实验四茶叶中茶多酚含量的测定

1、实 验 四 茶 叶 中 茶 多 酚 含 量 的 测 定 高 锰 酸 钾 直 接 滴 定 法 一、目的： 掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗1mL mL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。试剂： 1 、 %靛红溶液：称取靛红 1g 加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸50mL冷却后用蒸馏水定容至1000mL如果靛红不纯，可下 法磺化处理是：称取靛红1g,加浓

2、硫酸50mL在80C烘箱或水浴中加热磺 化46h,用蒸馏水定容至1000mL过滤后贮于棕色瓶中。2、 %草酸溶液：准确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL 准确吸取草酸溶液10mL放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水 50mL再加入相对密度为的浓硫酸10mL摇匀，在7080C水浴中保温5分 钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以 后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。计 算高锰酸钾溶液的百分比浓度。四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎

3、样品1g,放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL 在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入 100mL容量瓶中，冷 至室温，最后用蒸馏水定容至100mL摇匀。2、测定:取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入 僦红溶液5mL再加入供测试液 5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度 以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止， 记下消耗的高锰酸钾毫升数。同时做空白测定。五、结果计算A B0.00582/0.318X=m V1/V2式中：x茶多酚的含量，%，B空白消耗的高锰酸钾毫升数，mLA样品消耗的高锰酸钾毫升数，mL 3 -高锰酸钾

4、的浓度，%m-样品的质量g, V1 测定用供测试液的体积，mL , V2-供测试液的体积， mL实验三 茶叶中茶多酚含量的测定一一酒石酸铁比色法一、实验目的：1、掌握酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量的原理及操作。2、进一步熟悉721 -分光光度计的使用。二、原理：茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的 20%35%，由约30种以上的酚类 物质所组成，通称茶多酚。按其化学结构分为四类：（1）儿茶素类，属黄烷 醇类；（2）黄酮及黄酮醇类；（3）花白素及花青素，即羟基-4-黄烷醇 及其钾盐；（4）醋酸及缩酚酸类。其中以黄烷醇类化合物最重要（占多酚的80左右）。纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕

5、色物， 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。茶多酚能溶于水、 乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120 C并保持30min,无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。实验表明，茶多酚清除活性氧自由基作用的活性，为等量维生素C的493倍, 且能有效消除脂质过氧化产物丙二醛,具有降血脂的显着功效。还有研究表 明,茶多酚还具有抑制痢疾、 伤寒、霍乱、金黄色葡萄球菌等有害菌的作用； 具有较强的抗放射性作用,以及在抗衰老,抑制瘤细胞,预防心脑血管疾病 等方面都显示出很好的效应,是一种有开发前景的天然抗氧化剂。1988年 7月我国已批准茶多酚作为食品添加剂。国

6、内已建立了茶多酚工业化生产线, 并开发研制出了茶多酚的第二代产品即儿茶素（ TC）。 茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法, 由于高锰酸钾 直接滴定法操作比较复杂,且靠肉眼观察颜色判断终点,如果样品溶液颜色 较深时,可能影响测定结果。本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含 量。酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物, 络合物溶液颜色的深浅与茶多 酚的含量成正比。因此可以用比色方法测定。该法可避免高锰酸钾滴定法所 产生的人为视觉误差。三、仪器与试剂： 仪器：分光光度计 试剂：（1）酒石酸铁溶液：称取FeSO 7H2O ，含4个结晶水的酒石酸钾钠，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至 10

7、00mL(2) 的磷酸缓冲液：NazHPO 12HO , 2HO,加蒸馏水溶解后.用蒸馏水稀释至1000mL四、步骤：(I )样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品 1g于200mL三角烧 瓶中，加入沸水80mL在沸水浴中浸提30min,然后过滤、洗涤，滤液倒人 100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。(2)测定：吸取样品溶液1mL于25mL容量瓶中，加蒸馏水4mL加 酒石酸铁溶液5mL摇匀，再加入磷酸缓冲液稀释至刻度。以蒸馏水代替样 品溶液加入同样的试剂作空白。选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。五、计算：A'913 T 100%式中：3 茶多酚

8、的含量°00 % A样品溶液的吸光度值，T 样品溶 液的总体积，mLV 测定用样品溶液的量，mL n样品质量，g用1cm比色杯，当吸光度为时，试液中茶多酚的浓度为mL六、说明及注意事项：1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌，放冰箱中保存或临用时现配。2、样品溶液制备中的注意事项：(1) 较透明的样液，如果味茶饮料，将样液充分摇匀后，直接取样测定。(2) 较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混匀的样液25mL 于50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混匀，放置15min,用水定容至 刻度，过滤。(3) 含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液100mL于250mL 的烧杯中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10mi n,以将二氧化碳排除，放冷，用水补足原来的质量，摇匀，