细胞生物学实验一.显微镜的使用

1、一 油镜和测微尺的使用及细胞形态观察二 叶绿体分离及荧光镜检（密度梯度离心法）三 线粒体的分离及活性染色（差速离心法）四 细胞化学（feulgen反应）五 细胞融合六 小鼠染色体标本制作及观察七 植物细胞骨架的制作及观察八 自主实验一实验报告（70%）二平时表现（30%） 没想象中简单 努力思考、多动脑 会分析、会设计、会解决一、实验目的一、实验目的 掌握油镜和测微尺的使用方法，学掌握油镜和测微尺的使用方法，学会用显微尺观察和测量细胞，并按比例会用显微尺观察和测量细胞，并按比例绘制细胞大小示意图绘制细胞大小示意图。1. 器材：普通光学显微镜，台尺，目尺；器材：普通光学显微镜，台尺，目尺；2.

2、材料：兔脊神经节（示高尔基体），鼠材料：兔脊神经节（示高尔基体），鼠肝（示线粒体）等肝（示线粒体）等 ；3. 试剂：香柏油，二甲苯试剂：香柏油，二甲苯 。组成：组成：1. 光学系统：物镜、目镜和照明装置光学系统：物镜、目镜和照明装置2. 机械装置：镜座、镜臂、载物台、镜筒、物机械装置：镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等镜转换器和调焦装置等物镜镜头：物镜镜头： 40/0.70 (40物镜放大倍数；物镜放大倍数；0.70镜口率镜口率) 160/0.17 (160镜筒长度；镜筒长度；0.17盖玻片厚度盖玻片厚度) 先低后高 先近后远 先粗后细1. 先用低倍镜观察标本，把油镜下所要观先用

3、低倍镜观察标本，把油镜下所要观察的移至视野中心，再换高倍镜观察察的移至视野中心，再换高倍镜观察（用细调调节器调节）。（用细调调节器调节）。2. 旋离高倍镜，在标本上滴一滴香柏油，旋离高倍镜，在标本上滴一滴香柏油，换油镜镜头，继续调节细调即可观察。换油镜镜头，继续调节细调即可观察。3. 观察完毕后，旋离油镜镜头，下降载物观察完毕后，旋离油镜镜头，下降载物台，先用干擦镜纸擦台，先用干擦镜纸擦12次，把大部分次，把大部分的香柏油擦掉；再用二甲苯湿润的擦镜的香柏油擦掉；再用二甲苯湿润的擦镜纸擦纸擦23次；最后用干擦镜纸擦次；最后用干擦镜纸擦12次。次。同样方法擦清标本。同样方法擦清标本。注意擦镜头时要

4、顺注意擦镜头时要顺镜头直径方向擦，不要沿着镜头的圆周镜头直径方向擦，不要沿着镜头的圆周擦。擦。 测微尺由目尺和台尺组成。目尺是一块圆测微尺由目尺和台尺组成。目尺是一块圆形玻璃片，上面刻有等距离的刻度，分成形玻璃片，上面刻有等距离的刻度，分成50100格。实际刻度因不同物镜的放大倍格。实际刻度因不同物镜的放大倍数以及镜筒长度而不同，需要台尺校定。数以及镜筒长度而不同，需要台尺校定。台尺则是一块特制的载玻片，中央封着一台尺则是一块特制的载玻片，中央封着一把刻度标尺，其每个刻度为把刻度标尺，其每个刻度为0.01mm (10 m)。link每个大格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm总长

5、0.1mm总长1mm共分为10格1. 用台尺标定目尺（用台尺标定目尺（10倍或倍或40倍物镜）：倍物镜）：将目尺装入目镜，有刻度面朝下。再将目尺装入目镜，有刻度面朝下。再将台尺固定在载物台上，小心移动台将台尺固定在载物台上，小心移动台尺和转动目尺，使两尺最左边的直线尺和转动目尺，使两尺最左边的直线愈合，然后由左向右找出两尺另一重愈合，然后由左向右找出两尺另一重合的直线。记录两次重合线间目尺和合的直线。记录两次重合线间目尺和台尺的格数，按公式计算出目尺每格台尺的格数，按公式计算出目尺每格的长度（的长度（ m)： 台尺格数台尺格数 目尺格数目尺格数 取下台尺，换上标本观测。 10 m目尺每格长度(m)2. 观察各种切片标本，注意细胞的形态观察各种切片标本，注意细胞的形态结构、核的形态及数量。结构、核的形态及数量。3. 用目尺测量细胞及核的大小（横距、用目尺测量细胞及核的大小（横距、宽距及厚度），每一类被测物测宽距及厚度），每一类被测物测3个个数据，最后取平均值。数据，最后取平均值。4. 按按比例比例画出细胞大小的示意图画出细胞大小的示意图。 低倍镜的镜口率为什么不能过大？低倍镜的镜口率为什么不能过大？ 为什么光学显微镜的分辩率极限是为什么光学显微镜的分辩率极限是0.2