α-L-岩藻糖苷酶检测的几点临床价值

1、a- l-岩藻糖昔酶检测的几点临床价值a- l-岩藻糖昔酶检测的几点临床价值乔博明（北京人学人民医院检验科100044）1引言u -l-岩藻糖苗酶（a -l-fucosidase, afu）是一种溶酶体酸性水解酶，早期测定本酶主 要用丁遗传性afu缺乏症的诊断，并借以与其他遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980年 deugnier发现原发性肝癌（phc）患者的afu升高，并被后来研究证实，故有人提出afu可 作为phc的肿瘤标志物，从此对afu临床惠义有了更多更深的研究。近年来研究发现， afu对某些疾病的发生、发展均具有垂要意义，特别在肝炎、妊娠等多种临床病理、生理 中得到应用。2生物学特性af

2、u系统命名为a-l岩藻糖甘岩藻糖水解酶（ec3.2. 1.51）其生理功能是参与含岩藻 糖基的各种糖脂、糖蛋白、粘多糖等人分子物质的分解代谢。afu广泛存在于人体各组织 细胞溶酶体和体液小，胎盘、胎儿组织、脑、肺、肝、胰、肾以及血清、尿液、唾液和泪 液中均含有afu。afu的化学本质是一种糖蛋白，血清中的afu分了量为270390 kdo用 神经氨酸昔酶处理血清afu,可使其分子量降至37 kd±4 kd,在ph值3. 85. 9酶活性 基本消失，而在ph6. 27.0酶活性增强。afu分子具冇多态性，这可能由决泄这些酶单位 形成的结构基因位点的突变引起。afu的糖蛋白性质和分子中含

3、唾液酸说明它确实存在核 蛋门合成后的修饰，从而使血清中的afu独具特性1 o3血清a-l-岩藻糖昔酶对于原发性肝癌的诊断原发性肝癌（phc）是一种常见的恶性肿瘤，血清甲胎蛋白（afp）曾被认为是phc的特 升性好、阳性率高的标志物，但有30%左右的phc患者血清afp阴性。凶此，寻找afp以 外的肝癌标志物显得尤为重耍。近年來，血清a-l-岩藻糖芹酶（afu）被认为是肝癌的一 个新的标志物。肝癌时afu升高机制：afu是一种溶酶体酶，广泛分布于各种组织细胞体液中，参与糖 蛋门等多种生物活性物质的分解代谢。肝脏是富含溶酶体的器官，当肝肌细胞癌变时， afu合成增加并大量释放入血，其机制可能为：血

4、淸afu激活物存在影响酶活性。冇文 献报道，piic及正常人血清都能使标准的afu活性升高，正常人血清afu激活物与afu活 性呈正相关。而在phc时，血清afu激活物含量增加且和afu关系发生紊乱，捉示afu激 活物含量增加对phc血淸afu活性升高起重要作用；afu底物浓度升高而使afu代偿性 升高。phc时血清pbf （蛋白结合岩藻糖）和岩藻糖基化afu浓度增加，人体内与蛋白结 合的岩藻糖为l-岩藻糖，含岩藻糖的糖蛋白是afu生理底物之一。有研究表明，phc患者 血清pbf含量增加。癌外肝细胞介成afu增加，肝癌细胞可分泌某种刺激因了作川于正 常肝细胞，促使酶蛋白合成增加，引起血清afu

5、活性增加。其他消化道肿瘤即使发生肝转 移，血清afu也无明显增加示这种刺激具有肝癌特异性2。临床资料3, 4, 5表明，phc患者血清afu活性不仅显著高于正常对照，而且也显著 高于转移性肝癌、胆管细胞癌、恶性间皮瘤、恶性血管内皮细胞瘤、肝硬化、先天性肝囊肿和具它良性肝占位性病变。对piic诊断的阳性率为6484%,特异性达90%左右。张世 民5等报道肝癌患者小afu、n-乙酰氨基-b-d衙萄糖昔酶、n-乙酰氨基-b-d半乳糖昔 酶和a -甘露糖昔酶活性均显著高于正常对照，阳性率依次为67. 8%, 37. 3%, 32.2%和 18. 6%,其中afu的阳性率最高。这四种糖昔酶的活性密切相关

6、，而与afp水平不相关。 某些良性肝病和肝外疾患时也可出现一种糖卄酶活性升高，但同时出现儿种糖卄酶活性升 高主要见于肝癌。因此，afu对phc的诊断和鉴别诊断具有重要意义，尤其是afp阴性者 价值更人。综上所述，对于原发性肝癌,afu是一个有意义的肿瘤标志物，应用于临床将能较大地 捉高phc的诊断率。4血清afu联合碱性磷酸酶(alp)检测在妊娠监测屮的价值«-l-岩滋糖昔酶(afu)作为原发性肝癌(phc)的特界性及诊断性血清标志物3 也愈 来愈多的被临丿末所接受和应用。血淸碱性磷酸酶(alp)在临床上主要用于骨骼、肝胆系统 疾病的诊断和鉴别诊断。在临床工作中又发现在孕妇的妊娠晩期

7、，血清afu> alp含量均有 所增高。王玉洁6通过对妊娠晩期孕妇血清屮岩藻糖甘酶(afu)、碱性磷酸(alp)的 含量测定，以探讨其含量变化在妊娠晚期中的意义。其实验组孕3240周妊娠晚期妇女血 清afu、alp含量较对照组明显升高，差界有显箸性变化(p<0.01)o其中观察实验组孕 3236周110例、孕3640周80例血清afu、alp含量水平，发现两组之间血清 afu、alp含量差界无显著性变化，但随孕周的增加，两种酶的含量有逐渐增高的趋势。此实验还观察了人工终止妊娠或口然分娩1周后的产妇40例，其血清afu、alp含量 均在e常参考值范围z内。因此，血清afu、alp含量

8、对以作为妊娠晩期胎儿、胎盘动态 监测的一项指标。这也与报道胎儿、胎盘组织可影响妊娠时血清afu监测指标，使妊娠期 血清afu升高7 相符。血清alp含量增高的原因可能是:妊娠晚期来自胎盘的alp同 工酶alp4升髙有关。血清八fu含量增高的原因町能是：妊娠晚期由于孕妇体内激素发生 变化，使含岩藻糖的糖蛋白和糖脂代谢紊乱；孕期时组织糖芹酶的释放增加；胎盘组织的 影响；由于妊娠晚期孕妇的肝脏负荷增加而使肝细胞对afu的处理能力下降8。由此可见，血淸afu、alp活性检测，可以作为孕妇在妊娠晚期胎盘、胎儿动态观察的指 标。5尿afu检测对肾小管损伤的临床价值a-l岩藻糖甘岩藻糖水解酶广泛存在于人体各

9、组织细胞溶酶体和体液中。以肝、肾等 组织中afu含量最高，尤以近端肾小管上皮细胞溶酶体最为明显。尿中afu活性测定主要 用丁-近端肾小管上皮细胞的缺血、缺氧性病变而引起溶酶体酶破坏释放到尿液中，此方面 报道较少。常连刚9对118例肾脏疾病患者尿中afu活性进行测定。结果表明：慢性肾 小球肾炎、肾病综合征、慢性肾衰和尿毒症组等各类肾脏疾病患者尿液afu均高于正常人 群组，差异具有极显著性。增高的原因可能与细胞免疫、体液免疫、蛋白、脂质代谢异常 有关。由于各类肾脏疾病的病因和发病机理不同，afu升高机制也不相同，故各肾脏病组 间的尿液afu活性有极人差杲。有关机理的探讨，尚需积累更多的资料加以阐明

10、。afu在118例病人中随p 2-mg和nag的变化而改变，具有高度相关性，并且其阳性率高于p 2- mg和nag,具有显著性。所以，尿afu测定与其它指标相比更能早期敏感特异地反映肾脏 疾病时发生的近端肾小管损害。糖尿病、高血压极易诱发肾病，形成糖尿病肾病和高血压 肾病，检测尿afu活性，对于是否合并肾微小血管病变冇其重耍价值，做到早发现、早治 疗，延缓疾病的发展。因此，对于肾损伤患者，afu活性的检测不失为早期诊断肾损伤的 项有价值的辅助指标。总z,在肾脏疾病中，尿液afu活性均有不同程度的增高，增高 的原因可能与细胞免疫、体液免疫、蛋门脂质代谢紊乱有关。说明afu与肾脏病的发生发 展有密

11、切关系，在一定程度上表明，检测尿液afu对作为反映肾脏病肾小管损伤的-个参 考指标。6检测方法血清afu测定方法：荧光法：利用afu水解4-甲基伞型酮a-l-岩藻毗喃糖昔，释放 4-甲基伞型酮，用碱性缓冲液终止反应，并使产物呈现荧光，用360 nm或365側激发波 长和400 nm或448血发射波长检测荧光强度，对照不同浓度4-甲基伞型酮制备的标准曲 线求酶活性。此法敏感性高，最小检出限为0.06 u/lo比色法：以4-硝基苯a-l-岩 藻毗喃糖弁为底物经afu水解釋放4-硝基苯酚，同样用碱性缓冲液终止反应，使4-np呈 显著黄色，在规定波长下读取吸光度a。用纯4-np作标准，利用标准曲线或4

12、-np摩尔吸 光度计算出afu活性。木法简便，设备要求不高，国内外广泛采用10 o7结语原发性肝癌(phc)是常见恶性肿瘤，多年來甲胎蛋白(afp)作为phc诊断指标，虽有较高 特异性和诊断价值，但仍有2030%phc患者甲胎蛋门阴性造成漏诊。近年來国内外报道 phc患者a-l-岩藻糖甘酶活性显著升高具有较高敏感性和特异性，提出a-l-岩藻糖甘酶 对作为诊断afu的标记物，它和甲胎蛋口联合检测提高肝癌诊断率。而其作为妊娠状况 的监测，也起到了重耍的作用。最新研究发现，afu测立在肾病、糖尿病、白血病等疾病 中同样具有相当积极的作用11,值得我们不断地探索，和挖掘其在诸多疾病当中的临 床价值。参

13、考文献1张秀明，李健斋，等.现代临床生化检验学m.北京:人民军医出版社,2003. 607-608.2张华，叶震璇,刘广宣.血清a-l-岩藻糖甘酶在原发性肝癌当中的诊断价值jllll东 医药,2000, 22(40):50.3于志伟，杨晓卫,段芳龄，等血清a-l-岩藻糖昔酶的测定方法j.中华医学检验朵 志,1992, 15(3): 139.4王毓三，柯金陵，马莹，等.血清a-l-岩藻糖昔酶的测定方法及初步临床应用j.屮 华医学检验杂志，198& 11(3): 129-132.5张世民，吴孟超，陈汉，等.糖背酶谱在肝细胞癌诊断中的价值j.中华肿瘤杂 志,1992, 14(2):143.6王玉洁.妊娠晚期孕妇血清碱性磷酸酶岩藻糖廿酶含量变化及意义j.实用页技杂 志,2007, 14(3): 306-307.7 lombardo a, goi g, pistolesi e, et al. behaviour of several enzymes of1ysosmal origin in human plasma during pregnaneyj. clin chim acta, 1984, 143(3):253-256.8 徐永中，钱小蔷.血清afu在