瘤的发生发展密切相关一些抗原与肿瘤的发生发展密切相关1. Viral antigens:Primary hepatic carcinoma: Hepatitis B virus, Hepatitis C virusCervical cancer :Human papillomavirus: E6, E7.2. Self-antigens:Lung cancer: k19, Her-2/neu, etc.Primary hepatic carcinoma: -FP.Breast can

16、cer: Her-2/neu, BA46, etc.Prostate cancer: PSA, PSMA自体自体DC-TDC-T淋巴细胞在恶性肿瘤淋巴细胞在恶性肿瘤治疗中的策略治疗中的策略肿瘤患者外周血（肿瘤患者外周血（80-100ml）患者（一个月患者（一个月2次）次）特异性杀伤肿瘤细胞特异性杀伤肿瘤细胞抑制肿瘤的复发和转移抑制肿瘤的复发和转移前列腺癌前列腺癌 患者，男，年龄：68岁 2007年4月，常规体检时，发现PSA显著升高，100ng/L穿刺活检提示：前列腺癌，Gleason评分：10分。胸部CT: 未见异常。 行内分泌治疗：诺雷德 Zoladex（goserelin）+康士得/Ca

17、sodex （Bicalutamide）。PSA迅速下降，9个月后降至0.2以下，继续维持9个月后，选择了间断治疗（停用这两种药物），PSA迅速上升，6个月后升至16，继续内分泌治疗，PSA迅速降至0.16，以后就逐步上升，倍增时间1416周。自2010年9月开始出现全身骨痛，以左髋部明显，胸腹部CT：椎体及髂骨广泛转移灶， 全身骨扫描：中轴骨广泛转移。左髋臼及多处肋骨转移。 2011.2-13: PSA: 1376 ng/ml ， 2011.3-28开始进行生物治疗，回输两次DCT，2011.4.25 PSA: 737 ng/ml，2011.5.25回输四次DCT（负载PSA抗原的DC刺激的

18、自体T淋巴细胞）,一星期后检测 PSA 561 ng/ml。现在患者感觉精神改善，无明显副反应。生活能够完全自理，能够自由下床活动，左髋部不适改善，疼痛不明显，无需止痛药物。饮食可，精神可。 DCT 细胞细胞免疫治疗免疫治疗用负载前列腺癌细胞高表达抗原用负载前列腺癌细胞高表达抗原PSA和和PSMA负载自体负载自体DC刺激的自刺激的自体体T淋巴细胞对前列腺癌患者治疗后，外周血中淋巴细胞对前列腺癌患者治疗后，外周血中PSA水平明显下降水平明显下降PSA: 1376 ng/mlPSA 561 ng/ml三、如何制定出适合病人的个体化体细胞免三、如何制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案。疫治疗方案

19、。肿瘤体细胞免疫治疗与常规治疗有机结合肿瘤体细胞免疫治疗与常规治疗有机结合的治疗策略的治疗策略恶性肿瘤恶性肿瘤手术治疗手术治疗放化疗敏感（常规放化疗）放化疗敏感（常规放化疗）疾病稳定期疾病稳定期 专科治疗专科治疗 不能手术（不能手术（期，期，期）复发者期）复发者 可手术可手术 放化疗不敏感放化疗不敏感 细胞免疫治疗细胞免疫治疗 化疗敏感化疗敏感 化疗后化疗后 细胞免疫治疗细胞免疫治疗联合专科治疗联合专科治疗（靶向治疗）（靶向治疗）细胞免疫治疗联合内细胞免疫治疗联合内分泌或靶向治疗分泌或靶向治疗 细胞免疫治疗细胞免疫治疗（微创介入）（微创介入）（卵巢癌，乳腺癌，小细胞肺癌等）（卵巢癌，乳腺癌，小

20、细胞肺癌等）放化疗间隙联合细胞免疫治疗（肾癌，前列腺癌，黑色素瘤等）（肾癌，前列腺癌，黑色素瘤等） （乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，小细胞（乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，小细胞肺癌等）肺癌等）化疗不敏感化疗不敏感 （原发性肝癌，肾癌，前列腺癌等）（原发性肝癌，肾癌，前列腺癌等）疾病稳定期疾病稳定期 （一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极（一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案抽血30ml第1天先抽血30ml进行下个疗程治疗；同时进行第3次CIK回输第1次CIK回输第2次CIK回输第4天第8天第12天第14天第

21、16天开始下一个疗程的治疗( (二）细胞免疫治疗与化疗有机结合二）细胞免疫治疗与化疗有机结合化疗前1天抽血，免疫细胞分离培养第一周第二周7天开始化疗第2次开始化疗回输CIK、NK、D-CIK等细胞化疗前1天抽血，免疫细胞分离培养（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案放疗前抽静放疗前抽静脉血脉血50ml，上午上午放疗放疗放疗放疗放疗放疗上午放疗后，上午放疗后，下午回输免疫下午回输免疫细胞细胞第第2天天周二周二第第3天天周三周三第第1天天周一周一第第4天天周四周四第第6天天周六周六第第7天天周日周日第第5天，天，周五下午回周五下午回输培养的输培养的CIK、NK

22、、D-CIK等细胞等细胞休息休息休息休息（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案第一周第一周NKNK第二周第二周D-CIK第三周第三周NK第四周第四周D-CIK抽血抽血30ml回输第三回输第三周周NK抽血抽血50ml抽血抽血30ml，回输第一周回输第一周NK抽血抽血50ml，回书第二周回书第二周D-CIK第五周第五周第六周第六周回输第四周回输第四周D-CIKThreshold for tumor regressionImmunestimulation/inflammationSpontaneous release of immune modulatorsby tumor

23、 cellsSpontaneous regression/response totherapyTumor progressionAntigen-specific Immunization，生物靶向药物 （抗肿瘤抗体和小分子化合物）Non-specific immune stimulationNK cells，CIK cells，D-CIK,IL-2.IFN-采用的治疗方案采用的治疗方案Threshold for tumor regressionImmunestimulation/inflammationSpontaneous release of immune modulatorsby tum

24、or cellsSpontaneous regression/response totherapyTumor progressionAntigen-specific Immunization，生物靶向药物 （C225, Iressa）Non-specific immune stimulationNK cells，CIK cellsIL-2. IFN-恶性肿瘤发生转移的示意图恶性肿瘤发生转移的示意图Induction of anti-tumor immunization in human with DC Vaccination体细胞治疗在临床肿瘤治疗中的作用体细胞治疗在临床肿瘤治疗中的作用Che

25、ster Southam: 在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞结果结果:注射的癌细胞在注射的癌细胞在健康人健康人体内不生长体内不生长.注射的癌细胞在注射的癌细胞在癌症病人癌症病人体内可长成大肿瘤。体内可长成大肿瘤。结论：结论：癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究结果为抗癌界带来极大提示，研究结果为抗癌界带来极大提示，1968年被推选成全美抗癌学会主席。年被推选成全美抗癌学会主席。Science，1957年年 一月一月 125: 158

26、-160 首次证明人体内天然抗癌活性的存在首次证明人体内天然抗癌活性的存在非粒细胞非粒细胞单核细胞单核细胞粒细胞粒细胞血浆血浆红细胞红细胞人体白细胞分离人体白细胞分离离心离心人体粒细胞抗肿瘤的研究人体粒细胞抗肿瘤的研究中性粒细胞中性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞淋巴细胞单核细胞单核细胞/巨噬细胞巨噬细胞人体内白细胞分类人体内白细胞分类粒粒细细胞胞非非粒粒细细胞胞接触病原接触病原自然免疫自然免疫:自然杀伤细胞自然杀伤细胞巨噬细胞巨噬细胞中性粒细胞中性粒细胞补体补体(需要几小时或几天需要几小时或几天)获得免疫获得免疫：B 淋巴细胞淋巴细胞 (抗体抗体)T 淋巴细胞淋巴细胞(需要几星期需要几星期)免疫系统的两大分支免疫系统的两大分支12.525.037.550.075.062.587.5100.00正常小鼠正常小鼠五十岁以上五十岁以上的癌症病人的癌症病人抗癌小鼠抗癌小鼠五十岁以上的五十岁以上的正常人正常人年青人年青人人体人体T T淋巴细胞的体外杀癌活性淋巴细胞的体外杀癌活性 ( (明标实验法）明标实验法）对对人人宫宫颈颈癌癌细细胞胞(Hela)杀杀伤伤率率（%）020406080100天然抗癌活性在不同人群中不同分布（双盲试验法）天然抗癌活性在不同人群中不同分布（双盲试验法）癌癌细细胞胞杀杀伤伤活活性性（%）健健康康人人小小于于50岁岁