大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研究

1、大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研宄作者：杨克迪，葛利，李宏，唐文，龙云飞 【摘要】目的大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方提取物中色原酮苷成分。方法采用静态吸附实验考察d101, ab8，s 8,5等7种大孔吸附树脂对升麻苷和50甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的吸附效果，筛选出吸附 性能较好的树脂；对所筛选出的树脂，进一步采用固定床吸 附法分离玉屏风提取物中色原酮苷，探讨主要参数对色原酮 苷固定床穿透曲线及洗脱曲线的影响。结果ab 8树脂的 吸附性能优于其它考察的树脂，经ab 8树脂固定床分离 纯化后，玉屏风复方提取物中色原酮苷含量从提高到，回 收率为。结论ab 8大孔吸附可用于玉屏风提取

2、物中色原 酮苷活性成分的分离纯化。【关键词】玉屏风色原酮苷大孔树脂吸附分离纯化abstract：obj dpurifythechromone tractofyupingfengwnresinsuitableforseglycosidewasdeter ptionexperimentons ofresins,andfurtheectivetoseparatean glycosidefromtheex ithmacroporousresi eparationofchromon minedbystaticabsorevendifferentkinds rmore,theabsorptionandel

3、utionofchromelectedresinwerestorptionexperiment.nwasfoundedtobesuiandpurificationofc heexperimentresult entofchromoneglyco yupingfengincrease veryrateof%byseparb8resin. conclusiotableforseparationoneglycosideonthes udiedbyfixedbedabs resultstheab-8resi tableforseparation hromoneglycoside. tsshowedth

4、atthecontsideintheextractofdfrom%to%witharecoationonfixedbedofantheab8resinissuiandenrichmentofchromoneglycosideinex tractofyupingfeng.keywords : yupingfe ng ； chromoneglycoside ； macroporousre sinabsorption ； separationandpurifica tion玉屏风复方是中医用于扶正的经典名方，由黄芪、白术、 防风3味药材组成，升麻苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷等色原 酮苷是玉屏风主要活

5、性成分之一 1。目前，玉屏风制剂生 产中，很少对玉屏风提取物中色原酮苷、皂苷等活性成分富 集、纯化，制剂中活性成分含量较低。大孔树脂吸附分离技 术可有效富集中药活性部位，是提高中药制剂水平的一种有 效方法24。本实验探讨了玉屏风提取物中升麻苷和5-0- 甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的大孔树脂吸附分离，旨在 为玉屏风制剂的生产和改进提供一定参考。1仪器和试药agile ntlloo高效液相色谱仪（美国ag ilent公司）； b-688恒流泵（瑞士 buchi公司）；laborot a4000旋转蒸发器 （德国heidolph公司）;thz-82恒温震荡器。黄芪、防风、白术，购于广西一心药业公司

6、，经鉴定符 合xx年版中国药典（i部）相关项下规定；升麻苷及5-0- 甲基维斯阿米醇苷对照品；d101，ab-8, s-8, nka-9, d3 520, d4020, x-5大孔树脂购于南开大学化工厂；精制玉屏风复方 提取物，自制。2方法升麻苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷hplc分析色谱条件为 zorbaxsb-c18 色谱柱（mmx 150mm，5 y m）,柱温 30 °c，以甲 醇：水=40 : 60为流动相，流速1ml min-1，检测波长25 4nmo树脂静态吸附与解吸分别称取预处理好的d101, ab-8, s-8等湿树脂各g置于50ml锥型瓶中，加入色原酮苷含量已 知的

7、玉屏风提取物溶液20ml，在振荡器中以150r min-l的 转速、30°c下振摇12h。测定吸附平衡后溶液中色原酮苷的 含量，计算树脂的平衡吸附量。称取色原酮苷吸附量已知的树脂置于50ml的锥形瓶中， 加入95%的乙醇溶液20ml，在振荡器上以150r min-l的转速，30°c下振摇12h，计算色原酮苷解吸率。定床吸附分离筛选出的树脂湿法装于ocmx20cm吸 附柱中，树脂高度10cm,取色原0同苷含量已知的料液以一定 流速连续流过树脂柱，每20ml分段接收流出液，分析流出 液中色原酮苷的含量。固定床吸附结束后，以4倍床层体积 去离子水洗柱，然后用洗脱剂连续洗脱。3结果

8、与讨论树脂筛选表1为不同型号树脂在实验考察条件下对色原酮苷的吸 附和解吸效果。d101, ab-8及x-5等树脂对色原酮苷均有 一定吸附能力；ab-8和x-5树脂的解吸效果较好。综合考虑 树脂的吸附能力及解析效果，ab-8树脂较适宜于玉屏风提取 物中色原酮苷的吸附分离。表1不同型号树脂对色原酮苷 的吸附效果色原酮苷在ab-8树脂上的等温吸附行为1为玉屏风提取液中色原酮苷在ab-8树脂上的等温吸附行为，降低温度有利于色原酮苷的吸附。对等温吸附数 据进行拟合分析，溶液中色原酮苷浓度较低时，其吸附行为 较符合langmuir单分子层吸附模型，吸附速率较快，2h内 基本迗到平衡；当提取物溶液中色原酮苷

9、含量相对较高时， 提取液中其它成分的含量也相对较高，由于竞争性吸附，杂 质组分抑制了树脂对色原酮苷的吸附，图1中各温度下等温线略呈下降趋势。ab-8树脂固定床吸附分离色原酮苷 3为色原酮苷浓度为mg ml-1的料液以不同流速流过 ab-8树脂固定床时色原酮苷的穿透曲线，纵坐标为流出液中 色原酮苷的对比浓度，横坐标为穿过树脂柱的料液体积。结 果表明，低流速下，料液近似以活塞流穿过床层，固定床中 传质区较窄，穿透曲线较陡直，树脂利用率较高；增加流速， 料液与树脂接触时间变短，传质区扩展，穿透曲线趋于平缓，树脂利用率降低4为料液流速为lml min-1，色原酮苷浓度对穿透曲线的影响。由图可知，随着料

10、液中色原酮苷浓 度增加，传质速率增加，传质区变窄，树脂利用率提高。综 合考虑料液流速对树脂利用率及树脂床处理能力、料液中杂 质与色原酮苷的竞争性吸附，本实验以料液流速为 lml min-1,色原酮苷浓度为mg ml-1作为固定床吸附条6进一步考察了 30%乙醇作为洗脱剂，流速对色原酮苷洗脱过程影响。结果表明，流速较低时，峰形相对对称， 但峰形较宽，有可能与料液中其它杂质峰重叠，影响分离效 果；提高流速，洗脱峰集中，但峰拖尾程度有所增加。综合 考虑，实验采用lml min-1为洗脱流速。玉屏风复方提取物中色原酮苷吸附分离效果取色原酮苷含量为的玉屏风提取物用乙醇溶解，配成约mg ml-1 的色原酮苷料液，以lml min-1的流速流过ab_8固定床， 待色原酮苷穿透后，用4倍床层体积的去离子水洗柱，然后 以100ml30%乙醇洗脱，收集洗脱液，挥去溶剂，分析得到的 形物中色原酮苷含量。实验结果表明，提取物中色原酮苷 含量由提高到，色原酮苷回收率为。4结论ab-8树脂对玉屏风提取物中色原酮苷有较好的吸附效 果，其静态吸附量为mg* g-1，且便于洗脱，经ab-8固定床 吸附分离后，提取物中色原酮苷从提高到，回收率为， 色原酮苷得到有效富集。【参考文献】1 国家药典委员会.中国药典，i部s.北京：化 学工业出版社，xx: 409.2 朱浩，侯世祥，孙毅毅，等.大