生物实验专题高中必修一二

1、 必修一、二生物实验专题【基础知识】光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法结构：光学部分：目镜、镜筒、物镜、遮光器（有大小光圈）和反光镜（有平面镜和凹面镜）机械部分：镜座、倾斜关节、镜臂、载物台（上有通光孔、压片夹）、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。注：目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。呈像原理：映入眼球内的是倒立放大的虚像。（物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度）放大倍数：目镜和物镜二者放大倍数的乘积注：显微镜放大倍数是指直径倍数，即长度和宽度，而不是面积。二、显微镜的使用：置镜（装镜头）对光置片调焦观察1安放。显微镜放置在桌前略偏左，距桌缘8

2、10cm处，装好物镜和目镜（目镜5× 物镜10×）2对光。转动转换器，使低倍镜对准通光孔，选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜，同时把反光镜转向光源，直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜；光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜选较大的光圈选反光镜（左眼观察）3观察。将切片或装片放在载物台上，标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近切片（约0.5cm），左眼观察目镜，（反时针）旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，看到物像时轻微来回旋转细准焦，直到物像清晰。（找不到物像时，可重复

3、一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。观察时两眼都要睁开，便于左眼观察，右眼看着画图。侧面观察降镜筒左眼观察找物像细准焦螺旋调清晰4高倍镜的转换。找到物像后，把要观察的物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜，只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到物像清楚为止。顺序：移装片转动镜头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。问1：低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC） A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜问2：放大倍数与视野的关系：放大倍数越小，视野

4、范围越大，看到的细胞数目越多，视野越亮，工作距离越长；放大倍数越大，视野范围越小，看到的细胞数目越少，视野越暗，工作距离越短。故装片不能反放。5装片的制作和移动：制作：滴清水放材料盖片移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反）6污点判断：1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜；3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。7完毕工作。使用完毕后，取下装片，转动镜头转换器，逆时针旋出物镜，旋进镜头盒；取出目镜，插进镜头盒，盖上。把显微镜放正。 【实验探

5、究】实验一：观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一）一实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法二实验原理：1甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。2盐酸能够改变细胞膜的通透性，1.加速染色剂进入细胞，2.使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。三方法步骤：操作步骤注意问题解释取口腔上皮细胞制片（洋葱内表皮）载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液（清水）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片

6、在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染，漱口避免取材失败固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min 观察先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳【讨论】分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色

7、,细胞质呈红色. 实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一）一实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的沉淀.2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。三实验材料1做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。2做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时

8、（也可用蓖麻种子）。3做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。五、方法步骤：（一）可溶性糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2. 取1支试管

9、，向试管内注入2mL组织样液。  3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无沉淀生成。4. 水浴加热2min左右。观察到溶液颜色：浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。（二）脂肪的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮

10、、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡34小时，新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏丹染液，染色1分钟。染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上12滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子

11、叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。（浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液34滴，摇匀，溶液变紫色。A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。  CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH )

12、 2沉淀，而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。附：淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察 实验三 用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一）一实验目的： 使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二实验原理：叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活

13、细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。三实验材料：    观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶、洋葱表皮细胞。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。四方法步骤：步 骤注 意 问 题分 析1制片。用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞  3高倍镜下观察叶绿体的

14、形态和分布  4制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取碎屑盖盖玻片 5观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。 【讨论】（1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？ 因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。 （2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？ 表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。 （3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25左右。 （4）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？

15、否，活细胞的细胞质都是流动的。 （5）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？ 视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。 （6）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。 实验四 观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一）一、实验目的：1学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2了解植物细胞发生渗透作用的原理。二实验原理：1质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水

16、时，原生质层就会与细胞壁分离。2质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。二、实验材料：紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。三、实验步骤：步 骤注 意 问 题分 析1制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴中）。盖上盖玻片。  盖盖玻片应让盖玻片的

17、一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。  防止装片产生气泡。2观察洋葱（或水绵）细胞可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁。  液泡含花青素，所以液泡呈紫色。 先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。3观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入03g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。    重复几次糖液浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液

18、浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁分离的复原。4观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。 发生质壁分离的装片，不能久置，要马上滴加清水，使其复原。重复几次。细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。 为了使细胞完全浸入清水中。【讨论】1如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖

19、溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细胞壁。3.若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么？ 细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长） 4.高倍镜使用前，装片如何移动？ 若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野 中看到的是倒像。 5.换高倍物镜后，怎样使物像清晰？视野明暗度会怎样变化？如何调亮

20、？换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰；视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。 6.放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系？ 放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。 7.怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度？ 配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液 分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片 用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。 实验五 观察细胞的有丝分裂（必修一）一实验目的：1制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片2观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细

21、胞周期不同时期的时间长短。3绘制植物细胞有丝分裂简图。二实验原理：1在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。三实验材料： 洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。四实验步骤：步 骤注 意 问 题分 析一、根尖的培养实验前34天，让洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根

22、长约5cm时可用。置于温暖处，常换水。因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。二、装片的制作（解离漂洗染色制片）1解离：上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖23mm，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，室温下解离35min。 解离时间要保证，细胞才能分散开来。 解离时间也不宜过长。 目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来。此时，细胞已被盐酸杀死。否则，根尖过于酥软，无法取出。2漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。漂洗要充分，可换水12次。 目的：洗去

23、药液,防止解离过度,并有利于染色.  3染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色35min。染色时间不宜过长，否则显微镜下一片紫色，无法观察。龙胆紫等为碱性染料，可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色4制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压载玻片，使细胞分散开来。要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片， 目的：使细胞分散，避免细胞重叠，便于观察。做得成功的装片，标本被压成云雾状。三、观察1低倍镜观察：把装片放

24、在低倍镜下，慢慢移动装片，找到分生区细胞。 2高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂期中期的细胞，再找出前期、后期、末期的细胞。 一定要找到分生区。  在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 分生区细胞特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正处于分裂期。【讨论】1.培养根尖时，为何要经常换水？ 增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。 2.培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？ 应选用旧洋葱，

25、因为新洋葱尚在休眠，不易生根。 3.为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为何？ 因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；因为此时细胞分裂活跃。 4.解离和压片的目的分别是什么？压片时为何要再加一块载玻片？ 解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。 5.若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？压片时用力过大。 6.解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？ 分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。 7.为何要漂洗？洗去盐酸便于染色；防止后面酸碱中和8.细胞中染色最深的结构是什么？ 染色最

26、深的结构是染色质或染色体。9. 为何要找分生区？分生区的特点是什么？能用高倍物镜找分生区吗？为什么？ 因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。 10.分生区细胞中，什么时期的细胞最多？为什么？ 间期；因为在细胞周期中，间期时间最长。 11.*所观察的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？ 不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。 12.观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？ 不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。 13.若观察时不能看到染色体，其原因是什么

27、？ 没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。 实验六 探究影响酶活性的因素（必修一）一实验目的：1探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。2培养实验设计能力。二方法步骤：提出问题作出假设设计实验（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）实施实验分析与结论表达与交流。 实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率一）实验原理：鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液

28、中过氧化氢酶分子数的25万倍。二）方法步骤：步骤注意问题解释取4支洁净试管，编号*，分别加入2mL H2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在900C左右的水浴中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照  向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况不可用同一支滴管 肝脏研磨液必须是新鲜的 肝脏在制成研磨液由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性 因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低 研磨可

29、破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积2-3min后，将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方，观察复燃情况放卫生香时，动作要快，不要插到气泡中现象：3号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛烈复燃，4号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭 实例2：温度对酶活性的影响一）实验目的：1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二）实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和

30、葡萄糖遇碘后不显色。注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C三）方法步骤： 操作注意问题解释取3支试管，编上号，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液  另取3支试管，编上号，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液  将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入热水（约600C）、沸水和冰块中，维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉

31、酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤序号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鲜淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保温5min600C1000C00C600C1000C00C3将a液加入到A试管，b液加入到B试管，c液加入到C试管中，摇匀 4保温5min600C1000C00C 5滴入碘液，摇匀2滴2滴2滴 6观察现象并记录     实例3：PH值对酶活性的影响

32、操作步骤：用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保温5min 7加入斐林试剂，边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min 9观察3支试管中溶液颜色变化变记录    【讨论】1.相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。 2.为何要选新鲜的肝脏？因为在不新鲜的肝脏

33、中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。 实验七 叶绿体色素的提取和分离（必修一）一实验目的：1尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色。二实验原理：1叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。三、实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶四、实验步骤：步 骤注 意 问 题分 析1提取色素5克绿叶剪碎

34、，放入研钵，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL无水乙醇）迅速、充分研磨。（若没有无水乙醇，也可用体积分数为95%的乙醇，但要加入适量的无水碳酸钠，除去水分）加SiO2加CaCO3  迅速加丙酮加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的丙酮挥发。2收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布，研磨倒入漏斗内挤压，将滤液收集到小试管中，用棉花塞塞住试管口。  尼龙布起过滤作用。 试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。3制备滤纸条将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长1

35、0cm，宽1cm的纸条，一端剪去二个角，并在距这一端1cm处划一铅笔线。 干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角 可吸收更多的滤液。层析时，色素分离效果好。可使层析液同时到达滤液细线。4划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线，干后重复三次。 滤液细线越细、越齐越好。重复三次。 防止色素带之间部分重叠。 增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明显。5纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（划线一端朝下）插入层析液中，用培养皿盖盖上烧杯。层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。防止色素溶解在层析液中，层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。6观察实验结果由上至下分别为：胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色） 胡黄ab  扩散最快是胡萝卜素，扩散最慢是叶绿素b，含量最多的是叶绿素a。四种色素之所以能被分离，是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。【讨论】1滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。2提取和分离叶绿体色素的关键是什么？答：提取叶绿体色素的关键是：叶片要新鲜、浓绿；研磨要迅速、充分；滤液收集后，要及时用棉塞将