C应蛋白及临床应用

1、c-反应蛋白及临床应用反应蛋白及临床应用 protein structure crp结构结构c反应蛋白的生理和生化反应蛋白的生理和生化 在细胞因子il-6家族诱导下，crp在肝中合 成迅速。 正常合成率为 l10 mgd，急性炎症时每 天合成超过 lg/d。 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中 20是合成crp。 当il-6刺激物缺乏时，在 24 h内合成率降 至正常。 循环中crp半衰期约19h，但一旦它与配体结 合，可快速的被清除。 肝外合成对血清水平影响作用很小。crp的生物学功能的生物学功能crp的生物学功能的生物学功能-机理机理结合坏死的内源性物质 在钙离子存在的情况下，crp能

2、结合坏死的内源性物质和效应细胞, 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时，crp可发生与宿主细胞的结合。在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射crp可改善sle的状况。 人crp基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。crp量的减少可能与sle发病机理有关。 crp量的减少使结合的细胞碎片减少。crp的生物学功能的生物学功能-机理机理 结合外源性物质 细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。crp具有保护机体抗细菌感染的能力。 crp 保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。 crp的生物学功能的生物学功能-机理机理结合配体的crp激活下列生物系统，导致配体的消除

3、：crp对补体系统的激活.crp结合iggfcr，增强自然杀伤细胞的活性。crp的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。crp和血小板激活因子(paf)结合抑制paf刺激的血小板聚集。crp的生物学功能的生物学功能-机理机理crp具有多效性的作用。 当抑制干扰素的合成时 ，crp可诱导il-1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子il-10的释放 . crp也可诱导炎症反应。 crp向上-调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放il-8， 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂-1的表达和活性、增加il-1, il-6, il-18, 和肿瘤坏死因子的释放. crp诱导或抑制炎症反应依赖于环境。 crp功能

4、识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。 吞噬溶解入侵微生物。急性相蛋白急性相蛋白crp合成的生物调控合成的生物调控crp基因位于1号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。肝脏crp合成的调节主要发生在转录阶段。由il-6诱导，il-1可增加此作用。 crp启动子最近区为stat3 和 rel 蛋白的结合部位。这些因子的相互作用增加dna 结合c/ebp家属成员的稳定性，从而有效地诱导了crp基因的表达。神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成crp。在这些部位的调节机制还不清楚。修饰的crp(m-crp) -modified crp -modified c

5、rp目前认为m-crp是原crp的单体。与天然crp不同,表现在分子大小,溶解度,抗原性,带电荷数等方面的差别. m-crp具抗菌作用。m-crp具有强大地诱发炎症的作用。方法灵敏度参考献试管内沉淀试验- jexpmed1930;52561毛细管内沉淀试验1020mg/lamjmed1950;8445改良平板双扩散法1020mg/lintarchallergy1962改良琼脂柱扩散法3.0mg/lprocsocexpbiol1955改良单扩散法1.0mg/l actapatholmicrobiolscand琼脂糖凝胶电泳法1.0mg/lclinchimacta1969放射电免疫扩散法10g/l

6、jclinlabinvest1973补体结合试验0.6mg/lprocsocexpbiol1954胶乳凝集试验1.0mg/lnature(london)1961高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml dade germany2000荧光抗体法 nature(london)1961放射免疫测定法 3g/l jlabclinmed1976检测方法检测方法 crpcrp检测方法检测方法 - -免疫沉淀试验检测crp原始方法.将兔抗crp血清吸入毛细管内。把它浸入被测血浆或血清内,因毛细管虹吸作用被吸入,与抗crp血清形成接触界面。这种方法较粗糙,取得结果时间较长,也不太正确可靠.crpcrp检测方法检

7、测方法 - -免疫浊度法 可溶性crp-ag与可溶性抗crp-ab反应,形成可见的网络状沉淀性ic复合物点.ic复合物对光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。在被测样品中加抗血清后一定时间,测定反应系统散射光强度或浊度变化,可对被检物及其浊度加以检测。根据仪器的光学系统,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可crp测定项目。crpcrp检测方法检测方法 - -胶乳凝集试验(lat)将强化的兔抗crp抗体固定于胶乳微粒上。加入被测样品后与crp在3分钟内形成肉眼可见的凝集物。胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法,试剂稳定性佳。检测方法检测方法 -

8、 - 标记免疫测定elisa和免疫发光法和化学发光法等都可用于crp的测定。化学发光法的灵敏度和定量精确度可与ria媲美,而无同位素污染,试剂稳定,分析速度快。crp-poct(床边试验)法 elisa干片法。把磷脂酰胆碱(pc)化学交联固定于载体。被测crp与载体的pc结合。被酶标记的抗crp单抗结合。可灵敏、特异性检测crp,约5分钟可得结果.。检测方法检测方法 - - 胶乳增强试验（shcrp）：常规crp检验方法可在感染或组织损伤时检测出crp10mg/l。该检测方法具有较高的灵敏度。这个水平（0.110mg/l）的c反应蛋白又被称为超敏c反应蛋白（hscrp）。 crp检测的评估1、

9、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。2、定量：散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为5150 mgl ，cv5% 。胶乳增强试验-shcrp检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。胶乳增强试验-shcrp检测方法很大程度提高了敏感度。crp检测对标本的采集也无特殊要求。高浓度的类风湿因子可产生crp假性升高。crp筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。临床应用临床应用_参考范围crp参考范围中值成人和儿童0.0688.2 mg/l0.58 mg/l新生儿，脐血0.6 mg/l出生后第4天至1个月的婴儿1.6 mg/l分娩母亲47 mg/l临床意义

10、 器质性疾病的筛选 急性或慢性炎症如伴有细菌感染。 自身免疫或免疫复合物病。 组织坏死和恶性肿瘤。临床意义感染的诊断与鉴别crp在细菌感染发生后68h即开始升高，2448h达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。crp在病毒感染时无显著升高。革兰阴性感染：可发生最高水平的crp，有时高达 500 mgl。革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在100 mgl 左右。病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过50 mgl，极少超过 100 mgl。在细菌感染的急性期，crp显著升高，寡聚腺苷合成酶正常；在病毒感染时crp水平正常或轻微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。临

11、床意义c反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标，c反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性。c反应蛋白含量2.1mg/l的人与 100 mgl表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在。临床意义-抗生素的治疗监测抗生素的治疗监测 系列血浆crp的测定，可用来作为下列情况的治疗监测： 在许多感染时最有效使用抗生素治疗。 根据crp水平的变化来决定抗炎药物的剂量。 在crp下降至正常时，中 断抗菌素治疗。 在高危人群缺少微生物学诊断时，为抗生素治疗的指引。临床意义-抗生素的治疗监测抗生素的治疗监测 临床意义-外科 患者施行手术后2472h,血中crp水平明显升 高,约在第57天恢复正常。 凡骤升后持

12、续高水平多预示合并感染。 对中、大手术患者,在术前和术后37天各作 常规检测一次。 凡术后57天crp仍持续高水平者,理应怀疑 合并感染,并配合治疗作随访监测。临床意义-内科 肺炎: crp100mg/l，强烈提示细菌感染，如化脓性支气管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不会超过50mg/l。 心血管病，在痛疼开始后数小时内，crp升高， 3-4d达高峰，在ck-mb回到正常后7-10d也降至正常。 代谢综合征 代谢综合征分组，根据crp水平可将为 低危险组，3 mg/临床意义-妇产科 盆腔炎和子宫附件炎. crp值升高 盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性。 诊断胎膜早破宫内感染. 胎膜早破时，如母亲cr

13、p在产前6-19h超过50mg/l可作为出现ais的标准；产后第一天出现的ais的crp将比正常分娩时高出2-3倍。 无并发症的ct和ng感染不会引起crp升高。 但扩散到盆腔可引起急时相反应。临床意义-儿科新生儿浓毒血症:出生3天前crp10mg/l表示感染.如果crp在24h内没有超过10mg/l，多无新生儿感染.小儿发热 : 患病超过12h，crp显著40mg/l，esr显著30mm/h应关注为细菌性感染。脑膜炎 : crp20mg/l提示为细菌感染的可能；100mg/l时具有细菌感染诊断价值。结脑crp在20-60 mg/l。成功的治疗可使crp在一周内降至正常。 小小 结结crp是一五球体结构的高度保守的急时相蛋白。crp为一模式识别分子，与特殊的分子结构结合而发挥作用。为宿主先天性免疫应答的