遗传学实验课件2 (1)

1、请问请问解离解离与与软软化化的目的是什的目的是什么？么？为保证染色的为保证染色的充分充分要注意哪要注意哪些问题？些问题？压片时应注意的压片时应注意的问题有哪些？问题有哪些？请注意比较经过预处理和未经预处理的材料有何不同？1.了解果蝇生活史各阶段的形态特征，观察果蝇的几了解果蝇生活史各阶段的形态特征，观察果蝇的几种常见的突变类型。种常见的突变类型。2.掌握辨别雌雄果蝇的方法。掌握辨别雌雄果蝇的方法。3.了解果蝇的饲养方法和处理方法。了解果蝇的饲养方法和处理方法。 1.材料：野生型和常见的突变型果蝇。材料：野生型和常见的突变型果蝇。2.用具：体视显微镜、放大镜、小镊子、培养瓶、麻醉瓶、用具：体视显

2、微镜、放大镜、小镊子、培养瓶、麻醉瓶、白瓷板、培养皿、毛笔。白瓷板、培养皿、毛笔。3. 药品：乙醚、琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。药品：乙醚、琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。果蝇形体小，生长迅果蝇形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养速，繁殖率高，饲养简便，突变性状多，简便，突变性状多，是遗传学研究的极好是遗传学研究的极好材料。材料。1. 果蝇培养基的配制果蝇培养基的配制 玉米粉培养基玉米粉培养基2.果蝇的生活史观察果蝇的生活史观察 3.果蝇的麻醉果蝇的麻醉 乙醚麻醉乙醚麻醉0.5min后转入培养皿中，如观后转入培养皿中，如观察中苏醒，可在培养皿内放一个滴有乙醚的滤纸条补救。察中苏醒，可在

3、培养皿内放一个滴有乙醚的滤纸条补救。 4.果蝇的性状观察果蝇的性状观察1.描述果蝇的生活史。描述果蝇的生活史。2.如何区别雌雄果蝇？如何区别雌雄果蝇？1. 取材取材 取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，滴加取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，滴加0.7生生理盐水理盐水2.剖取果蝇唾腺剖取果蝇唾腺 3.染色压片染色压片4.镜检镜检1. 绘出所观察到的果蝇唾腺染色体的图像，标明染色中心和绘出所观察到的果蝇唾腺染色体的图像，标明染色中心和5条臂。条臂。2. 果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什么区别？果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什么区别？通过自行设计实验方案，研究果通过自行设计实验方案，研究果蝇两

4、对相对性状的杂交试验结果蝇两对相对性状的杂交试验结果分析，验证独立分配规律。分析，验证独立分配规律。1.材料：长翅、黑檀体与残翅、灰体的果蝇。材料：长翅、黑檀体与残翅、灰体的果蝇。2.用具：体视显微镜、饲养瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、用具：体视显微镜、饲养瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖针、镊子、毛笔等。解剖针、镊子、毛笔等。3. 药品：乙醚、酒精等。药品：乙醚、酒精等。长翅黑檀体的雌蝇与长翅黑檀体的雌蝇与残翅、灰体的雄蝇交残翅、灰体的雄蝇交配配(或反交或反交)，F1代自代自交而得的交而得的F2产生性状产生性状分离和重组，出现四分离和重组，出现四种表现型，比例为种表现型，比例为9:3:3:1。

5、1. 麻醉麻醉2.选取长翅、黑檀体处女蝇和残翅、灰体雄蝇选取长翅、黑檀体处女蝇和残翅、灰体雄蝇56对对(或反交或反交)，一起放入事先装有培养基的饲养瓶内。，一起放入事先装有培养基的饲养瓶内。3.一周后倒出亲本果蝇，等一周后倒出亲本果蝇，等F1羽化后进行观察、记录。羽化后进行观察、记录。 4.任意选取正交或反交组合的任意选取正交或反交组合的F1雌雄果蝇雌雄果蝇(雌蝇必须处雌蝇必须处女蝇女蝇)78对，放入一个培养瓶中。对，放入一个培养瓶中。5.一周后倒去一周后倒去F1果蝇，待果蝇，待F2羽化后羽化后10天进行观察统计。天进行观察统计。1.对观察资料进行对观察资料进行2测验，讨论实验结果是否符合独立

6、测验，讨论实验结果是否符合独立分配规律。分配规律。2.果蝇杂交时应注意哪些事项？果蝇杂交时应注意哪些事项？1. 掌握人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物掌握人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。育种上的意义。2. 观察多倍体植物，鉴别植物染色体数目的变化。观察多倍体植物，鉴别植物染色体数目的变化。1.材料：玉米、水稻或其他植物种子。材料：玉米、水稻或其他植物种子。 2.用具：显微镜、生化培养箱、冰箱、天平、镊子、解剖用具：显微镜、生化培养箱、冰箱、天平、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、吸水纸。针、刀片、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、吸水纸。3. 药品：秋水仙素

7、、药品：秋水仙素、95%酒精、冰醋酸、盐酸、碘化钾等。酒精、冰醋酸、盐酸、碘化钾等。1. 秋水仙素溶液配制秋水仙素溶液配制2. 材料处理、固定、保存材料处理、固定、保存3. 压片压片4. 镜检镜检绘出玉米根尖多倍性细胞的中期染色体图像。绘出玉米根尖多倍性细胞的中期染色体图像。1. 了解微核测试原理和毒理遗传学意义了解微核测试原理和毒理遗传学意义 。2. 学习蚕豆根尖的微核测试技术学习蚕豆根尖的微核测试技术 。1.材料：蚕豆种子。材料：蚕豆种子。 2.用具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯等。用具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯等。3. 药品：卡诺固定液、盐酸酒精解离液、改良苯酚品红染药品

8、：卡诺固定液、盐酸酒精解离液、改良苯酚品红染液、液、NaN3等。等。微核是真核生物细微核是真核生物细胞经各种理化因子胞经各种理化因子作用后引起染色体作用后引起染色体畸变，在间期细胞畸变，在间期细胞中的一种表现形式。中的一种表现形式。1.浸种催芽浸种催芽2.用被检测液处理根尖用被检测液处理根尖3.根尖细胞恢复根尖细胞恢复4.根尖细胞固定、酸解、染色根尖细胞固定、酸解、染色 5.显微镜下观察显微镜下观察1. 在蚕豆根尖细胞的微核测试中，为什么要进行恢在蚕豆根尖细胞的微核测试中，为什么要进行恢复培养？复培养？2. 产生微核的根尖细胞在产生前的分裂中期可能出产生微核的根尖细胞在产生前的分裂中期可能出现

9、什么样的中期分裂图像？现什么样的中期分裂图像？掌握从高等真核生物细胞中制备基因组掌握从高等真核生物细胞中制备基因组DNA的基本原的基本原理，熟悉从高等植物中提取基因组理，熟悉从高等植物中提取基因组DNA的技术流程。的技术流程。1.材料：幼嫩的水稻幼苗。材料：幼嫩的水稻幼苗。 2.用具：水浴锅、液氮罐、离心机、移液枪、电泳设备、用具：水浴锅、液氮罐、离心机、移液枪、电泳设备、凝胶成像分析系统、研钵等。凝胶成像分析系统、研钵等。3. 药品：药品：2CTAB抽提缓冲液、氯仿抽提缓冲液、氯仿 异戊醇（异戊醇（24 1）、）、异丙醇、无水乙醇、异丙醇、无水乙醇、70%乙醇、乙醇、TE等。等。采用采用CTAB法提取植物法提取植物DNA1.样品加液氮研磨成粉末，加样品加液氮研磨成粉末，加2CTAB抽提缓冲液抽提缓冲液65水浴保温水浴保温30 min以上；以上；2.加入等体积的氯仿加入等体积的氯仿 异戊醇（异戊醇（24 1）；）；3. 12000 rpm，室温，离心，室温，离心1020 min； 4.将上清液加入将上清液加入2/3体积的经体积的经-20预冷的异丙醇；预冷的异丙醇；5.将将DNA沉淀用沉淀用70%乙醇洗涤；乙醇洗涤；6.干燥后的干燥后的DNA沉淀溶于适量沉淀溶于适量TE（pH8.0）缓冲液中；）缓冲液中； 7.取少量取少量DNA溶液在溶液在0.8%的琼脂