果蝇唾液腺染色体制片

1、遗 传 学省 级 精 品 课 程湖州师范学院湖州师范学院 生命科学学院生物系生命科学学院生物系遗 传 学省 级 精 品 课 程一、实验目的一、实验目的 了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征；了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征； 学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术 ； 掌握唾液腺染色体制片方法。掌握唾液腺染色体制片方法。遗 传 学省 级 精 品 课 程 图图1 1 果蝇的生活史果蝇的生活史1.1.卵卵 2.2.一龄幼虫一龄幼虫 3.3. 二龄幼虫二龄幼虫 4.4.三龄幼虫三龄幼虫 5.5.蛹蛹 6.6.成虫成虫遗 传 学省 级 精 品 课 程一龄幼虫两龄幼虫三龄幼

2、虫果蝇幼虫形态观察果蝇幼虫形态观察蛹遗 传 学省 级 精 品 课 程三、实验原理三、实验原理 果蝇唾腺染色体特点：果蝇唾腺染色体特点：巨大性和伸展性，多线性，具有横纹，体联会，染色中心。巨大性和伸展性，多线性，具有横纹，体联会，染色中心。 正常：正常：间期间期DNADNA复制复制 两条染色单体两条染色单体 着丝点裂开着丝点裂开 子染色体子染色体 核分裂核分裂 胞质分裂胞质分裂 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNADNA不断自我复制，着丝点不裂开不断自我复制，着丝点不裂开同源染色体紧密配对：同源染色体紧密配对：体细胞联会体细胞联会，所以染色体只呈现，所以染色体只呈现

3、单倍数单倍数； 染色中心：染色中心：从染色体中心处伸出从染色体中心处伸出5 5条长臂条长臂，1 1条极短臂条极短臂；染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹横纹； 遗 传 学省 级 精 品 课 程果果 蝇蝇 唾唾 腺腺 染染 色色 体体果蝇唾腺染色体模式核型果蝇唾腺染色体模式核型遗 传 学省 级 精 品 课 程四、实验用具药品四、实验用具药品 1 1仪器用具：仪器用具：显微镜、双目解剖镜、恒温培养箱、培显微镜、双目解剖镜、恒温培养箱、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯、火柴等。精灯、

4、火柴等。 2 2药品试剂：药品试剂：无水酒精、冰醋酸、无水酒精、冰醋酸、 石炭酸品红、生理盐水、石炭酸品红、生理盐水、1 1N N盐酸、盐酸、 蒸馏水。蒸馏水。 3 3培养基：培养基：玉米琼脂培养基。玉米琼脂培养基。遗 传 学省 级 精 品 课 程1 1、选取、选取2 2、3 3、 4 4、五、实五、实 验验 步步 骤骤遗 传 学省 级 精 品 课 程1 1、选取幼虫、选取幼虫 取取三龄幼虫三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐生理盐水水，观察，观察幼虫结构幼虫结构：具一钝尾和带黑色口器的尖：具一钝尾和带黑色口器的尖头端。头端。 尾头遗 传 学省 级 精 品 课 程

5、一龄幼虫两龄幼虫三龄幼虫果蝇幼虫果蝇幼虫蛹遗 传 学省 级 精 品 课 程2 2、腺体剖取、腺体剖取 n取两支解剖针，一针压住幼虫身体的取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近头端近头端1/31/3处处，固定幼，固定幼 虫，另一针压住幼虫虫，另一针压住幼虫头部头部，压点尽可能靠头部口器处。，压点尽可能靠头部口器处。n将解剖针将解剖针平稳前移平稳前移，使头部与身体拉开，口器部分断开，体，使头部与身体拉开，口器部分断开，体内各器官从切口挤出，一对唾腺也随之而出。内各器官从切口挤出，一对唾腺也随之而出。 唾腺脂肪体解剖针解剖针遗 传 学省 级 精 品 课 程遗 传 学省 级 精 品 课 程3 3、腺体解离

6、、腺体解离 剥离脂肪体剥离脂肪体及其他杂物，分离出纯净的唾及其他杂物，分离出纯净的唾腺腺 ，用吸水纸小心吸去生理盐水。，用吸水纸小心吸去生理盐水。 加加1 1滴滴1N HCl1N HCl，浸，浸2 23 3分钟分钟，使组织疏松，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体散开。以便压片时细胞分散，染色体散开。 遗 传 学省 级 精 品 课 程4 4、染色、染色 用吸水纸用吸水纸吸去盐酸吸去盐酸，加，加1 1滴滴蒸馏水蒸馏水轻轻轻轻冲洗冲洗后吸干，重复后吸干，重复3 34 4次次，洗净残留的盐酸。，洗净残留的盐酸。加加2 2滴滴石炭酸品红染液石炭酸品红染液，染色，染色10102020分钟分钟（此过程应

7、保持（此过程应保持腺体一直处于染液的浸泡中）。腺体一直处于染液的浸泡中）。遗 传 学省 级 精 品 课 程遗 传 学省 级 精 品 课 程5 5、压片、压片 换上新鲜染液，换上新鲜染液，放盖玻片放盖玻片，吸去多余染液，吸去多余染液，进行进行压片（注意用力均匀、适度！）压片（注意用力均匀、适度！）。 在盖玻片上用中指轻轻压片、再用解剖针在盖玻片上用中指轻轻压片、再用解剖针柄柄轻轻敲打轻轻敲打，将染色体完全压散，使细胞，将染色体完全压散，使细胞充分分散。充分分散。 遗 传 学省 级 精 品 课 程低倍镜下的唾腺染色体低倍镜下的唾腺染色体6 6、观察、观察 将制片置将制片置低低倍镜下倍镜下找到分找到

8、分散好的标本，散好的标本，移至视野中心，移至视野中心，然后转到然后转到高倍高倍镜镜下观察。下观察。遗 传 学省 级 精 品 课 程6 6、观察、观察 高倍镜下观察高倍镜下观察：对分散良好、染色体臂充分伸展的：对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的片子，应仔细观察染色体的横纹横纹数量、数量、形状形状和排列顺序，和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的对照模式照片辨认出不同的染色体臂染色体臂。 遗 传 学省 级 精 品 课 程060921居东方制作居东方制作遗 传 学省 级 精 品 课 程六、实验报告六、实验报告 1 1、检查你制作的制片，寻找形态良好、检查你制作的制片，寻找形态良好、分散适中的图象仔细观察各条臂的特点，分散适中的图象仔细观察各条臂的特点，上交理想的制片，写上姓名。上交理想的制片，写上姓名。 2 2、画出你观察到的唾腺染色体图。、画出你观察到的唾腺染色体图。遗 传 学省 级 精 品 课 程人有了知识，就会具备各种分析能力，明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书，广泛阅读，古人说“书中自有