乙肝标志物临床应用进展ppt课件

1、乙肝标志物的临床运用金堂县第一人民医院 喻茂文主要内容n 1、乙型肝炎病毒的根本特性、乙型肝炎病毒的根本特性n 2、常见乙型肝炎标志物、常见乙型肝炎标志物n 3、乙肝检验常见方法结果判读原那么、乙肝检验常见方法结果判读原那么n 4、n 乙型肝炎病毒简称乙肝病毒，也称乙型肝炎病毒简称乙肝病毒，也称丹氏颗粒，颗粒分为外壳和中心两丹氏颗粒，颗粒分为外壳和中心两部分。它是一种部分。它是一种DNA病毒，属于嗜病毒，属于嗜肝肝DNA病毒科，这是一种传染性很病毒科，这是一种传染性很强的病毒，它可以经过血液、精液强的病毒，它可以经过血液、精液和其他体液进展传播。乙型肝炎病和其他体液进展传播。乙型肝炎病毒治疗主

2、要以适当休憩和合理营养毒治疗主要以适当休憩和合理营养为主，加上抗病毒药物治疗。为主，加上抗病毒药物治疗。1n 染乙肝病毒的病人血清中有三种不同形状的颗粒，分别为大球形颗粒染乙肝病毒的病人血清中有三种不同形状的颗粒，分别为大球形颗粒(直径直径42nm)、小球形颗、小球形颗粒粒(直径直径22nm)和管形颗粒和管形颗粒(直径直径22nm)。n 其中，大球形颗粒又称其中，大球形颗粒又称Dane颗粒，是颗粒，是1970年年Dane首先用电镜在乙肝病人血清中发现的。首先用电镜在乙肝病人血清中发现的。Dane颗粒是有感染性的完好颗粒是有感染性的完好HBV颗粒，呈球形，具有双层衣壳。外衣壳由来自宿主的脂质双颗

3、粒，呈球形，具有双层衣壳。外衣壳由来自宿主的脂质双层和包膜蛋白组成，有大约层和包膜蛋白组成，有大约400个个HBV外表抗原外表抗原HBsAg即蛋白镶嵌于脂质双层中。用离即蛋白镶嵌于脂质双层中。用离子去垢剂如子去垢剂如NP-40处置病毒颗粒，去除病毒外衣壳后，暴显露内层中心。中心的外表为病毒的处置病毒颗粒，去除病毒外衣壳后，暴显露内层中心。中心的外表为病毒的内衣壳，内衣壳蛋白为内衣壳，内衣壳蛋白为HBV中心抗原中心抗原HBcAg。HBcAg经酶或去垢剂作用后可暴显露经酶或去垢剂作用后可暴显露e抗抗原原(HBeAg)。中心颗粒中间包裹着双链。中心颗粒中间包裹着双链DNA分子、分子、DNA聚合酶聚合

4、酶P蛋白等。蛋白等。n 而小球形颗粒和由小球形颗粒串联而成的管形颗粒均由病毒的包膜蛋白构成，不含病毒基因而小球形颗粒和由小球形颗粒串联而成的管形颗粒均由病毒的包膜蛋白构成，不含病毒基因组，因此不具有感染性，被称为亚病毒颗粒。组，因此不具有感染性，被称为亚病毒颗粒。n BV在感染者血清中主要以三种方式存在：在感染者血清中主要以三种方式存在：n 1.小球形颗粒，直径约小球形颗粒，直径约22nm。n 2.管状颗粒，直径约管状颗粒，直径约22nm，长度，长度1001000nm。这两种颗粒均由与病毒包膜一样的脂蛋白。这两种颗粒均由与病毒包膜一样的脂蛋白即乙型肝炎外表抗原，即乙型肝炎外表抗原，HBsAg组

5、成，不含核酸，帮无传染性。组成，不含核酸，帮无传染性。n 3.大球形颗粒，即完好的大球形颗粒，即完好的HBV颗粒，也称颗粒，也称Dane颗粒，直径约颗粒，直径约42nm，分为包膜和中心两部分。，分为包膜和中心两部分。包膜含包膜含HBsAg、糖蛋白和细胞脂肪，厚、糖蛋白和细胞脂肪，厚7nm，中心直接，中心直接28nm，内含中心蛋白即乙型肝炎，内含中心蛋白即乙型肝炎中心抗原，中心抗原，HBcAg、环状双股、环状双股HBV-DNA和和HBV-DNA多聚酶。多聚酶。n 乙肝病毒感染的实验室检测方法主要有胶体金免疫层析法乙肝病毒感染的实验室检测方法主要有胶体金免疫层析法GICA、酶联免疫吸附实验、酶联免

6、疫吸附实验ELISA、化学发光法、化学发光法CLA以及荧光定量以及荧光定量PCRFQ-PCR。如今，在同一实验室中，。如今，在同一实验室中，往往存着这几种方法的并存，或者不同实验室运用的方法不同，这样就容易呵斥结果的不一往往存着这几种方法的并存，或者不同实验室运用的方法不同，这样就容易呵斥结果的不一致。假设在某种情况下，同一个患者运用不同的方法检测呵斥结果不一致，检验科或临床怎致。假设在某种情况下，同一个患者运用不同的方法检测呵斥结果不一致，检验科或临床怎样解释呢？样解释呢？第一部分 GICA与ELISA、CLAn GICA是一种快速、经济的检测方法，往往在大医院急诊或一些基层医院作常规运用。

7、由于试是一种快速、经济的检测方法，往往在大医院急诊或一些基层医院作常规运用。由于试剂制备工艺、反响时间短、肉眼判读有差别等的局限，该方法的特异性、敏感性均较低。故剂制备工艺、反响时间短、肉眼判读有差别等的局限，该方法的特异性、敏感性均较低。故当发生该方法与当发生该方法与ELISA、GLA不一致时，在标本无误、反复检测结果照旧的情况下，以后两不一致时，在标本无误、反复检测结果照旧的情况下，以后两个方法的检测结果为主要参考，解释为方法学的局限性。个方法的检测结果为主要参考，解释为方法学的局限性。第二部分 ELISA与CLAn 目前，许多三级医院都安装了化学发光仪用于乙肝五项的定量检测。相对于目前，

8、许多三级医院都安装了化学发光仪用于乙肝五项的定量检测。相对于ELISA，CLA具具有更高的敏感性和特异性。假设定量检测的数值高于设定的参考值上限，而有更高的敏感性和特异性。假设定量检测的数值高于设定的参考值上限，而ELISA结果那么结果那么阴性，这往往是检测灵敏度的问题。阴性，这往往是检测灵敏度的问题。CLA的灵敏度更高，所以具有较低的检测限，而的灵敏度更高，所以具有较低的检测限，而ELISA需求抗体或抗原到达一定的浓度时才干在需求抗体或抗原到达一定的浓度时才干在OD值上呈现阳性的变化，故检测限较高一些。这在值上呈现阳性的变化，故检测限较高一些。这在开展定量检测的检验科比较常见，尤其是定量检测

9、的五项目的往往出现一些稀有的方式，大开展定量检测的检验科比较常见，尤其是定量检测的五项目的往往出现一些稀有的方式，大约约5%的几率，就是这个缘由。的几率，就是这个缘由。n 假设假设ELISA检测的结果为阳性而检测的结果为阳性而CLA检测的相应的目的低于参考值上限，那要思索检测的相应的目的低于参考值上限，那要思索ELISA能能否为假阳性，另一方面也能够是包被的抗原的不同或者是检测的位点的不同，尤其是某些变否为假阳性，另一方面也能够是包被的抗原的不同或者是检测的位点的不同，尤其是某些变异的乙肝病毒有能够其抗原决议簇发生变异而不能发生抗原抗体反响，从而影响结果检测。异的乙肝病毒有能够其抗原决议簇发生

10、变异而不能发生抗原抗体反响，从而影响结果检测。第三部分 五项目的检测与HBV-DNA检测n 无论是无论是GICA，还是，还是ELISA和和CLA，都是检测的血清中的抗原或抗体，而，都是检测的血清中的抗原或抗体，而FQ-PCR检测的是乙检测的是乙肝病毒肝病毒DNA的量，这一点一定要明确。前三种方法检测的抗原阳性，不一定的量，这一点一定要明确。前三种方法检测的抗原阳性，不一定HBV-DNA量就高；量就高；反之，反之，FQ-PCR 检测的检测的HBV-DNA量高于参考范围，其他三种方法检测的量高于参考范围，其他三种方法检测的HBsAg或或HBeAg也也不一定就呈阳性。从实际说一下大家就很明白了：乙肝

11、病毒在组装、增殖过程中，产生三种不一定就呈阳性。从实际说一下大家就很明白了：乙肝病毒在组装、增殖过程中，产生三种颗粒，即颗粒，即Dane颗粒、小球形颗粒和管形颗粒。颗粒、小球形颗粒和管形颗粒。Dane颗粒是完好的病毒体，包含颗粒是完好的病毒体，包含HBV-DNA，而后两者为病毒增殖过程中过剩的成分，含有而后两者为病毒增殖过程中过剩的成分，含有HBsAg和和HBeAg，但不含，但不含HBV-DNA。FQ-PCR检测的检测的HBV-DNA量与量与Dane颗粒的量近乎呈比例关系，但与小球形和管型颗粒不成比例颗粒的量近乎呈比例关系，但与小球形和管型颗粒不成比例关系；后两者与关系；后两者与HBsAg和和

12、HBeAg的浓度呈一定比例关系。说到这里，估计大家都明白了。的浓度呈一定比例关系。说到这里，估计大家都明白了。第二部分 在乙肝病毒感染相关的实验室检测中，要遵照下面四个原那么：n 质控原那么质控原那么n 检测结果互不参考原那么检测结果互不参考原那么n 不以一个结果否认另一个结果的原那么不以一个结果否认另一个结果的原那么n 动态察看的解释原那么动态察看的解释原那么质控原那么n 这是首先要保证的。结果不一致并进展科学解释的前提是他的分析前、中、后的质控都是没这是首先要保证的。结果不一致并进展科学解释的前提是他的分析前、中、后的质控都是没问题的；否那么，错误的根底上的一切讨论都毫无意义。问题的；否那

13、么，错误的根底上的一切讨论都毫无意义。n 就是检测五项目的的定性结果之间就是检测五项目的的定性结果之间GICA与与ELISA、定性与定量结果之间、定性与定量结果之间GICA、ELISA与与CLA、五项目的结果与、五项目的结果与HBV-DNA定量结果之间定量结果之间GICA、ELISA、CLA与与FQ-PCR不要不要相互参考，不要一种方法参考另一种方法来报告结果。比如，相互参考，不要一种方法参考另一种方法来报告结果。比如，GICA与与ELISA检测结果不一致检测结果不一致时，倾向于把时，倾向于把GICA改成改成ELISA一致的结果；或者一致的结果；或者ELISA的结果参考的结果参考CLA的结果进

14、展报告，这的结果进展报告，这都是不妥的。在实践过程中，估计还是有人这样做的，仅仅是为了防止结果不好解释；实践都是不妥的。在实践过程中，估计还是有人这样做的，仅仅是为了防止结果不好解释；实践上，小编以为，不会解释永远不好解释；防止不好解释早晚会最终无法解释，由于不能够一上，小编以为，不会解释永远不好解释；防止不好解释早晚会最终无法解释，由于不能够一切的病人都同时检测定性和定量吧？他总不会把定性和定量的同时检测吧？他总不能防止患切的病人都同时检测定性和定量吧？他总不会把定性和定量的同时检测吧？他总不能防止患者在他这儿作定性检测而在其他医院作定量检测吧？者在他这儿作定性检测而在其他医院作定量检测吧？

15、不以一个结果否认另一个结果的原那么n 我们都知道，方法学之间是有差别的，不同的检测需求可以采用不同的方法。即使我们都知道，方法学之间是有差别的，不同的检测需求可以采用不同的方法。即使GICA具有具有特异性、灵敏度偏低的缺陷，但它也有检测速度快、经济适用的有点；即使是特异性、灵敏度偏低的缺陷，但它也有检测速度快、经济适用的有点；即使是CLA、FQ-PCR具有特异性、灵敏度高的优点，但也有检测本钱偏高、添加患者负担的缺陷。我们不能以形具有特异性、灵敏度高的优点，但也有检测本钱偏高、添加患者负担的缺陷。我们不能以形而上学的观念，对凡与较先进的方法不一致的结果就以为是不能够甚至不正确的。理由有三：而上

16、学的观念，对凡与较先进的方法不一致的结果就以为是不能够甚至不正确的。理由有三：一不同检测方法能够检测的物质不同，在一定程度上没有可比性；二不同的方法检一不同检测方法能够检测的物质不同，在一定程度上没有可比性；二不同的方法检测的物质即使一样或类似，但尚没有检测的金规范，即没有标杆去恒定，故不能盲目或阅历测的物质即使一样或类似，但尚没有检测的金规范，即没有标杆去恒定，故不能盲目或阅历性地评判优劣；三以对错判别结果，不利于不同实验室的认可与团结。假设有患者从别性地评判优劣；三以对错判别结果，不利于不同实验室的认可与团结。假设有患者从别的医院用的医院用GICA方法检测的五项目的，这次到他这儿用的是方法检测的五项目的，这次到他这儿用的是CLA，他要是通知患者或家属说别，他要是通知患者或家属说别的医院查的不准，这容易制造矛盾，决不可为，况且这也是不科学的做法。的医院查的不准，这容易制造矛盾，决不可为，况且这也是不科学的做法。动态察看的解释原那么n 在乙肝病毒感染的相关检测结果解释中，无论是检验还是临床，都要遵照动态察看的解释