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文档简介
1、实验十:酶的特性实验十:酶的特性实验目的:实验目的:加深对酶的性质的认识。实验内容:实验内容:1.温度对酶活力的影响2.ph对酶活力的影响3.酶的激活及抑制剂4.酶的专一性温度对酶活力的影响温度对酶活力的影响一、原理:一、原理: 酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为3740,植物酶的最适温度为5060 。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100,其活性并无明显改变,但在100的溶液中却很快地完全失去活性。 低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。二、器材:二、器材:1)试管及试管架2)恒温水浴3)冰浴4)沸水浴三、试剂
2、和材料:三、试剂和材料:1)含0.2淀粉的0.3nacl溶液150ml,需新鲜配制 2)稀释200倍的唾液50ml:用蒸馏水漱口,以清除事物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使其流入量筒并稀释200倍,混匀备用。3)ki碘溶液50ml:将ki 20g及碘 10g溶于100ml水中。使用前稀释10倍。四、操作方法:四、操作方法: 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下,淀粉被不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色
3、。在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。来判断。取三支试管,编号后按下表加入试剂:取三支试管,编号后按下表加入试剂:管号管号123淀粉溶液(淀粉溶液(ml)1.51.51.5稀释唾液(稀释唾液(ml)11煮沸过的稀释煮沸过的稀释唾液(唾液(ml) 摇匀后,将摇匀后,将1号、号、3号两试管放入号两试管放入37 恒恒温水浴中,温水浴中,2 2号试管放入冰中,号试管放入冰中,10min10min后去后去处,(将处,(将2 2号管内液体分为两半)用号管内液体分为两半)用kiki碘碘溶液来检验溶液来检验1 1、2
4、2、3 3管内淀粉被唾液淀粉酶管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果,将水解的程度。记录并解释结果,将2 2号管剩号管剩下的一半溶液放入下的一半溶液放入3737水浴中继续保温水浴中继续保温10min10min后,再用碘液实验,结果如何?后,再用碘液实验,结果如何?ph对酶活性的影响对酶活性的影响一、原理一、原理 酶的活力受环境酶的活力受环境ph的影响极为显著。不同酶的最适的影响极为显著。不同酶的最适ph值不同。本实验观值不同。本实验观察察ph对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适ph约为约为6.8。二、器材二、器材1)试管及试管架试管及试管架2
5、)吸管吸管3)滴管滴管4)50ml锥形瓶锥形瓶5)恒温水浴恒温水浴三、试剂和材料三、试剂和材料1)新配制的溶于新配制的溶于0.3nacl的的0.5淀粉溶液淀粉溶液 250ml2)稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml3)0.2mol/l磷酸氢二钠溶液磷酸氢二钠溶液 600ml4)0.1mol/l柠檬酸溶液柠檬酸溶液 400ml5)ki碘溶液碘溶液 50ml6)ph试纸:试纸: ph=5、 ph=5.8、 ph=6.8、 ph=8四种四种四、操作方法:四、操作方法: 取四个标有号码的取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表添锥形瓶。用吸管按下表添加加0.2mol/l磷酸氢二钠溶液
6、和磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制备柠檬酸溶液以制备ph5.08.0的四种缓冲液。的四种缓冲液。 从四个锥形瓶中各取缓冲液从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml,分别注入,分别注入4支支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5淀淀粉溶液粉溶液2ml和稀释和稀释200倍的唾液倍的唾液2ml。向各试管中加入。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物混。将各试管内容物混匀,并依次置于匀,并依次置于37 恒温水浴中保温。恒温水浴中保温。 第四管加入唾液第四管加入唾液2min后,每隔后,每隔1min由第由第3管取出一管取出一
7、滴混和液,置于白瓷板上,加滴混和液,置于白瓷板上,加1小滴小滴ki碘溶液,检碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时,向所验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时,向所有试管依次添加有试管依次添加12滴滴ki碘溶液。添加碘溶液。添加ki碘溶碘溶液的时间间隔从第一管起,亦均为液的时间间隔从第一管起,亦均为1min。 观察各试管内容物呈现的颜色,分析观察各试管内容物呈现的颜色,分析ph对唾液对唾液淀粉酶活性的影响。淀粉酶活性的影响。锥形瓶锥形瓶号码号码0.2mol/l磷酸氢二磷酸氢二钠(钠(ml)0.1 mol/l柠柠檬酸(檬酸(ml)ph15.154.855.026.053.955.837
8、.722.286.849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制唾液淀粉酶的活化和抑制一、原理一、原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂,铜离子为其抑制剂。的活化剂,铜离子为其抑制剂。二、器材:二、器材:1)恒温水浴恒温水浴2)试管及试管架试管及试管架三、试剂和材料:三、试剂和材料:1)0.1的淀粉溶液的淀粉溶液 150ml2)稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 150ml3)1nacl溶液溶液 50ml4)1硫酸铜溶液硫酸铜溶液 50ml5)1硫酸钠溶液硫酸钠溶液 50ml6)ki碘溶液碘溶液 100ml 四、
9、操作方法:四、操作方法:管号管号12340.1的淀粉溶液(的淀粉溶液(ml)1.51.51.51.5稀释唾液(稀释唾液(ml)0.50.50.50.51硫酸铜溶液(硫酸铜溶液(ml)0.51nacl溶液(溶液(ml)0.51硫酸钠溶液(硫酸钠溶液(ml)0.5蒸馏水(蒸馏水(ml)0.537 恒温水浴、保温恒温水浴、保温10minki碘溶液(滴)碘溶液(滴)23232323现象现象注:保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整解释说明,说明本实验第3管的意义酶的专一性酶的专一性一、原理一、原理 酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用为例,来说明酶的专粉
10、酶和蔗糖酶的作用为例,来说明酶的专一性。一性。 淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成由还原性的麦芽糖,但不能催解淀粉生成由还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉生还原性葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉的水解。用的水解。用benedict试剂检查糖的还原性。试剂检查糖的还原性。二、器材:二、器材:1)恒温水浴恒温水浴2)沸水浴沸水浴3)试管及试管架试管及试管架三、试剂和材料:三、试剂和材料:1)2蔗糖溶液蔗糖溶液 150ml2)溶于溶于0.3nacl的的1淀粉溶液(需新
11、鲜配制)淀粉溶液(需新鲜配制) 150ml3)稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml4)蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤23次(离心),然后放在滤纸上自然次(离心),然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母干燥。取干酵母100g,置于乳钵内,添加适量蒸馏水及少量细沙,置于乳钵内,添加适量蒸馏水及少量细沙,用力研磨,提取约用力研磨,提取约1h,再加蒸馏水使总体积约为原体积的,再加蒸馏水使总体积约为原体积的10倍。离倍。离心,将上清液保存于冰箱中备用。心,将上清液保存于冰箱中备用。5)benedict氏试剂氏试剂 200ml 无水硫酸铜无水硫酸
12、铜1.74g溶于溶于100ml热水中,冷却后稀释至热水中,冷却后稀释至150ml。取柠檬。取柠檬酸钠酸钠173g,无水碳酸钠,无水碳酸钠100g和和600ml水共热,溶解后冷却并加水至水共热,溶解后冷却并加水至850ml。再将冷却的。再将冷却的150ml硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。四、操作方法:四、操作方法:1.淀粉酶的专一性:管号管号1234561淀粉溶液(滴)淀粉溶液(滴)4442蔗糖溶液(滴)蔗糖溶液(滴)444稀释唾液(稀释唾液(ml)11煮沸过的稀释唾液煮沸过的稀释唾液(ml)11蒸馏水(蒸馏水(ml)1137 恒温水浴恒温水浴15minbenedict试剂(试剂(ml)111111沸水浴沸水浴23min现象现象 解释实验结果(提示:唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶)解释实验结果(提示:唾液除含淀粉酶外还含
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