Bruker-仪器维护和参数校正

1、Bruker核磁仪参数校正实验设置仪器维护 第一部分：第一部分： 参数校正参数校正l通常一个实验中最后真正的采样只是采集一种原子核的信号，因此BRUKER 仪器中第一通道应设置为需要采样的原子核频率，该通道一般也称为采样通道或观察道(F1通道)，其余的通道有时也称为去偶通道（F2通道）l90脉冲的测定就是在一定的功率下，测试90脉宽对应的时间；或是在一定的脉宽长度下，测试90脉冲对应的功率。功率越大，对应的90脉冲时间越短900脉冲的测定实验一：实验一：H F1（观察通道）通道的（观察通道）通道的900脉冲脉冲(P1值值)测定测定l 标样0.1%Ethylbenzol-CDCl3 脉冲(zg3

2、0)，如下图所示具体操作如下：zg30 Pulse Sequence 第一步：第一步： 将0.1%Ethylbenzol-CDCl3标准品放入磁体中，输入edc命令，出现如下对话框，先采一个H谱第二步：锁场，匀场第二步：锁场，匀场l匀场完成后，输入wobb命令进行调谐第三步：调谐第三步：调谐l输入getprosol第四步：（第四步：（1）在）在Acqupars中设置参数（中设置参数（2）采样）采样第五步：第五步： 将2.75ppm左右的四重峰放大，红线放在四重峰的中间，然后按下列步骤进行即可将o1p设为2.75ppmlns设为1lds设为0 ld1设为3l 第六步：设置参数第六步：设置参数第七

3、步：第七步：运行Paropt命令，出现如下对话框， 按提示填好后，采样即可 Paropt 是一AU程序它可改变某一参数(P1,D1,O1等)并将一系列处理的谱图列出。谱图储存在处理数控的文件中。l此处给出的P1值为900时的值，由于Bruker仪器中H的采样脉冲为zg30,所以写入edprosol表中的数值应该为15.33（46/3）。如下图所示：第八步：实验结果第八步：实验结果表中1处必须为H，将上面测得的H的F1值写在2处，点save第九步：第九步：将实验结果写入探头将实验结果写入探头l标样40%ASTM-C6D6 具体操作如下： 1. 先采一个H谱读o2p的值，脉冲序列(zg30)如右图

4、： 2.一个C谱读o1p的值，脉冲序列为(zgpg30) 如下图：实验二：实验二：13C F1（观察通道）通道的（观察通道）通道的900脉冲脉冲(P1值值)测定测定zg30 Pulse Sequence zgpg30 Pulse Sequence zgpg Pulse Sequence F1F23.以脉冲序列zgpg采H谱，测定P1值，脉冲序列如下图：第一步：第一步： 将40%ASTM-C6D6标样放入磁体中，先采一个氢谱读o2p的值，具体操作如下：edc lock C6D6shimwobbgetprosolg读o2p的值第二步：第二步：采一个C谱读o1p的值，具体操作如下： edc 后出现如

5、下对话框lockshimwobbgetprosolg第三步：第三步：在AcquPars中完成以下操作o1p=66.81o2p=3.46ds=0ns=1d1=40运行paropt（对某一实验参数做渐进式的调整）命令p1,ok1,ok1,ok16,okgl 由于我们设置的P1起始值为1，步长为1，所以我们可以知道在1800脉冲时的时间为16.34，所以900脉冲的为8.17 ,将8.25填入edprosol表中，如下图所示：第四步：实验结果第四步：实验结果表中1处必须为13C，将上面测得的13C的F1值写在2处，点save第五步：将实验结果写入探头第五步：将实验结果写入探头去偶通道去偶通道900脉

6、冲的测定脉冲的测定 在去偶通道中激发的原子核磁化矢量随脉冲作用时间的变化是无法直接观察到的，只能通过偶合作用反应到采样通道中的原子核磁化矢量的变化上。例如确定1H 在去偶通道的90脉宽，需要通过观察采样通道中与之有偶合的13C 磁化矢量信号随去偶通道1H的脉冲作用时间的变化。 实验三：实验三：H F2（去偶通道）通道的（去偶通道）通道的900脉冲脉冲(P3值值)测定测定DEPT90 Pulse Sequencel当P3值准确时谱图中只显示CH的C信号，CH3和CH2的C信号将消失lP1 是采样通道原子核的90脉冲，P3 是所要确定的去偶通道原子核的90脉冲，d2 是一段时间延迟，长度为1/2J

7、，J 是两个通道的原子核之间的偶合常数值，在90脉冲测定时，J 值必须是已知的。l标样0.1%Ethylbenzol-CDCl3，脉冲(dept90）如下图所示：l将0.1%Ethylbenzol-CDCl3标准品放入磁体中，输入edc命令，出现如下对话框l在AcquPars中完成以下操作 o1p设为100 o2p设为45 d1设为2l输入p3出现对话框，改变图中p3的值，可得到不同的C谱lP3值太小出现如下C谱P3值太大出现如下C谱P3值合适时会出现如下C谱l将合适的p3值输入到edprosol表中H F2通道中，如下图所示：表中1处必须为H，将上面测得的H的F2值写在2处，点save13C

8、 F2通道（去偶通道）的通道（去偶通道）的900脉冲（脉冲（P3值）测定值）测定l标样1%CDCl3-Acetone 具体操作如下： 1.先采一个H谱读o1p和cnst2的值，脉冲序列（zg30）如右图： 2.一个C谱读o2p的值，脉冲序列为（zgpg30）如下图： zgpg30 Pulse Sequence zg30 Pulse Sequence 3.以脉冲序列decp90采H谱，测定P3值，脉冲序列如下图： DECP90 Pulse Sequence 上图所示的脉冲序列是通过观察采样通道的13C信号强度的变化测定去偶通道1H的900脉宽，这里我们想确定去偶通道13C的900脉宽，只需输入e

9、dasp命令将两个通道设置的原子核互换即可。l将1%CDCl3-Acetone标样放入磁体中，先采一个H谱读o1p和cnst2的值，具体操作如下： edc 后出现如下对话框lnsldslrglgetprosollgl再采一个C谱读o2p的值，具体操作如下：llocklwobblshimminglns=8lds=4lrg=128lgetprosollgl 以脉冲序列decp90采H谱，测定P3值l运行edasp命令，出现如下对话框，将F2通道换为13C，然后点击default，savel注意：这里的F1和F2通道和脉冲序列里的不同。此处的F1和F2通道对应仪器中的F1和F2通道，而脉冲序列中所有

10、的观察通道叫做F1通道，另一个通道叫做F2通道lgetprosollns=1lo1p=8lo2p=78lds=0ld1=5lCNST2=215lp3=1l将上图调整相位，具体方法如下：l1.将调整相位时的红线放在C的卫星峰，使C的卫星峰一正一负2.在Procpars中设置参数 Baseline correctionlefp,出现如下谱图l将上图中红线区域放大并运行如下命令lDpllParopt(对某一实验参数做渐进式的调整)lp3,okl1,okl1,okl16,ok 当P3 脉冲为90时，采样通道中全部是不可检测的多量子相干信号，而大于或小于90时，都含有可检测到的单量子相干信号，只是峰的相

11、位正好相反。因此通过采样通道峰的变化可以间接确定去偶通道的90脉宽。l由于我们设置的起始值为1，步长为1，所以我们可以知道在1800脉冲时的时间为16.5，所以900脉冲即P3的值为8.25。将8.25填入edprosol表中，如下图所示：表中1处必须为13C，将上面测得的13C的F2值写在2处，点saveEdlock表中Field的校准原理 超导磁体的磁场会随时间而逐渐减小.为了保持特征频率(如: 400.13MHz)下氢正共振所需磁场不变,而需改变室温匀场线圈中的电流,以补偿磁场的变化.室温线圈中的补偿电流由Filed值表示. Filed值为正值时，室温线圈补偿磁场的方向与超导线圈的磁场方

12、向相反 Filed值为负值时，室温线圈补偿磁场的方向与超导线圈的磁场方向相同校准步骤 Bruker仪器的基础场是以CDCL3为溶剂的标样匀出的，所以校准Field值时需用CDCL3 为溶剂的标样 具体操作如下l将以CDCL3 为溶剂的标样放入磁体中l选取CDCL3 , Lock命令锁场(目的将lockshift)设为对应值l按lock键,取消锁场l调整field使信号处于中间位置l键入Edlock命令点击下图中的1图标,系统读入此时的Field的值,并更改表顶部的Field值l选择SAVE键保存甲醇锁偏场问题的处理l将以CDCL3 为溶剂的标样放入磁体中l选取CDCL3 , Lock命令锁场(

13、目的将lockshift)设为对应值l按lock键,取消锁场l调整field使信号处于中间位置l键入Edlock命令点击下图中的1图标,系统读入此时的Field的值,并更改表顶部的Field值l选择SAVE键保存l将以MeOD 为溶剂的样品放入磁体中l选取MeOD, Lock命令锁场(目的将lockshift)设为对应值l按lock键,取消锁场l调整field使信号处于中间位置l按lock键, 锁场l输入loopadj命令(需在lock锁定的状态下) ，将反馈lockfilt, lockgain, locktime的数值并数值填入到edlock表中相应的位置l将CDCL3和MeOD的field

14、差值填入edlock表中field-correction列中lsavel在ICON-NMR中选择noauto 点保存即可。水峰压制(Water Suppression)l 核磁共振实验样品有许多是溶在水中,而水的共振信号又是实际样品的数千甚至数万倍.ADC的资源基本上被用来描述水峰而很少一部分用来描述实际的样品以致样品的信号被淹没在噪音.l存在的问题: - 动态范围; - 实际样品的信号低S/N; -实际样品的信号淹没在基线噪音中; - 接近水峰的信号”骑”在水峰上.l解决方法 在采样前压制水峰. 一经常用到的方法是预饱和x 64预饱和(Presaturation) 使用一长约定1-2s而低的

15、脉冲选择的使水峰达饱和状态,然后用一硬900脉冲激发样品.其结果是使接受器的增益参数增加而提高动态范围及S/N. 运用的脉冲序列为zgpr,如下图所示： zgpr Pulse Sequence 压水峰实验具体操作如下：1.脉冲序列 zgpr2. 预饱和时间为 1.5s3. O1移到水峰位置4. 逐渐的增加脉冲强度5. 优化匀场条件,并准确调整O1位置5.14.64.13.6ppmzgrg=1zgprrg=64Water suppression can be achieved for instance by applying a long, low power pulse to the wate

16、r resonance, followed by a hard 90 degree pulse to excite the spins of interest. This so-called presaturation pulse typically lasts 1-2s and it has the effect that it saturates the water resonance, which means that by the time we apply an RF pulse to observe the spectrum, there is no net water magne

17、tization left. (Remember that a long pulse has a narrow frequency response). As a result the receiver gain can be properly set for the low intensity resonances, resulting in a better signal to noise and a better dynamic range.一般水峰压制步骤如下: lO1p定为水峰的位置l在pulprog中将脉冲程序改为zgprlGetprosolld1=3lPL9=5060dblg 讨

18、论： 1.PL9 可改变，如果溶剂峰很大可放大，溶剂峰小或不想完全压为0， 可放小。 2.PL9不宜太大，太大会导致压制的范围很宽。水峰或溶剂峰很大时可用下列方法压制l在 pulprog 中选取noesygppr1d脉冲程序lGetprosollD8=0.1lGPZ1=50%，GPZ2=-10%l将o1p设为要压制的水峰或溶剂峰的位移值多峰压制1.先采一个H谱2.rpar LC*出现如下界面lL30=n(n为要压制的峰的个数，顺序为由大到小)lF1p=15,f2p=-1 （F1p,f2p为要压制的谱图的范围）lCNST29=1lgetprosollnsl运行xaua命令压制前后对比比较单峰压制

19、和双峰压制 如何在Solvent表中增加新的溶剂 以DCl(30%DCl+D2O)为例l将已知的DCl的位移值写入Edlock表中Distance列，其它列值可参照CDCl3的值填写Edlock 表中DCl的lockfilt, lockgain, locktime的编辑l将以DCl 为溶剂的样品放入磁体中l选取DCl, Lock命令锁场(目的将lockshift)设为对应值l按lock键,取消锁场l调整field使信号处于中间位置l按lock键, 锁场l输入loopadj命令,将反馈的lockfilt, lockgain, locktime数值填入到edlock表中相应的位置lsave 重新起

20、动Topspin软件第二部分第二部分 : 实验设置实验设置 一.二维实验2D NMR 谱图常以轮廓图表示而不用三维的方式.相同情况同样使用在地图上1020304050602040600.511.52102030405060102030405060l绝对值与相敏(phase sensitive)的COSY 绝对值COSY的峰都为正峰，相敏COSY的峰有正负（可调相位）。相敏COSY中的峰比绝对值COSY的峰更尖锐（可减小谱峰的重叠程度，但需要增加累加的数据点）。l多量子滤波(MQF)COSY 双量子滤波DQFCOSY：滤掉（减小）单量子峰（对角线峰和没有 偶合的溶剂峰）。 叁量子滤波TQFCOS

21、Y：滤掉（减小）单量子和双量子峰 1H1H COSY的种类 二者是可以互相结合的，如：二者是可以互相结合的，如：DQFCOSY可以是绝对值可以是绝对值的也可以是相敏的的也可以是相敏的COSYRFp/2FIDp/2t1NONHSOOR3b2b1b1a5b4a4bppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3b5b2b1b1a3b4a4b2D COSY experiment(magnitude mode)ppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3b5b2b1b1a3b4a4bNONHSOOR3b2b1b1a5b4a4b2D

22、 COSY experiment(magnitude mode) 与H-HCOSY900 相比，选用H-HCOSY450 减少平行跃迁间的磁化转移强度，限制了多重峰内的间接跃迁，对角线则因自身的自相关峰消失而被简化， H-HCOSY450 谱中的对角线峰沿对角线变窄，减小了对邻近的交叉峰的干扰ppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3b5b2b1b1a3b4a4bNONHSOOR3b2b1b1a5b4a4b2D long-range COSY(magnitude mode)ppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3

23、b5b2b1b1a3b4a4bNONHSOOR3b2b1b1a5b4a4b2D COSY-DQF experiment(phase-sensitive)NONHSOOR3b2b1b1a5b4a4bppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3b5b2b1b1a3b4a4b2D COSY experiment(phase-sensitive) DQF-COSY与相敏COSY的图形基本相同，但DQF-COSY有以下的优点： 1.在二维谱中抑制了包括化合物所固有的强峰（如叔丁基，甲氧基等）和溶剂峰 2.在相敏COSY中，交叉峰为吸收性，对角线峰为色散型，对角线旁的

24、交叉峰易受干扰； DQF-COSY中，对角线峰与交叉峰峰均为吸收型，对角线的峰型有很大的改善1H1H TOCSYl两个（组）氢原子只要是在一个自旋体系中，无论是有直接偶合或是间接偶合，它们之间都会有相关峰出现。l自旋体系是由多个原子核组成的体系，体系中任一原子核至少与本体系中另一原子核有J偶合，而体系中所有原子核都不与体系外的原子核有J偶合l一个自旋体系中，原子核之间有一个自旋体系中，原子核之间有J偶合存在，称为直接偶偶合存在，称为直接偶合，没有合，没有J偶合的，称为间接偶合偶合的，称为间接偶合lTOCSY是运用自旋锁定的方法，将同一自旋系统中的所有氢均关联，可以逐步增加自旋锁定时间，使自旋系

25、统中的各个1H依次相关，达到推定结构的目的。有些象接力COSY谱。 ppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc10EXPNO 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001102Time 4.14INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2345700

26、 secRG 16DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.01000000 secD11 0.03000000 secD16 0.00010000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 0IN0 0.00045765 secl1 0l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00

27、usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmFnMODE undefined

28、F2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 3LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-antiechoSF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 3LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HH混合时间50msppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc50EXPNO 1PROCNO 1

29、F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001101Time 16.43INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2343412 secRG 18DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.05000000 secD11 0.03000000 secD16 0.00010

30、000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 4IN0 0.00045765 secl1 24l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00

31、%GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-antiechoSF 50

32、0.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HHt1MLEV17AQPulse sequence for a TOCSY spectrum.HOCH1HCCCH2HH3HH4HHHOCH1HCCCH2HH3HH4HHHOCH1HCCCH2HH3HH4HH混合时间10msppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc10EXPNO 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 200

33、01102Time 4.14INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2345700 secRG 16DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.01000000 secD11 0.03000000 secD16 0.00010000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.0

34、0110800 secFACTOR1 0IN0 0.00045765 secl1 0l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1

35、 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmFnMODE undefinedF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 3LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-antiechoSF 500.1300144 MHzWDW SINESS

36、B 3LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HHppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME butcosyEXPNO 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001102Time 8.04INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG cosygpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 1DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2345700

37、secRG 40.3DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 288.0 KD0 0.00000300 secD1 1.60000002 secD13 0.00000300 secD16 0.00010000 secIN0 0.00045765 sec= CHANNEL f1 =NUC1 1HP0 3.00 usecP1 6.00 usecPL1 -4.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2

38、0.00 %GPZ1 10.00 %GPZ2 10.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmFnMODE undefinedF2 - Processing parametersSI 2048SF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 0LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 QFSF 500.1300144 MHzWDW QSINES

39、SB 0LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HH混合时间20msppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc20EXPNO 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001102Time 5.28INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzA

40、Q 0.2345700 secRG 16DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.02000000 secD11 0.03000000 secD16 0.00010000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 1IN0 0.00045765 secl1 6l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 us

41、ecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmFnMOD

42、E undefinedF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 2LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-antiechoSF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 2LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HHppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc20EXPNO 1PROCN

43、O 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001102Time 5.28INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2345700 secRG 16DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.02000000 secD11 0.03000000 secD16 0.000

44、10000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 1IN0 0.00045765 secl1 6l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00

45、 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmFnMODE undefinedF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 2LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 ec

46、ho-antiechoSF 500.1300144 MHzWDW SINESSB 2LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HH混合时间50msppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc50EXPNO 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001101Time 16.43INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8

47、DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2343412 secRG 18DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.05000000 secD11 0.03000000 secD16 0.00010000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 4IN0 0.00045765 secl1 24l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 u

48、secP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.131

49、1 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-antiechoSF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0ppm1.01.52.02.53.03.5ppm1.01.52.02.53.03.5Current Data ParametersNAME buttoc50EXPNO

50、 1PROCNO 1F2 - Acquisition ParametersDate_ 20001101Time 16.43INSTRUM DRX500PROBHD 5 mm TBI 1H/PULPROG mlevetgpTD 1024SOLVENT CDCl3NS 8DS 16SWH 2185.315 HzFIDRES 2.134096 HzAQ 0.2343412 secRG 18DW 228.800 usecDE 6.00 usecTE 300.0 KD0 0.00000300 secD1 1.79999995 secD9 0.05000000 secD11 0.03000000 secD

51、16 0.00010000 secDELTA 0.00109943 secDELTA1 0.00110800 secFACTOR1 4IN0 0.00045765 secl1 24l3 128SCALEF 6= CHANNEL f1 =NUC1 1HP1 5.60 usecP2 11.20 usecP5 19.33 usecP6 29.00 usecP7 58.00 usecP17 2500.00 usecPL1 -4.00 dBPL10 10.00 dBSFO1 500.1310815 MHz= GRADIENT CHANNEL =GPNAM1 sine.100GPNAM2 sine.100

52、GPX1 0.00 %GPX2 0.00 %GPY1 0.00 %GPY2 0.00 %GPZ1 30.00 %GPZ2 30.00 %P16 1000.00 usecF1 - Acquisition parametersND0 1TD 256SFO1 500.1311 MHzFIDRES 8.535453 HzSW 4.369 ppmF2 - Processing parametersSI 1024SF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0PC 0.20F1 - Processing parametersSI 1024MC2 echo-ant

53、iechoSF 500.1300144 MHzWDW QSINESSB 4LB 0.00 HzGB 0HOCH1HCCCH2HH3HH4HHABX abyAaB, bX?y?COSYAaB, byXTOCSYABX abyAaB, bX?y?COSYAaB, byXTOCSYy?lCOSY和和TOCSY谱比较谱比较 （1）COSY交叉峰中主动偶合的磁化矢量是反相组分，小J偶合信息可能被抵 消，而TOCSY实验的主动偶合是同相组分，提高了小J偶合的检测灵敏度。 （2）TOCSY谱的特征是提供COSY和同核接力相干转移信息，接力转移信息，接力转移步数由自旋锁定混合脉冲长度控制，因此，可以不同的m参

54、数得到不同偶合相关信息，在2D谱线横截面等高图上可以观察到一个完整的自旋体系，简化谱线归属。NOESY Noesy的交叉峰表示原子相互在空间上相邻.其强度可用来估算原子间距并以此推断分子的空间结构.HaHbHc012345543210fafblNOE实验对环境变化非常敏感，为了得到高质量的谱图，有如下建议l1）高质量的样品高质量的样品。样品的分子量最好小于800或者大于2000。不然NOE信号会很小。在这种条件下，最好做ROE实验。l2）样品稳定性好样品稳定性好。l3）高质量的核磁管高质量的核磁管l4）最好预先超声或者通氩气除氧最好预先超声或者通氩气除氧l5）NOE实验过程中最好做到恒温实验过

55、程中最好做到恒温。NONHSOOR3b2b1b1a5b4a4bppm12345678910ppm123456789105b2b4a4b1b1a3b5b2b1b1a3b4a4b2D NOESY experiment(phase-sensitive)NONHSOOR3b2b1b1a5b4a4bppm123456789101112ppm1234567891011125b2b4a4b1b1a3b5b2b1a1b3b4a4bge-2D NOESY experiment(phase sensitive) NOESY和ROESY的区别： ROESY是旋转坐标系的NOESY谱，都提供通过空间作用的核自旋相关信

56、息，但两者有区别：（1）NOESY和ROESY的交叉峰都取决于相关自旋间存在交叉驰豫，但NOE是纵向交叉驰豫（Longitudinal cross relaxation）nn 而ROE是横向交叉驰豫（trasbverse cross relaxation）。（2）检测灵敏度的差异。NOE和ROE交叉峰强度与对角线峰强比值与相关时间m有关。NOESY交叉峰在分子量大和小两个极端，灵敏度很大。而ROESY交叉峰在不同分子量的分子中变化不大。（3）NOESY相关峰为反相组分，而ROESY相关峰为同相组分，可以检测小的相互作用。ppm1211109876543210ppm121110987654321

57、0NHNHNSOORge-2D NOESY experiment(phase sensitive)ppm1211109876543210ppm1211109876543210NHNHNSOOR2D ROESY experiment(phase sensitive)异核相关谱可通过观测碳异核相关谱可通过观测碳(1H-13C Hetcor) 或观测氢 (HMQC, HSQC). 观测氢的实验也称做反相实验.FID1Hp/2p13Cp/2p/2DDt11H 13C HSQC 碳氢直接相关实验碳氢直接相关实验 1H-13C HSQC 实验是异核二维谱，没有对角线峰。每个相关峰表示相交的氢、碳峰所对应的

58、氢、碳原子是直接（一键）相连的。 HSQC实验可以使氢谱和碳谱中的谱峰指认信息相互利用、相互印证。 当CH2上两个氢的化学位移不等时，HSQC谱上，一个碳峰就会与两个氢峰有相关峰。ppm876543210ppm1801601401201008060402002D 1H-13C HSQC using presaturation(phase sensitive)Pl9=55-60dbD1=1.5-2sge-2D 1H-13C HSQC with a z-filter (phase sensitive)ppm876543210ppm140120100806040200ppm876543210ppm1

59、40120100806040200ge-2D 1H-13C HSQC using echo-antiecho(phase sensitive)ppm876543210ppm140120100806040200ge-2D 1H-13C HSQC with improved sensitivity(phase sensitive)ppm876543210ppm140120100806040200ge-2D 1H-13C edited-HSQC with a z-filter(phase sensitive)ppm876543210ppm140120100806040200ge-2D 1H-13C

60、multiplicity-edited HSQC using echo-antiecho(phase sensitive)1H-13C HMBC氢碳远程相关实验氢碳远程相关实验l HMBC是异核二维谱，没有对角线峰。每个相关峰表示相交的氢、碳峰所对应的氢碳原子是以两键、叁键或四键相连的。l HMBC 谱上是否出峰与氢、碳原子相隔几键没有直接关系，只与实验参数设置中所设的J值有直接关系。氢碳两键、三键或四键的J值范围有很大部份是重叠的。l 由于脉冲序列的关系，HMBC谱中有时也会出现一键偶合的峰，是以一对相隔一百多Hz的小峰出现在对应氢峰的化学位移两边。ppm123456789ppm-20220