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文档简介
1、1.肽聚糖:肽聚糖是由多糖链经短肽相交联而形成的网络状分子,是真细菌细胞壁特有的成分,构成细菌细胞壁坚硬的骨架部分。2.脂多糖:(LPS),是位于G-细菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质,由类脂A、核心多糖和O特异侧链3部分组成。3.原生质体(protoplast):指在人为条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁的合成后,所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。常见于革兰氏阳性菌。4.球状体或原生质球(sphaeroplast):指还残留部分细胞壁的原生质体,常见于革兰氏阴性细菌。5.芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗
2、逆性极强的休眠构造,称为芽孢或内生孢子。6.伴孢晶体:少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌在其形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体内毒素,称为伴孢晶体。7.菌落:菌落就是在固体培养基上(内)以母细胞为中心的一堆肉眼可见的,有一定形态、构造等特征的子细胞集团。8.异形胞:异形胞是存在于丝状体蓝细菌中的较营养细胞 稍大,色浅、壁厚、位于细胞链中间或末端,且数 目少而不定的细胞。 异形胞是固氮蓝细菌的 固氮 部位。9.原体 (elementary body,EB):宿主细胞外的形态具有感染力,它是一种不能运动的球状细胞,直径小于0.40.4mm,有坚韧的细菌型细胞壁。10.始体
3、,又称网状体(reticulate body, RB)这是一种薄壁的球状细胞,形体较大,无感染力的个体。11.单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。12.酵母纤维素:它呈三明治状外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖,都是分支状聚合物,中间夹着一层蛋白质(包括各种酶,如葡聚糖酶、甘露聚糖酶等)。13.生长因子:一类对微生物正常代谢必不可少且又不能从简单的碳源,氮源自行合成的、所需极微量的有机物。14.主动运送:指一类须提供能量(包括ATP、质子动力或离子“泵”等)并通过细胞膜上特异性载体蛋白构象的变化,使膜外环境中低浓度的溶质运送入膜内的一种运送方式。15.基团
4、移位:指一类既需特异性载体蛋白参与,又需耗能的一种物质运送方式,溶质在运送前后还会发生分子结构的变化,不同于一般的主动运送。16.水活度(aw):在天然环境中,微生物可实际利用的自由水:或游离水含量。17.组合培养基:是一类用多种高纯化学试剂配制的、各成分(包含微量元素)的量都确切知道的培养基。18.选择性培养基:根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。19.鉴别性培养基:加有能与某一菌的无色代谢产物发生反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基。EMP途径:又称糖酵解途径或己糖二磷酸途径,是绝大多数生物所共有的一条主流代谢途径。它是
5、以1分子葡萄糖为底物,约经10步反应而产生2分子丙酮酸、2分子NADH+H和2分子ATP的过程。21.ED途径:ED途径可不依赖于EMP和HMP途径而单独存在,是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径,葡萄糖只经过4步反应即可快速获得丙酮酸。22.细菌酒精发酵:经ED途径发酵生产乙醇的方法。无氧呼吸:又称厌氧呼吸,是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(少数为有机氧化物)的生物氧化。硝酸盐呼吸(反硝化作用):即硝酸盐还原作用以硝酸盐作为最终电子受体的呼吸过程。25.延胡索酸呼吸:延胡索酸琥珀酸+ 1 ATP 由兼性厌氧菌、厌氧菌进行26.发酵:在生物氧化中(狭义)发酵是指无氧等外源氢受
6、体的条件下,底物脱氢后所产生的还原力H不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物,以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。27.同型乙醇发酵:产物中仅有乙醇一种有机物分子的酒精发酵28.同型乳酸发酵:在糖的发酵中,产物只有乳酸的发酵称为同型乳酸发酵29.异型乳酸发酵:通过HMP途径发酵后除主要产生乳酸外,还产生乙醇、乙酸和CO2等多种产物的发酵。30.异型酒精发酵与异性乳酸发酵一样。31.Stickland 反应 :以一种氨基酸作底物脱氢(即氢供体),而以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型。32.循环光合磷酸化:一种存在于厌氧性光合细菌中的原始光合作用机制,在光
7、能驱动下通过电子的循环式传递而完成磷酸化产能反应。33.非循环光合磷酸化:这是各种绿色植物、藻类和蓝细菌所共有的利用光能产生ATP的磷酸化反应。a.电子传递非循环式;b.在有氧的条件下进行;c.存在两个光合系统;d.ATP、还原力、O2同时产生e.还原力中的H来自于水分子的光解产物34.自生固氮菌:指一类不依赖与其他种生物共生而能独立进行固氮的微生物。35.共生固氮菌:指必须与其他种生物共生在一起时才能进行固氮的微生物。36.“Park”核苷酸:即UDP-N-乙酰胞壁酸五肽,合成肽聚糖单体。37.cfu(菌落形成单位):把稀释后的一定量菌样通过浇注琼脂培养基或在琼脂平板上涂布的方法,让其内的微
8、生物单细胞一一分散在琼脂平板上(内),待培养后,每一活细胞就形成一个单菌落,此即“菌落形成单位”。38.同步生长:就是指在培养物中所有微生物细胞都处于同一生长阶段,并都能同时分裂的生长方式。39.典型生长曲线:定量描述液体培养中单细胞微生物群体生长规律的实验曲线。40.延滞期:又称停滞期、调整期或适应期。指少量单细胞微生物接种到新鲜培养液中后,在开始培养的一段时间内,因代谢系统适应新环境的需要,细胞数目没有增加的一段时期。41.指数期:又称对数期,指在生长曲线中,紧接着延滞期的一段细胞数以几何数增长的时期。42.生长限制因子:凡处于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的某营养物。43.连续培
9、养:在一个恒容积的流动系统中培养微生物,一方面以一定速率不断地加入新的培养基,另一方面又以同样的流速不断流出培养物(菌体和代谢产物),以使培养系统中的细胞数量和营养状态保持恒定,即处于稳态。44.单批培养:指将微生物置于一恒定容积的培养基中,经过培养生长,最后一次收获的培养方式。45.恒浊器:是根据培养液细胞密度调节培养液流入的速率,使装置内细胞密度保持恒定。细胞密度通过光电控制系统调节。46.恒化器:通过控制某种限制性营养物质(生长限制因子)的浓度调节微生物的生长及其细胞密度,使装置内营养物质浓度恒定。47.连续发酵:连续培养如用于生产实践,就称为连续发酵。48.高密度培养:又称高密度发酵,
10、指微生物在液体培养中 细胞群体密度超过常规培养 10倍以上时的生长状态或培养技术。49.灭菌:凡是能够杀死或消除材料或物体上全部微生物的方法。50.消毒:能够杀死、消除或降低材料或物体上的病原微生物,使之不致引起疾病的方法。51.防腐:能够防止或抑制微生物生长,但不能杀死微生物群体的方法。52.化疗:利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病原微生物或病变细胞的治疗措施称为化疗。53.巴氏消毒法:一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温湿热消毒法。54.间歇灭菌法:将待灭菌物品于常压下加热至100 处理 15 60min ,杀死其中营养细胞。冷却后37保温
11、过夜, 使其中残存芽孢萌发成营养细胞,第二天再以同样 的方式加热处理,反复三次,可杀灭所有的芽孢和 营养细胞,达到灭菌目的。适用于一些 不耐高温的培养基、营养物 等的灭菌。 55.加压蒸汽灭菌法:将待灭菌的微生物放置在有少量水的加压蒸汽灭菌锅内。将锅内的水加热煮沸,并将其中的空气彻底驱尽后将锅封闭。再持续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升,从而使温度达1000C以上进行灭菌。56.连续加压蒸汽灭菌法:让培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却,然后流进发酵罐。培养基一般加热至135140下维持515s。仅用于大型发酵厂的大批量培养基的灭菌。57.梅拉特反应:在高温作用下,溶液中氨基化合物(氨基
12、酸、肽、蛋白质等)中的游离氨基与羰基化合物(糖类)中的羰基相互反应而产生深褐色产物的复杂反应。58.过滤除菌法:用各种滤器对培养液中某些不耐热的成分除菌。59.表面消毒剂:是指对一切活细胞、病毒粒和生物大分子都有毒性,不能用作活细胞或机体内治疗用的化学药剂。60.石炭酸系数:在一定时间(10min)内,被试药剂能杀死)全部供试菌(伤寒沙门氏菌)的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最高稀释度之比。61.抗代谢药物:是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似,并可干扰正常代谢活动的化学物质。62.抗生素:抗生素是一类由微生物或其它生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物,它们在很低浓度
13、时就能抑制或干扰它种生物(包括病原菌、病毒、癌细胞等)的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂。63.生物药物素:一类比抗生素疗效更为广泛的生理活性产物,如酶抑制剂等微生物的其他次生代谢物,为与抗生素相区分,就把这类具有多种生理活性的微生物次生代谢物称做生物药物素。64.F质粒:又称F因子、致育因子,是大肠杆菌等细菌决定性别并有转移能力的质粒。65.营养缺陷型:某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力,因而无法在基本培养基(MM)上正常生长繁殖的变异类型,称为营养缺陷型,它们可在加有相应营养物质的基本培养基平板上选出。66.艾姆斯试验:利用细菌营养缺陷型的回复
14、突变来检测环境 或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效的方法。67. 基本培养基(MM,符号为-):是指仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需的最低成分的合成培养基。68.完全培养基(CM,符号为+):是指可满足某种微生物的一切营养缺陷型菌株的营养需要的天然或半合成培养基。69.转化:受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段,通过交换将其整合到自己的基因组中,从而获得了供体菌部分遗传性状的现象称为转化。70.转导:通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象,称为转导。71.普遍转导:通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段
15、DNA进行“误包”,而将其遗传性状传递给受体菌的现象,称为普遍转导。72.局限转导:局限性转导指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基因组整合、重组,形成转导子的现象。73.接合:供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触,把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者,使后者获得若干新遗传性状的现象,称为接合。74.高频重组(Hfr)菌株:有些大肠杆菌的F因子可与核染色体整合在一起,这种类型的菌株与F-菌株接合的重组频率比F+与F-菌株接合的重组频率高几百倍以上,因此,常将其称为高频重组(Hfr)菌株。75.F菌株:Hfr菌株中的F因子有时可由不正常的切割而带有
16、一小段核染色体基因的杂合F因子,通常称为F因子。76.原生质体融合:通过人为的方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程,称为原生质体融合。77.非特异性免疫:凡在生物长期进化过程中形成,属于先天即有、相对稳定、无特殊针对性的对付病原体的天然抵抗能力,称为非特异性免疫。78.炎症:是机体对病原体的侵入或其他损伤的一种保护性反应,在相应部位出现红、肿、热、痛和功能障碍,是炎症的五大病理性特征。炎症既是一种病理过程,又是一种防御病原体入侵的免疫反应。79.细胞免疫:指机体在抗原刺激下,一类小淋巴细胞(依赖胸腺的T细胞)发生增殖、分化,进而直接攻击靶
17、细胞或间接地释放一些淋巴因子的免疫作用。80.体液免疫:指机体受抗原刺激后,来源于骨髓的一类小淋巴细胞(B细胞)进行增殖并分化为浆细胞,由它合成抗体并释放到体液中以发挥其免疫作用。81.抗原:刺激机体发生免疫应答,并能与之(应答产物)发生反应的一类物质。82.免疫原性:诱导产生抗体或致敏淋巴细胞的能力。83.免疫反应性:与抗体或致敏细胞发生特异性反应的能力。84.抗体:浆细胞产生的一类与其能相应抗原发生特性结合的免疫球蛋白。85.初次免疫应答:指首次用适量抗原注射动物后,须经一段较长的潜伏期即待免疫活性细胞进行增殖、分化后,才能在血流中检出抗体,这种抗体多为IgM,滴度低,维持时间短,且很快会
18、下降。86.再次免疫应答:指初次应答后的抗体下降期再次注射同种抗原进行免疫时,会出现一个潜伏期明显缩短、抗体以IgG为主、滴度高、维持时间长的阶段。87.生物制品:在人工免疫中,可作为预防、治疗和诊断用的来自生物体的各种制剂,都称为生物制品。88、F质粒:又称F因子,致育因子或性因子,是大肠杆菌等细菌决定性别并有转移能力的质粒。89、营养缺陷型:某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸等能力,因而不能再在基本培养基(MM)上正常生长繁殖的变异类型,称为营养缺陷型。90、艾姆斯实验:是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效方法
19、。91、基本培养基:(MM,-)仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需的最低成分的组合培养基,称为基本培养基。92、完全培养基:(CM,+)凡能满足某微生物一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基,称为完全培养基。93、转化:受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象,称为转化和转化作用。94、转导:通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞中的小片段DNA携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象,称为转导。95、局限转导:指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基因组整合、重组,形成局限转导子的现象。96、接合:供体菌(
20、“雄性”)通过性菌毛与受体菌(“雌性”)直接接触,把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者,使后者获得若干遗传性状的现象,称为接合。97、Hfr菌株:有些大肠杆菌的F因子可与核染色体整合在一起,这种类型的菌株与F-菌株接合的重组频率比F+与F-菌株接合的重组频率高几百倍以上,因此,常将其称为高频重组(Hfr)菌株。98、F'菌株:当Hfr菌株细胞内的F质粒因不正常切离而脱离核染色体组时,可重新形成游离的、但携带整合位点临近一小段核染色体基因的特殊F质粒,称F质粒或F'因子。凡携带F'质粒的菌株,称为初生F'菌株,其遗传性状介于F+与Hfr菌株之间;通过
21、F'菌株的接合,可使后者也成为F'菌株,这就是次生F'菌株。99、原生质体融合:通过人为的方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程,称为原生质体融合。第1章第2章 原核生物的形态、构造和功能1、 试对细菌细胞的一般构造和特殊构造设计一简明的表解答:一般构造:(1)、细胞壁:主要成分是肽聚糖(肽和聚糖,肽聚糖单体:、四肽尾,由四个氨基酸分子按L型与D型交替方式连接而成,接在N-乙酰胞壁酸上。、双糖单位:N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸通过-1,4糖苷键连接,溶菌酶水解此键。、肽桥:甘氨酸五肽,肽桥变化甚多,由此形成了“肽聚
22、糖的多样性”);磷壁酸是革兰氏阳性菌的特有成分,(主要成分是甘油磷酸或核糖醇磷酸),是噬菌体的特异性吸附受体;外膜是革兰氏阴性菌的特有结构(位于壁的最外层,成分:脂多糖(类脂A:是革兰氏阴性菌致病物质内毒素的物质基础,是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体;核心多糖;O-特异侧链);磷脂和若干外膜蛋白)(2)、细胞膜:通过质壁分离、鉴别性染色或原生质体破裂等方法可在光镜下观察到,电镜-超薄切片;组成细胞膜的主要成分是磷脂;液态镶嵌模型;膜上有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的酶系,形成质子动势,是鞭毛基体的着生部位,提供鞭毛旋转运动所需的能量;原核生物的细胞膜上一般不含甾醇(支原体除外),真核生
23、物细胞膜上都含有甾醇。(3)、包含体:(4)、核区:核质体,指原核生物所特有的无核膜包裹、无固定形态的原始细胞核。(5)、间体:由细胞膜內褶而形成的囊状结构(6)、细胞质:原核生物的细胞质是不流动的,真核生物是流动的(7)、细胞内含物:贮藏物:碳源及能源类:糖原,聚-羟丁酸(PHB),硫粒;氮源类:藻青素,藻青蛋白,(蓝细菌);磷源(异染粒)磁小体:具有导向功能 羧酶体:是自养细菌CO2固定的场所(硝化细菌、蓝细菌)气泡:调节细胞相对密度,多见于蓝细菌特殊构造:(1) 、糖被:成分一般是多糖,少数是蛋白质或多肽,也有多肽与多糖复合型。分为荚膜、微荚膜、黏液层和菌胶团;细菌间的信息识别。(2)
24、、鞭毛:生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物。由基体、钩形鞘和鞭毛丝3部分组成,革兰氏阳性菌和阴性菌有区别。鞭毛的生长是靠其顶部延伸而非基部延伸。生理功能是运动,是原核生物实现其趋性(趋化性、趋光性、趋氧性、趋磁性)的最有效方式;运动机制:逆向思维“拴菌”试验肯定了旋转论。鞭毛最多的是杆菌。(3) 、菌毛:多存在于革兰氏阴性菌致病菌中,参与菌体附着于宿主粘膜上皮细胞上,吸附功能。(4) 、性菌毛:参与细菌结合作用,传递遗传物质。(5) 、芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性最强的休眠结构而非繁殖结构。抗逆性最强:肉毒梭菌的芽孢在沸水中5.
25、09.5h才被杀死,121也要平均10分钟杀死。能产芽孢的主要是革兰氏阳性菌的两个属-芽孢杆菌属和厌氧性的梭菌属。能否产生芽孢是细菌种的特征。芽孢萌发的三个阶段:活化、出芽、生长。芽孢耐热机制:渗透调节皮层膨胀学说:DPA-Ca学说:芽孢皮层中含有营养细胞中所没有的DPA-Ca,它能稳定芽孢中的生物大分子,从而增强了押宝的耐热性。(耐热性:芽孢>孢子>营养体)(6) 、孢囊:固氮菌,抗干旱但不抗热的圆形休眠体(7) 、伴孢晶体:内毒素,苏云金芽孢杆菌(Bt)在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形,方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。制成生物农药(Bt细菌杀毒剂)。2、 试图视肽聚糖
26、单体的模式构造,并指出革兰氏阳性菌和阴性菌在肽聚糖的成分和结构上的差别答:阳性菌肽聚糖单体:、四肽尾,由四个氨基酸分子按L型与D型交替方式连接而成,接在N-乙酰胞壁酸上。、双糖单位:N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸通过-1,4糖苷键连接,溶菌酶水解此键。、肽桥:甘氨酸五肽,肽桥变化甚多,由此形成了“肽聚糖的多样性”。阴性菌肽聚糖单体:四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而是内消旋二氨基庚二酸(m-Ala只存在于原核生物细胞壁上)所代替,没有特殊的肽桥。革兰氏阳性菌:厚,层次多,致密的网套,机械强度高;革兰氏阴性菌:薄,一般单层,片层状,机械强度较差。3、 试述革兰氏染色的机制答:革兰氏阳性菌
27、由于细胞壁较厚,肽聚糖含量较高和交联紧密,用乙醇洗脱时,肽聚糖层网孔会因脱水而明显收缩,且革兰氏阳性菌细胞壁基本上不含类脂,故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙,因此,结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内,使其呈现蓝紫色。革兰氏阴性菌细胞壁薄,肽聚糖含量低,交联松散,乙醇脱色时,肽聚糖层网孔不易收缩,加之其类脂含量高,所以当乙醇脱色将类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大的缝,这样结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁。因此,通过乙醇脱色,细胞又呈现无色。经番红等红色染料等复染,就使革兰氏阴性菌获得了新的颜色-红色,而革兰氏阳性菌则仍呈蓝紫色(实为紫中带红)。4、 何谓“拴菌”试验?他的创新思维在何处?答
28、:“拴菌”试验:把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固的“拴”在载玻片上,然后在光镜下观察该细胞的行为,结果发现,该菌只能在载玻片上不断打转而未做伸缩“挥动”,因而肯定了“旋转论”的正确性。通过“逆向思维”第2章 真核微生物的形态、构造和功能1、 试列表比较真核生物和原核生物的10个主要区别比较项目真核生物原核生物 细胞大小较大(通常直径>2um)较小(通常直径<2um)(差10倍左右) 若有壁,其主要成分纤维素、几丁质等多数为肽聚糖 细胞膜中甾醇有无(除支原体外) 细胞器有无 鞭毛结构如有,则粗而复杂(9+2型)如有,则细而简单 (细胞质)核糖体80S(指细胞质中核糖体)线粒体等细胞
29、器中核糖体为70S70S (细胞核)核膜有无(生理特性)氧化磷酸化部位线粒体细胞膜 鞭毛运动方式挥鞭式旋转式 繁殖方式有性、无性等多种一般为无性繁殖(二分裂)2、 试对酵母菌的繁殖方式做一表解(1) 无性繁殖1、 芽殖最常见的繁殖方式,在良好的营养和生长条件下,酵母菌生长迅速,几乎所有的细胞上都长出芽体(芽孢子)。藕节状的细胞串称为假菌丝,竹节状的细胞串称为真菌丝。形成过程:先在母细胞将要形成芽体的部位,通过水解酶的作用使细胞壁变薄,大量新细胞物质包括核物质在内的细胞质堆积在芽体的起始部位,待逐步长大后,就在母细胞的交界处形成一块由葡聚糖、甘露聚糖和几丁质组成的隔壁。成熟后,两者分离,于是在母
30、细胞上留下一个芽痕,而在子细胞上留下一个蒂痕。任何细胞上的蒂痕仅有一个,而芽痕有多个。2、 裂殖二分裂3、 产生无性孢子肾形的掷孢子如果用倒置培养皿培养掷孢酵母,待其菌形成菌落后,可在皿盖上见到由射出的掷孢子组成的模糊菌落“镜像”。有厚垣孢子、节孢子(2) 有性繁殖形成子囊和子囊孢子,质配、核配、减数分裂3、 试图示酿酒酵母的生活史,并对其中各主要过程做一简述答:子囊孢子在合适的条件下发芽产生单倍体营养细胞;单倍体营养细胞不断地进行出芽繁殖;两个性别不同的营养细胞彼此结合,在质配后即发生核配,形成二倍体营养细胞;二倍体营养细胞不进行核分裂,而是不断进行出芽繁殖;在以醋酸盐为唯一或主要碳源,同时
31、又缺乏氮源等特定条件下,二倍体营养细胞最易转变成子囊,这时细胞核才进行减数分裂,并随即形成4个子囊孢子;子囊经自然或人为破壁(蜗牛消化酶)后,可释放出其中的子囊孢子。特点:营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在。4、 试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造,并简要说明它们的功能答:特化的营养菌丝:吸取养料:假根:具有固着和吸取养料的功能吸器:专性寄生的真菌所产生。只在宿主细胞间隙间蔓延的营养菌丝上分化出来的短枝。吸取宿主细胞内的养料而不使其致死。附着:附着胞:借附着胞牢固的粘附在宿主的表面附着枝:休眠(或休眠及延伸):菌核:休眠菌丝组织,表面颜色黑或暗,颗粒状。贮藏养料,
32、抵抗逆境菌索:具有延伸和生长能力,能够吸收营养。延伸:匍匐枝:具有延伸功能,如有菌丝,就不会形成像在其它真菌中常见的那样有固定大小和形态的菌落。如:根霉捕食线虫:菌环、菌网特化的气生菌丝:(各种子实体)简单:无性:分生孢子头、孢子囊有性:担子复杂:无性:分生孢子器、分生孢子座有性(子囊果):闭囊壳、子囊壳、子囊盘5、 试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特征 微生物类型菌落特征单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主 要 特 征菌落含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观形态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而紧密细胞相互关系单个分散或有一定排列方式单个分散或假丝状丝状交
33、织丝状交织形态特征小而均匀,个别有芽孢大而分化细而均匀粗而分化参 考 特 征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色十分多样十分多样细胞生长速度一般很快(37ºC,24h)较快(28/30 ºC,3天)慢一般较快(一星期)6、 试列表比较细菌、放线菌、酵母菌、霉菌细胞壁成分的异同,并提出制备相应原生质体的酶或试剂答:细胞壁成分:细菌:主要成分是肽聚糖。细菌分为G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量较高,而G-不含磷壁酸;G+类脂质一般无,而G-含量较高;G
34、+不含蛋白质,G-含量较高放线菌:G-,其细胞壁具有G-所具有的特点,含有丙氨酸、谷氨酸、氨基葡萄糖、胞壁酸酵母菌和霉菌为真菌酵母菌:细胞壁主要成分是多糖,由外到内为:甘露聚糖,蛋白质,葡聚糖。霉菌:细胞壁成分为几丁质、纤维素制备原生质体的酶或试剂:细菌:G+:青霉素、溶菌酶;G-:EDTA鳌合剂,溶菌酶放线菌:青霉素,溶菌酶酵母菌:蜗牛消化酶霉菌:纤维素酶第三章 病毒和亚病毒因子1、病毒粒有哪几种对称体制?各种对称体制又有几种特殊外形?试各举一例2、什么是烈性噬菌体?试简述其裂解性增值周期答:定义:能在宿主细菌细胞内增殖,产生大量子代噬菌体,并通过裂解细菌细胞而释放出来的噬菌体,被称为烈性噬
35、菌体。大肠杆菌的T偶数噬菌体是典型的烈性噬菌体裂解性增值周期:吸附、侵入、增殖、成熟(装配)、裂解(释放)吸附:尾丝与特异性受体接触后,吸附在受体上,通过刺突、基板固定于细胞表面;(宿主细胞表面的特异性受体:G+磷壁酸,G-脂多糖)侵入:尾管所携带的溶菌酶把细胞壁上的肽聚糖水解,将核酸注入宿主细胞内;增殖:包括核酸的复制和蛋白质的合成;成熟:把合成好的“部件”进行自我装配;裂解:在脂肪酶和溶菌酶的作用下,促使细胞裂解。3、简述用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的基本原理和主要操作步骤答:原理:噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。效价的测定一般采用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细
36、菌的琼脂平板上,一般一个噬菌体产生一个噬菌斑,故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数,计算出噬菌体的效价。此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致,且清晰度高,故计数比较准确,因而被广泛使用。主要操作步骤:预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基(2%)在培养皿上浇一层平板(7-8mL),待凝固后,再把预先融化并冷却到45ºC以下,加有较浓的敏感宿主(指数期的宿主菌悬液0.2mL)和一定体积待测噬菌体样品(0.1mL)的上层培养基,在试管中摇匀后,立即倒在底层培养基(1%,3mL)上铺平待凝,然后在37ºC下保温。一般经十余小时后即可对噬菌斑
37、计数。优点:加了底层培养后,可弥补培养皿底部不平的缺陷;可使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上,因而,大小一致,边缘清晰且无重叠现象;因上层培养基中琼脂较稀,故可形成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。注意:用双层平板法计算出来的噬菌斑效价总是比电镜直接计数得到的效价低。4、何谓一步生长曲线?它分几期,各期有何特点?答:定义:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,称作一步生长曲线。分为:潜伏期、裂解期、平稳期潜伏期:噬菌体的核酸侵入宿主细胞后至第一个成熟噬菌体粒子释放前的一段时间。分为隐晦期(人为地裂解宿主细胞后,裂解液无侵染性)和胞内累积期(人为地裂解细胞后,其裂解液已呈现侵染性)
38、。裂解期:宿主细胞迅速裂解,溶液中噬菌体粒子急剧增多的一段时间。由于宿主群体中各个细胞的裂解不可能是同步的,因而出现了较长的裂解期。平稳期:指感染后的宿主细胞以全部裂解,溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。5、什么是溶源菌,有何特点?如何检出溶源菌?答:定义:溶源菌:是一类被温和噬菌体感染后能相互长期共存,一般不会出现迅速裂解的宿主细胞。溶源性的特点:稳定性:溶源菌通常很稳定;溶源性转变:噬菌体DNA整合到宿主核基因组中而改变了宿主的基因型,使宿主某些性状发生改变,称溶源性改变;免疫作用:前噬菌体基因还导致溶源性细菌对同类型噬菌体的侵染具有免疫作用,阻止携带与溶源性菌体所含的前噬菌体DNA相同的
39、噬菌体的吸附和生物合成;裂解:溶源菌中少数前噬菌体自发脱离宿主细胞染色体进行增殖,导致细胞裂解。这种现象称为溶源菌的自发裂解;复愈:溶源性是可逆的,前噬菌体可以自发的或在外界刺激诱导下被激活,裂解宿主细胞,进入裂解途径。检出溶源菌:将少量溶源菌与大量的敏感性指示菌(遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体会发生裂解循环者)相混合,然后与琼脂培养基混匀后倒一个平板,经培养后,溶源菌就一一长成菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会引起自发裂解,其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌菌落周围的指示菌菌苔,于是就形成了一个个中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈围着的这种独特噬菌斑。6、某微生物发酵厂的发酵液和发
40、酵状态出现疑似感染有噬菌体的异常情况,试讨论这些异常现象有哪些?并设计一个简便易行的方法去证明答:现象:轻则引起发酵周期延长、发酵液变清和发酵产物难以形成等事故,重则造成倒罐、停产甚至危及共厂命运。证明:用发酵的纯菌做两组平板(都要那种长成菌苔的),其中一组加入合适溶度的发酵液,另一组加入同溶度的新鲜培养基或未染噬菌体的发酵液,培养一段时间后观察,若出现空白斑,则为有噬菌体。7、如何防止噬菌体对发酵工业的危害答:确立防重于治的观念,例如绝不使用可疑菌种(避免使用溶源菌),严格保持环境卫生,决不任意丢弃和排放有生产菌种的菌液,注意通气质量,加强发酵罐和管道灭菌,不断筛选抗噬菌体菌种,经常轮换生产
41、菌种,以及严格会客制度等。第四章 微生物的营养和培养基1、试对能源为主、碳源为辅对微生物的营养方式进行分类,并举例说明之。答: 有机物:化能异养微生物(绝大多数原核 化学物质(化能营养性) 生物,全部真菌和原生生物) 无机物:化能自养微生物(硝化细菌、能源 硫化细菌、氢细菌) 光能自养微生物(蓝细菌、紫硫细菌、藻类) 辐射能(光能营养型)光能异样微生物(红螺菌科的细菌)2、试述通过基团转移运送营养物质的机制答:定义:基团移位指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式,其特点是溶质在运送前后会发生分子结构的改变。广泛存在于原核生物中。主要用于运送各种糖类、核苷酸、丁酸、腺嘌呤等物
42、质,特点是每输入一份子葡萄糖分子就需要消耗一个ATP的能量。机制:在大肠杆菌中,主要靠磷酸转移酶系统(PTS)即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统。(1)热稳载体蛋白(HPr)的激活:细胞内的高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸的磷酸基团通过酶I的作用把HPr激活;(2)糖经磷酸化而进入细胞内:膜外环境中的糖分子先与细胞膜外表面上的底物特异蛋白酶IIc结合,接着糖分子被由PHPr酶IIa酶IIb逐级传递来的磷酸基团激活,最后通过酶IIc再把这一磷酸糖释放到细胞质中。3、什么是选择性培养基?试举一例并分析其中为何有选择功能答:根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。加富性
43、选择培养基投其所好;抑制性选择培养基取其所抗甘露醇可富集自生固氮菌,纤维素可富集纤维分解菌;石蜡油可富集分解石油的微生物,较浓的糖液可用来富集酵母菌;酵母菌富集培养基;Ashby无氮培养基(富集好氧性自生固氮菌);Martin培养基(富集土壤真菌用);含糖酵母膏培养基4、什么叫鉴别性培养基?试以EMB为例分析其具有鉴别性功能的原因一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基,即EMB培养基。EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌。
44、在低酸度下,这两种染料会结合并形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。因此,试样中多种肠道细菌会在EMB培养基平板上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落,尤其是E.coli,因其能强烈分解乳糖而产生大量混合酸,菌体表面带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,故使菌落染上深紫色,且从菌落表面看到绿色金属闪光(似金龟子色)。产酸弱的菌株的菌落呈棕色,不发酵乳糖的菌落无色透明。第五章 微生物的新陈代谢生物氧化的形式包括某物质与氧结合、脱氢和失去电子3种;生物氧化的过程可分为脱氢(或电子)、递氢(或电子)和受氢(或电子)3个阶段;生物氧化的功能有产能(ATP)、产还原力H和产小分子中间代谢物3种;而生
45、物氧化的类型则包括呼吸、无氧呼吸和发酵3种。1、在化能异养微生物的生物氧化化过程中,其基质的脱氢和产能的途径主要有几条?试列表比较各途径的主要特点答:比较项目特点EMP途径(糖酵解途径、己糖二磷酸途径)产生ATP和NADH2形式的还原力;通过逆向反应可进行多糖合成;与乙醇、乳酸、甘油、丙酮、和丁酸的发酵生产有关。基本代谢途径,厌氧条件下进行,产能效率低,提供多种中间代谢产物HMP途径(己糖一磷酸途径、戊糖磷酸途径、磷酸葡萄糖酸途径)不经EMP途径和TCA循环而得到彻底氧化,无ATP生成;产生大量的还原力NADPH2;产生各种长度不同的中间代谢物(37糖);单独HMP途径少,一般与EMP途径共存
46、;是戊糖代谢的主要途径ED途径(2-酮-3-脱氧-6磷酸葡糖酸(KDPG)途径)可不依赖于EMP途径和HMP途径单独存在,是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径;关键中间代谢物2-酮-3-脱氧-6磷酸葡糖酸(KDPG)裂解为丙酮酸和3-磷酸甘油醛;特征酶:KDPG醛缩酶;一分子葡萄糖经4步反应生成2分子的丙酮酸,一分子来源于KDPG裂解直接产生,另一分子由3-磷酸甘油醛经EMP途径转化而来;步骤简单,产能效率低,只产生1分子的ATP;好氧时,与TCA循环相连,厌氧时进行乙醇发酵。TCA循环(三羧酸循环、Krebs循环、柠檬酸循环)必须在有氧条件下进行;产能效率极高;为糖、脂、蛋白质三大
47、物质转化中心枢纽2、试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性极其与人类生产实践的关系答:生理功能:(1)供应ATP和NADH2形式的还原力;(2)是连接TCA循环、HMP、EMP途径的桥梁;(3)为生物合成提供多种中间代谢物;(4)通过逆向反映可进行多糖合成;人类生产实践:与乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁酸等的发酵密切相关3、试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性,并说出它与人类生产实践的关系答:(1)供应原料:为核酸、核苷酸等提供戊糖磷酸;赤藓糖-4-磷酸是合成芳香族、杂环族氨基酸的原料;(2)产还原力:NADPH2,;(3)作为固定CO2的中介;(4)扩大碳源利用范围C3-C7;(5)连接E
48、MP途径;(6)提供多种重要的发酵产物;(7)在总的能量代谢中占一定比例。4、试述ED途径在微生物生命活动中的重要性,并说出它与人类生产实践的关系答:替代EMP途径,可与EMP、HMP、TCA连接,可进行细菌酒精发酵以产生酒精;关系:优点:用ED途径发酵生产乙醇,代谢速率高,产能转化率高,菌体生成少,代谢副产物少,发酵温度较高,不必定期供氧;缺点:PH较高(约5),较易染菌,细菌对乙醇耐受力低。5、试列表比较呼吸、无氧呼吸和发酵的特点比较项目呼吸无氧呼吸发酵递氢体呼吸链(电子传递链)呼吸链(电子传递链)无氢受体O2无机或有机氧化物(NO3-,SO4 2-,或琥珀酸)中间代谢物(乙醛,丙酮酸等)
49、终产物H2O还原后的无机或有机氧化物还原后的中间代谢物(乙醇,乳酸等)产能机制氧化磷酸化氧化磷酸化底物水平磷酸化产能效率高中低6、试列表比较同型乳酸发酵和异型乳酸发酵的差别类型途径产物/1葡萄糖产能/1葡萄糖菌种代表同型EMP2乳糖2ATP德氏乳杆菌异型HMP1乳糖1乙醇1CO21ATP肠膜明串珠菌发酵乳杆菌1乳酸1乙酸1CO22ATP短乳杆菌1乳酸1.5乙酸2.5ATP两歧双歧杆菌7、试列表比较细菌酒精发酵和酵母菌酒精发酵的特点和优缺点 种类项目酵母菌酒精发酵细菌酒精发酵同型酒精发酵同型酒精发酵异性酒精发酵途径EMP途径ED途径HMP途径的PK途径代表菌酿酒酵母假单胞菌肠膜明串珠菌反应式G+
50、2ADP+2Pi2乙醇+2CO2+2ATPG+ADP+Pi2乙醇+2CO2+ATPG+ADP+Pi乳酸+乙醇+CO2+ATP优点产能较高适宜高浓度的葡萄糖,吸收葡萄糖速度较酵母菌快,生长过程完全不要氧气产生酒精的同时产生乳酸缺点不适宜高浓度的葡萄糖发酵底物局限于葡萄糖、果糖、蔗糖该途径不能单独存在8、在化能自养细菌中,亚硝化细菌和硝化细菌是如何获得其生命活动所需的ATP和H的?答:亚硝化细菌是通过氧化无机底物氨根离子获得ATP和还原力H的,氨的氧化必须有氧气参与,氧化作用的第一步是由氨单加酶催化成羟氨,接着由羟氢氧化还原酶将羟氨氧化为亚硝酸。ATP是第二步中通过细胞色素系统进行的电子转移磷酸化
51、形成的。硝化细菌是通过亚硝酸氧化酶系统催化氧化亚硝酸得能量的,亚硝酸根离子氧化为硝酸根离子的过程中,氧来自水分子而非空气,产生的质子和电子从与其氧化还原电位相当细胞色素进入呼吸链,顺着呼吸链传递给氧,产生ATP,而还原力H则是通过质子和电子的逆呼吸。9、能进行循环光合磷酸化的光合细菌有哪几个代表属?其分类地位如何?答:具有循环光合磷酸化的生物,分别属于原核生物细菌域不同门中的光合细菌。他们都是厌氧菌,被分在绿屈挠菌门(绿屈挠菌属)、绿菌门(绿菌属)和变形细菌门(红螺菌属、红假单胞菌属、着色菌属、外硫红螺菌属)中。特点是进行不产氧光合作用,即不能利用H2O作为还原CO2时的氢供体,而能利用还原态
52、无机物(H2S,H2)或有机物作还原CO2的氢供体。10、 试图示不产氧光合细菌所特有的循环光合磷酸化反应途径特点:a.光驱试下,电子自菌绿素上逐出后,经过类似呼吸链的循环又回到菌绿素;b.ATP和还原力H分别进行;c.还原力来自H2S等无机物;d.不产氧(O2)11、试图示产氧光合细菌和其它绿色植物所特有的非循环光合磷酸化的生化途径A.电子传递非循环式;B.在有氧条件下进行;C.存在两个光合系统(PSI和PSII);D.ATP(产自PSII)、还原力(产自PSI)、 O2(产自PSII)同时产生;E. 还原力中的H来自于水分子的光解产物。12、试图示目前所认识的生物固氮生化途径13、试列表比
53、较固氮酶两个组分的特点比较项目固二氮酶固二氮酶还原酶蛋白亚基数4(2大2小)2(相同)功能络合、活化和还原N2传递电子到组分I上对O2敏感性较敏感极敏感14、试简述各种类型好氧性固氮菌保护固氮酶避免受氧损害的机制答:1、好氧性自生固氮菌的抗氧保护机制(1) 呼吸保护 (2)构想保护2、蓝细菌固氮酶的抗氧保护机制(1)分化出特殊的还原性异形胞 (2)非异形胞蓝细菌固氮酶的保护3、豆科植物根瘤菌固氮酶的抗氧保护机制 豆血红蛋白(含铁蛋白)15、青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌?其抑制机制如何?答:青霉素的作用机制是抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成,因此对处于生长繁殖旺盛阶段的细菌具有明显的抑制作用,
54、相反,对处于生长停滞状态的休止细胞,却无抑制作用。 16、微生物的代谢调节在发酵工业中有何重要意义?试举一例说明答: 微生物代谢调节包括粗调:酶合成调节;细调:酶活力调节代谢调节是指在代谢途径水平上对酶活性的调节和在基因调控水平上对酶合成的调节,目的是使微生物累积更多的为人类所需的有益代谢产物。第六章 微生物的生长及其控制1、平板菌落计数法有何优缺点?试对浇注平板法和涂布平板法做一比较答:平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布
55、于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含菌数。这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数。简易价廉,但花费时间较长,不能立刻知道结果;操作繁琐,且要求操作者技术熟练。涂布法:(培养基时固态的)适用于好氧微生物的菌落观察。 涂布法使用较多,但有时不均匀,菌落一般在表面。 倒平板法:(培养基一般温度较高,是液态的)适用于厌氧,兼性厌氧的微生物, 稀释倒平板法操作相对麻烦,不适合好氧和对热敏感的细菌培养。培养较长时间(48h)后,菌落特征才明显。2、延滞期有何特点?实践上如何缩短它?答:(1)生长速率常数为零;细胞形态变大或增长;细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性;合成代谢十分活跃,易产生各种诱导酶;对外界各种不良条件如NaCl溶液浓度、温度和抗生素等理化因素反应敏感(2)接种龄:如果以指数期接种龄的种子接种,则子
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