地贫基因检测在临床诊断中的应用

1、地中海贫血基因检测的临床应用地中海贫血基因检测的临床应用 王飞雁王飞雁广东阳春苦难家庭广东阳春苦难家庭 四个孩子三个地贫四个孩子三个地贫地中海贫血地中海贫血地中海贫血，又称海洋性贫血。地贫是全球分布最广、累计人群最多的一种单基因遗传病， 全球约有3.5亿地贫基因携带者，我国常见以南各省为地贫高发区。地贫是导致出生缺陷高发，围产儿和婴儿死亡的主要原因之一。地中海贫血遗传模式地中海贫血遗传模式 地中海贫血地中海贫血 地中海贫血的共同特点是由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，致使血红蛋白的组成成分改变。 地中海贫血分为-地中海贫血和-地中海贫血。重型重型-地贫

2、地贫又称hb barts hb barts 水肿胎儿综合症水肿胎儿综合症 ，胎儿常于30-40周时流产、死胎或娩出后半小时内死亡。重型重型-地贫地贫胎儿出生时与正常胎儿无异，到3-6个月时就会逐渐出现严重贫血，如果不治疗，一般5岁左右死亡。中间型地贫中间型地贫患儿需经常输血，生存质量明显下降。目前地贫治疗上尚无有效根治尚无有效根治办法，患儿家庭背负着极大的精神压力和经济负担。地贫的危害性地贫的危害性广东为地贫的高发区广东为地贫的高发区 地区地区 广东广东 广西广西 四川四川 台湾台湾 香港香港携带率携带率(%)(%) 地贫地贫 8.53 14.95 1.92 4.20 5.02 2.54 6.

3、78 2.18 1.10 3.41 地贫地贫xu, et al. j clin pathol 2004, 57:517-22. cai, et al. chi j epidemiol 2002,23:281-5. 广东省人群中广东省人群中 地贫的携带者频率地贫的携带者频率 基因变异基因变异 地贫染色体地贫染色体 (- sea) 缺失缺失 (- 3.7) 缺失缺失 (- 4.2) 缺失缺失 (- cs) 突变突变 (-thai) 缺失缺失 (- qs) 突变突变 (-11.1) 缺失缺失等位基因数等位基因数4782321745310221频率频率(%)(%)8.534.143.100.950.1

4、80.040.040.02 基因变异基因变异 地贫染色体地贫染色体 cds 41-42 (-cttt) ivs-2-654 (ct) 28 (ag) cd 26 (ga) cd 17 (at) cds 71-72 (+a) cd 43 (gt) -29 (ag) cds 27-28 (+a) -gene deletion 未知突变未知突变等位基因数等位基因数198724933108774413频率频率(%)(%)2.540.920.630.420.130.100.090.090.050.050.010.04广东省人群中广东省人群中 地贫的携带者频率地贫的携带者频率 第一道防线第一道防线-婚前检

5、查、孕前检查、产前筛查婚前检查、孕前检查、产前筛查 了解自己是否为地贫基因携带者。新婚青年要主动到当地医疗保健机构进行婚前、孕前健康检查；孕妇在怀孕3个月前要进行首次产前检查。 第二道防线第二道防线-产前诊断产前诊断 诊断自己是否怀上地贫胎儿。婚前检查、孕前检查，以及产前筛查和诊断是婚前检查、孕前检查，以及产前筛查和诊断是 地贫防控的重要手段！地贫防控的重要手段！婚前检查、孕前检查，以及产前筛查和诊断婚前检查、孕前检查，以及产前筛查和诊断是地贫防控的重要手段！是地贫防控的重要手段！“对携带同型地贫基因夫妇每次怀孕的胎儿进行产前诊断，发现为重度地贫胎儿时及时干预，是目前国际上避免重度地贫患儿出生

6、的最好办法。” -广东省妇幼保健院产前诊断中心主任尹爱华 这一措施在地贫高发的地中海沿岸国家、东南亚的泰国、新加坡，我国香港、澳门、台湾地区和广西普遍采用，已取得良好效果。例如在中国香港地区已基本消灭了重度地贫患儿出生。 地贫筛查的方法主要有血常规测定、血红蛋白电泳等传地贫筛查的方法主要有血常规测定、血红蛋白电泳等传统方法统方法，这些方法虽操作简单，但不能对地贫进行确诊，属于初步筛查方法，轻型携带者易漏检，可能造成重型地贫儿的出生。 地贫基因检测地贫基因检测能明确地贫基因突变或缺失类型，并对地贫患者进行基因确诊，还可以检出轻型携带者，有助于减少和防止重型地贫儿的出生。常见地贫筛查及诊断方法比较

7、常见地贫筛查及诊断方法比较亚能生物地中海贫血基因检测亚能生物地中海贫血基因检测整体解决方案整体解决方案-地贫基因检测地贫基因检测 -地中海贫血地中海贫血l-地中海贫血（简称-地贫）是一种由于-珠蛋白基因突变导致肽链表达失衡而产生的单基因遗传血液病。l多由-珠蛋白基因的缺失突变所致。l中国地区常见的3种缺失型 -地贫主要由 -sea、-3.7、 -4.2缺失引起。-地贫基因缺失示意图地贫基因缺失示意图-3.7-4.2-sea 2 1211-地贫的基因型与表现型地贫的基因型与表现型normal (/) 正常正常 静止型静止型-单一单一基因缺失或丧失功能基因缺失或丧失功能 临床一般无症状，血液学检查

8、一般无异样-地贫的基因型与表现型地贫的基因型与表现型 o thal trait( /-sea)( - / - )血红蛋白血红蛋白h病病-3个个基因缺失或丧失功能基因缺失或丧失功能 肝脾肿大，中度贫血。小细胞，低色素，hbh含量较高，易发生溶血，有些病例需不定期输血，症重者甚至需切除脾脏。 标准型标准型-2个个基因缺失或丧失功能基因缺失或丧失功能 临床无症状，血液学检查出现轻微贫血，红细胞大小不均一，平均红细胞体积(mcv) 及平均血红蛋白含量(mch)明显偏低。hb h disease(- 3.7/-sea)(- 4.2/-sea)-地贫的基因型与表现型地贫的基因型与表现型hb barts h

9、ydrops(-sea/-sea)hb barts hb barts 水肿胎儿综合症水肿胎儿综合症 l4个基因缺失或丧失功能l胎儿常于30-40周时流产、死胎或娩出后半小时内死亡，肝脾肿大，腹水，胸水。l由于胎儿无法合成亚基，脐血血红蛋白（ hb barts ，4）含量高。非缺失型非缺失型-地贫地贫n 概念：概念： 基因发生点突变或少数几个碱基的缺失。n 中国常见的非缺失型突变：中国常见的非缺失型突变：hb cs 2 cd 142 taacaa (gln)hb qs 2 cd 125 ctgccg (leupro)hb ws 2 cd 122 caccag (hisglnn 特点特点： 常发生

10、于2基因，比缺失型导致更严重的珠蛋白链合成的减少。n根据-地贫基因缺失特点，利用多重gap-pcr技术可同管检测3种缺失型及正常共4种基因型。通过电泳条带大小来判断缺失情况。亚能生物亚能生物 -地中海贫血基因检测试剂盒地中海贫血基因检测试剂盒 -地中海贫血基因检测操作流程地中海贫血基因检测操作流程亚能生物亚能生物-地贫基因检测产品特点地贫基因检测产品特点同时检测3种-地贫缺失型： -3.7、-4.2和-sea，覆盖95%以上-地贫操作简便：pcr+电泳，专用makers，结果判读直观简便 -地贫基因检测临床意义地贫基因检测临床意义n 对-地贫患者进行基因确诊。n 可广泛用于-地贫的筛查，对-地

11、贫基因缺陷携带者进行鉴别，对于减少和防止重症地贫儿的出生及优生优育具有重要的临床意义。非缺失型非缺失型-地中海贫血基因突变检测试剂盒地中海贫血基因突变检测试剂盒n 同时检测 cs、 qs、 ws点突变wild typecsmwsmqsmn 临床意义：临床意义： 作为 -地中海贫血三种缺失型的补充，对怀疑 -地中海贫血有漏诊的患者进行 cs、 qs、 ws点突变的诊断，确定具体的基因突变类型 -地中海贫血基因检测地中海贫血基因检测 -地中海贫血地中海贫血-地中海贫血是一种由于-珠蛋白基因突变导致肽链合成减少或缺乏而产生的单基因遗传血液病，多由-珠蛋白基因点突变所致。 在中国人群中常见的突变位点有cd41-42m， -28m， ivs-ii-654m，cd71-72m等 -地贫常见突变位点及表型地贫常见突变位点及表型 -地贫基因型与表型的关系地贫基因型与表型的关系 -地贫表现型地贫表现型亚能生物亚能生物-地中海贫血基因检测试剂盒地中海贫血基因检测试剂盒利用基因芯片技术可以同时检测中国人群8个常见位点和9个少见位点共17个位点的19种 -地贫基因突变类型 -地中海贫血基因诊断操作流程地中海贫血基因诊断操作流程-地中海贫血基因诊断结果判读地中海贫血基因诊断结果判读41-42n654n28n71-72n17nen31n27/28m41-42m654m28m71-72m17mem3