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文档简介

1、绪论主要内容:1. 微生物(microorganism): 是一群个体微小、结构简单、肉眼看不到必须借助显微镜才能观察到的微小生物的总称。 微生物按其大小、结构和组成的不同可分为非细胞型微生物(病毒)、原核细胞型微生物(细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌)和真核细胞型微生物(真菌)。2. 微生物学发展的三个时期: 经验微生物学时期,实验微生物学时期,现代微生物学时期。 微生物学的两个奠基人: 巴斯德(Louis Pasteur):推翻“自然发生说”、巴氏消毒法、制备疫苗。 郭霍(Robert Koch):固体培养基、染色法、实验动物感染及郭霍法则。3. 医学微生物学(medical

2、 microbiology)是研究与医学有关的微生物的生物学性状、致病性与免疫、诊断及预防的一门基础和应用学科。思考题1.定义:微生物、医学微生物学2.微生物分哪3类,有什么区别?并举例说明。3.微生物的主要两位奠基人是谁?4.近年医学微生物学得到了迅速地发展,主要表现在哪些方面?5.医学微生物学未来发展方向是什么? 第一篇:细菌学 第1章:细菌的形态与结构主要内容:1. 定义:细菌 L 型又称细胞壁缺陷型,是细胞壁中的肽聚糖受到理化或生物因素的破坏或抑制,致使细胞壁发生缺陷而在高渗环境下仍能存活生长的一类细菌。革兰阳性菌L型称原生质体,革兰阴性菌L型称原生质球。某些细菌 L 型仍可有致病力,

3、在临床症状明显而常规的培养阴性时应考虑之。 质粒 (Plasmid): 存在于细菌胞质中的染色体外的遗传物质,为双股环状 DNA,决定细菌的某些遗传性状,如有无菌毛、细菌素、毒素和耐药性。 荚膜 (capsule):由细菌所分泌的包绕在菌体外的一层粘液性物质,具有抗吞噬及粘附作用,与细菌的致病性有关。 鞭毛(flagellum):由菌体伸出的细长呈波状弯曲的丝状物,是细菌运动器官。 菌毛(pilus):某些菌体表面存在的纤细短直的丝状物,分为普通菌毛和性菌毛。普通菌毛是细菌的粘附器官,与细菌的致病性有关。性菌毛由F质粒编码,参与遗传物质的传递。 芽胞(Spore):某些细菌在一定环境条件下,胞

4、质脱水浓缩,在菌体内部形成的圆形小体,可用于细菌的鉴别,因其抵抗力较一般细菌繁殖体强,是判断灭菌效果的指标。异染颗粒:胞质颗 粒的一种,多由 RNA 和多偏磷酸盐组成,嗜碱性强,用亚甲兰染色着色较深。可用于细菌的鉴别。(白喉杆菌、鼠疫杆菌)外膜蛋白(OMP):革兰氏阴性菌细胞壁外膜脂质双层中镶嵌的蛋白质,参与物质扩散或为噬菌体、性菌毛或细菌素的受体。菌运2. 细菌的基本测量单位是微米(m)。基本形态:球菌、杆菌、螺形菌。基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质。特殊结构:荚膜、芽胞、菌毛、鞭毛。3. 细胞壁的主要成分是肽聚糖。革兰氏阳性菌的肽聚糖由聚糖骨架和四肽侧链、五肽交联桥组成。革兰氏阴性菌

5、的肽聚糖由聚糖骨架和四肽侧链组成。细胞壁能维持细菌外形,抗低渗。革兰氏阳性菌细胞壁特有的结构是磷壁酸,革兰氏阴性菌细胞壁特有的结构是外膜。外膜由脂质双层、脂蛋白和脂多糖(LPS)组成,脂多糖即革兰氏阴性菌的内毒素,毒性主要成分在脂质A。4. 由于细菌细胞壁成分及等电点的差异,革兰染色后被分成两大类:革兰氏阳性细菌(紫色 ) 和革兰氏阴性细菌 (红色)。革兰染色法的步骤: 结晶紫初染 碘液媒染 95% 乙醇脱色 稀释石炭酸复红复染。革兰染色法的意义: 鉴别细菌 选择抗菌药物 与致病性有关。5.细胞膜上有中介体,与细菌的分裂和呼吸有关。细胞质内核糖体是合成蛋白质的场 所,沉降系数为 70 S,由

6、50S 和 30S两个亚基组成。思考题1.细菌有哪3种形态? 2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些?特殊结构各有何作用?3.G+菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成?4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌?5.简述革兰染色法操作步骤 第02章 细菌的生理 主要内容:1. 细菌生长繁殖的四个基本条件: 充足的营养 必要的气体环境(据此可分为专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌)。 适宜的温度(病原菌大多为37)。 合适的 PH 值:大多为 7.27.6,但结核分枝杆菌和霍乱弧菌等例外。细菌以无性二分裂方式繁殖。渗透压。2. 细菌的分解性代谢产物可用生化反应鉴定:糖发酵试验、VP 试验、

7、甲基红试验、枸橼酸盐利用试验、吲哚试验、硫化氢试验、尿素酶试验。其中吲哚(I)甲基红(M)、VP(Vi),枸橼酸盐利用(C)四种试验常用于鉴定肠道杆菌,合称IMViC试验。大肠杆菌对这四种试验的结果是十十一一,而产气杆菌是一一十十。医学上有重要意义的细菌的合成性代谢产物:热原质、侵袭性酶与毒素、色素、抗生素、细菌素、维生素。3. 细菌的生长曲线描述的是培养时间与培养物中活菌数之间的关系,分四期: 迟缓期 对数期(形态染色、生化反应典型,常用于医学研究) 稳定期(毒素、抗生素、芽胞产生期) 衰亡期。4. 培养基(culture medium):是由适合于细菌生长繁殖需要的各种营养物质混合配制而成

8、的基质。按用途分为基础培养基、增菌培养基、鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基。按物理性状分为固体、液体、半固体培养基。液体培养基主要用于增菌,有沉淀、浑浊、膜 状生长三种生长状态。固体培养基主要用于杂菌的分离和培养,有光滑型(S 型),粗糙型(R 型),粘液型(M 型)三种菌落。半固体培养基主要用于观察细菌的动力及短期保种,有沿穿刺线线状生长和扩散生长两种生长状态。 菌落(colony):细菌划线接种在固体培养基表面时,因划线的分散作用,单个细菌繁殖后堆积成肉眼可见的细菌集团 纯培养(pure culture ):从固体培养基上挑出一个菌落移种到另一培养基中,生长出来的细菌均为纯种,称为纯培养

9、。5. 人工培养细菌的用途:病原诊断及预防感染、鉴定与研究细菌、制备生物制品、基因工程。6.细菌的分类有种系分类和人工分类两种。 细菌的分类层次为界、门、纲、目、科、属、种。 标准菌珠(type strain):具有某种细菌典型特征的菌株 命名法:拉丁文双命名。原则:菌名=属(大写拉丁文名词源于细菌形态或首发现者或巨大贡献者)+种(小写拉丁文形容词源于细菌的重要生物学特征、定植部位或所致疾)。思考题1.细菌的生长繁殖条件是什么?2.什么是细菌生长曲线?细菌生长曲线分哪4个阶段?3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型?4.细菌合成代谢产物有哪几种?5.什么是培养基及分离培养,简述细菌在培养基上

10、的生长状态。 第03章 消毒与灭菌主要内容:1. 消毒(disinfection):杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 灭菌(sterilization):杀死物体上所有微生物的方法,包括病原微生物、非病原微生物及芽胞。抑菌 (bacteriostasis):抑止体内或体外细菌的生长繁殖。常用抑菌剂为抗生素。 防腐(antisepsis):阻止或抑制细菌生长繁殖的方法,细菌一般不死亡。无菌(asepsis):不含活菌。无菌操作:防止细菌进入人体或其它物品的操作技术。2. 消毒与灭菌分为 物理学方法及化学方法: 物理学方法:热力灭菌法:干烤箱: 160170

11、2 小时可达到灭菌效果,主要用于高温下不变质、不损坏、不蒸发物品的灭菌;巴氏消毒灭菌法: 62 半小时或 71.7 1530 秒主要用于牛奶、酒类等消毒;高压蒸气灭菌法: 是最有效的灭菌方法,121.3 ,1.05Kg/cm2 1520分钟,用于耐高温、耐湿物品的灭菌。 电磁波辐射法:红外线主要通过高热灭菌;紫外线 265266nm杀菌效果最好,作用于细菌DNA,主要用于室内空气及不耐热物体表面消毒;电离辐射产生游离基破坏细菌 DNA,用于塑料制品、食品等消毒。微波常用2450MHZ与915MHZ,用于非金属物品、食品用具 滤过法:物理阻留除去液、气体中的细菌,用于除去一些不耐高温的血清、毒素

12、、细胞培养基中的细菌. 超声波:空腔化作用裂解细菌,主要用于粉碎菌细胞,提取细胞组分。干燥与低温:干燥使细菌脱水,用于保存食品, 低温中冷冻真空干燥法是保存菌种最好的方法。化学方法 菌体蛋白变性剂:酚、醇、重金属盐、酸类、醛类; 干扰细菌代谢:氧化剂、重金属盐等 破坏细胞膜:表面活性剂等。3. 影响消毒灭菌效果的因素 消毒 剂性质、浓度、作用时间 微生物的种类和数量 温度 PH 值 有机物思考题1.名词解释:消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作、生物安全2.简述紫外线杀菌的作用机制和注意事项3.湿热灭菌有哪些方法? 各有何用途?4.在温度和时间相同的情况下,为什么湿热灭菌法的效果比干热法好? 5.

13、常用消毒剂种类?简述化学消毒剂的杀菌机制。6.简述病原微生物的分类及病原微生物实验室的分级?7.当从事病原生物学安全实验室工作时,应考虑哪些与生物安全相关的问题? 第4章 噬菌体主要内容:1. 噬菌体的概念:噬菌体(phage):是感染细菌、真菌、放线菌、螺旋体等微生物的病毒。2. 噬菌体的形态与结构:最常见的为蝌蚪形,由核酸和蛋白质组成。3. 根据进入宿主菌后所致结果不同,噬菌体分为毒性噬菌体及温和噬菌体。 毒性噬菌体(virulent phage):在宿主菌内复制产生子代噬菌体并最终导致宿主菌裂解的噬菌体。毒性噬菌体只有溶菌性周期。 温和噬菌体(temperate phage):基因组能与

14、宿主染色体整合,不产生子代噬菌体,不导致宿主菌裂 解的噬菌体。温和噬菌体可有溶原性周期和溶菌性周期。 前噬菌体(prophage):整合在宿主菌染色体上的噬菌体基因组,可随宿主菌染色体的复制而复制,并随细菌的分裂而传代。4. 噬菌体的应用: 细菌的分型、鉴定 研究分子生物学 细菌感染的诊断与治疗思考题1.噬菌体的概念及其特征。2.毒性噬菌体和温和噬菌体、前噬菌体、溶原性细菌、溶原性转换的概念及特征。3.溶菌性周期与溶原性周期的区别。 第八章 球菌思考题:1.名词解释 SPA、抗O试验、2.葡萄球菌的分类、主要致病物质及所致疾病?3.链球菌的分类、主要致病物质所致疾病?4.肺炎链球菌与甲性溶血性

15、链球菌的区别方法?5、淋球菌和脑膜炎球菌的致病物质及所致的疾 第9章 肠道杆菌主要内容:肠道杆菌 革兰氏阴性、多数有鞭毛和菌毛普通培养基生长 生化反应活泼,多数致病菌不分解乳糖,非致病菌分解 抗原构造复杂,均有菌体 (O)抗原,多数有鞭毛(H)抗原,部分有表面(Vi 或 K)抗原。 抵抗力不强。易变异。思考题1.简述肠道杆菌的共同特性2.大肠埃希菌肠最常见的道外感染有哪些?3.大肠埃希菌与人类的关系如何?4.归纳志贺菌致病的主要特点。5.采集细菌性痢疾病人粪便标本进行细菌分离时应注意些什么?6.急性菌痢的典型症状有哪些?解释其形成机制7.简述肠产毒型大肠埃希菌的致病机制.8.简述人类感染伤寒沙

16、门菌的分离培养和鉴定程序9.简述肥达反应的原理和结果分析 第10章 弧菌属霍乱弧菌主要内容:1. 革兰氏阴性逗点状,运动活泼,碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好,耐碱不耐酸。2. 致病物质:鞭毛、菌毛、 霍乱肠毒素(一个A亚单位,五个B亚单位构成,已知毒性最强的肠毒素)、0139血清群有荚膜。3. 所致疾病:霍乱。七次世界性大流行中,前六次由古典生物型引起,第七次由EITOr生物型引起。1992年发现新的流行株0139血清群。4. 检查:取米泔水样粪便悬滴检查可见运动活泼的弧菌,革兰氏染色阴性,用碱性蛋白胨水或 TCBS 琼脂培养基础分离培养后做血清学反应及生化反应鉴定。副溶血性弧菌主要内容:1. 副溶血性弧菌是一种嗜盐细菌,培养时需加一定浓度 NaCl。2. 副溶血性弧菌主要经海产品或盐腌渍食品传播引起食物中毒。思考题1.霍乱是如何传播的?其临床表现和预后如何?2.霍乱弧菌的主要致病物质是什么?简述其作用机理。3.简述霍乱弧菌的抗原结构,分型及与致病的关系。4.如何预防副溶血性弧菌所致的食物中毒? 第11章 厌氧性细菌思考题名词解释:汹涌发酵 简答:1、

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