桑螵蛸及其粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响

1、桑螵蛸及其粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响 作者：林璐璐， 牛长缨， 雷朝亮【摘要】 目的研究桑螵蛸及其粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响。方法用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型，分别观察桑螵蛸及其粗提物对小鼠的血糖、体重、饮水量以及一般状况的影响。结果与模型组相比较，桑螵蛸高、中、低剂量组都能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.01) ，改善其“三多一少”的糖尿病症状；桑螵蛸的石油醚提取物、水提物和醇提物均能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平，但石油醚提取物的作用最为显著（P<0.01），其次是水提物（P<0.05），醇提物的作用最不明显。结论桑螵蛸对

2、四氧嘧啶糖尿病小鼠具有良好的治疗作用，且其活性成分主要存在于石油醚提取物中。 【关键词】 桑螵蛸 粗提物 四氧嘧啶 小鼠 血糖Abstract:ObjectiveTo observe the effects of Ootheca Mantidis and its extracts on alloxan- induced diabetic mice. MethodsThe model of diabetic mice was induced by alloxan, and the effects of Ootheca Mantidis(OM) and its extracts on blood

3、sugar, weight, water-intake and general status were observed. Results(1)The high dose group, the middle dose group and the low dose group of OM all could decrease the blood sugar of mice induced by alloxan (P<0.01), symptoms such as polydipsia, diabetes and polyphagia abated. (2) Compared wit

4、h control groups, the water extract(P<0.05),the ethanol extract and the petroleum ether extract(P0.01) of OM all could decrease the blood sugar of mice induced by alloxan, but the effect of the ethanol extract was not obvious. ConclusionOotheca Mantidis has a good therapeutic effect on alloxa

5、n-induced-diabetic mice, and its active component mostly exists in the petroleum ether extract from Ootheca Mantidis.Key words:Ootheca Mantidis; Extracts; Alloxan; Mice; Blood sugar 我国中药典籍中所提到的“桑螵蛸”是用以入药的螳螂卵鞘的总称，它具有补肾壮阳、固精缩尿的作用，同时也是用敛精固涩法治疗糖尿病的复方中药中出现频率较高的一味动物药，它具有有效减少糖尿病人的尿量以及减少尿糖排出的作用，是临床药方中经常选用的一

6、味中药1。但桑螵蛸单方是否具有降低血糖的作用，国内尚未有这方面的研究报道。我们采用桑螵蛸及其粗提物对实验性糖尿病小鼠进行降血糖的研究,为桑螵蛸的研究、开发和临床应用提供理论参考。1 材料与仪器1.1 动物昆明种小鼠128只，体重1722 g，雄性，由湖北省疾病预防控制中心实验动物部提供。室温控制在2227，自由采食和饮水，小鼠饲料为普通优质饲料。1.2 试剂及仪器四氧嘧啶（美国Sigma 公司 0.5 g装）；葡萄糖测定试剂盒（上海名典生物工程有限公司,批号016M082）；达美康（天津华津制药厂，批号 H10910053）；752N型紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司) 。1.3

7、药材桑螵蛸，由湖北省同济堂药店提供。2 方法2.1 桑螵蛸对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响桑螵蛸用水煎煮后，过滤浓缩成1 g/ml的药液，放入4冰箱保存，待测时用蒸馏水稀释。 对46只小鼠腹腔注射四氧嘧啶(270 mg/kg) , 72 h后从空腹小鼠尾尖取血2测血糖水平，选用血糖水平在11.1 mmol /L以上3的小鼠37只，体重(19.8 ±0.8)g，随机分成糖尿病模型组(蒸馏水)，桑螵蛸低、中、高剂量处理组（83.3，416.7，833.3 mg/kg，分别是成人日服用量的1，5，10倍量，成人体重按60 kg计算）。另取10只正常小鼠作正常对照(蒸馏水)。各组分别灌胃给药，1次

8、/d，连续给药15 d。于末次给药后1 h取血测定血糖水平，给药前测定体重，连续给药15 d 后，测定体重和72 h内的饮水量用SPSS软件对结果进行方差分析，比较各处理组效果。2.2 桑螵蛸粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响桑螵蛸分别用水、95%的乙醇和石油醚提取，用水和95%的乙醇高温回流，过滤干燥后浓缩成浸膏，分别作为供试品1和2，用石油醚则过夜提取，待挥去石油醚后，残留物作为供试品3，放入4冰箱保存，待使用时用蒸馏水稀释。 将62只小鼠随机分成糖尿病模型组(蒸馏水)、桑螵蛸水提物处理组、醇提物处理组、醚提物处理组以及阳性药物对照组，腹腔注射四氧嘧啶(270 mg/kg) , 72 h后从

9、空腹小鼠尾静脉取血测血糖水平，选用血糖水平在11.2 mmol /L以上的小鼠51只，体重(21.0±0.5)g，另取10只正常小鼠做正常对照(蒸馏水)，分别灌胃给药（每天给予各提取物83.3 mg/kg，成人日服用量，给予正常对照组和糖尿病模型组相应量的蒸馏水，给予阳性对照组达美康9.6 mg/kg成人日服用量，体重按60 kg计算），1次/d，连续给药15 d。于末次给药后1 h取血测定血糖水平，给药前测定体重，连续给药15 d 后，测定体重和72 h内的饮水量。用SPSS软件对结果进行方差分析，比较各处理组效果。3 结果3.1 桑螵蛸对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响3.1.1 桑螵蛸

10、对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响与糖尿病模型组小鼠相比，桑螵蛸低、中、高剂量处理组小鼠血糖水平明显降低（P<0.01）。在血糖降低的绝对值方面，各剂量组与糖尿病模型组均存在显著差异（P<0.05），与正常对照组比较，各处理组降低小鼠血糖水平与正常对照小鼠有较小的差距，而此差距是随着桑螵蛸剂量的降低而逐渐加大的。见表1。表1 桑螵蛸的不同剂量对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响（略）与糖尿病模型组比较，*P<0.05，*P<0.013.1.2 桑螵蛸对四氧嘧啶糖尿病小鼠体重以及饮水量的影响结果显示，桑螵蛸低、中、高剂量处理组小鼠给药后的72 h饮水

11、量与糖尿病模型组相比差异极显著（P<0.01）；而在小鼠体重方面，与糖尿病模型组相比，桑螵蛸低、中、高剂量处理组小鼠平均体重均明显较低，其中低剂量处理组差异显著（P<0.05），中、高剂量处理组差异极显著（P<0.01）。结果见表2。表2 桑螵蛸的不同剂量对四氧嘧啶糖尿病小鼠的平均体重（略）与糖尿病模型组比较，*P<0.05，*P<0.013.1.3 四氧嘧啶糖尿病小鼠一般状况的观察46只小鼠注入四氧嘧啶后，第3天造模动物对比于正常对照组在进食、饮水、尿量的方面均有增加，即“三多一少”的症状，第4天后，有3只死亡，6只不达模

12、型标准。连续给药后7 d后，桑螵蛸低、中、高剂量处理组精神逐渐好转，皮毛逐渐恢复光泽，饮水、饮食、尿量逐渐降低，身体逐渐变胖；而糖尿病模型组则情况较差，皮毛粗乱且无光泽，无活力，身体瘦弱，饮水、饮食和尿量增加较多。给药15 d以后上述情况更加明显。3.2 桑螵蛸粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响3.2.1 桑螵蛸粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响与糖尿病模型组小鼠相比，桑螵蛸水提取物处理组、乙醇提物处理组以及石油醚提取物处理组的小鼠血糖水平均有所降低，且以石油醚提取物处理组最为明显（P<0.01），其次是水提取物处理组（P<0.05），乙醇提物处理组则差异不显著。而

13、与阳性对照组比较，各处理组（除正常对照组）降低小鼠血糖水平均有差异，其中石油醚提取物处理组与其差异显著（P<0.05），其它处理组均有极显著差异。在血糖降低的绝对值方面，石油醚提取物处理组与阳性对照组无显著差异，与糖尿病模型组有极显著差异（P<0.01）。结果见表3。表3 桑螵蛸的不同粗提物对小鼠的血糖浓度的影响（略）与糖尿病模型组比较，*P<0.05，*P<0.01；与阳性对照组比较，#P<0.05，# P<0.013.2.2 桑螵蛸粗提物对四氧嘧啶糖尿病小鼠体重以及饮水量的影响与糖尿病模型组小鼠相比，桑螵蛸

14、水提取物处理组、石油醚提取物处理组小鼠的72 h饮水量均明显较少（P<0.01），而与阳性对照组相比，乙醇提取物处理组差异最显著（P<0.01），其次是水提取物（P<0.05），石油醚提取物处理组则不明显。在体重方面，石油醚提取物处理组与糖尿病模型组差异最显著（P<0.01），而与阳性对照组差异不明显。结果见表4。表4 桑螵蛸的不同粗提物对小鼠平均体重和72 h内平均饮水量的影响（略）与糖尿病模型组比较，*P<0.05，*P<0.01；与阳性对照组比较，#P<0.05，# P<0.0

15、13.2.3 四氧嘧啶糖尿病小鼠一般状况的观察60只小鼠注入4氧嘧啶后, 第1天和第2天均比较正常，第3天开始，个别造模动物开始死亡，至第4天为止，死亡4只，不达模型标准的7只。连续给药7 d后，桑螵蛸石油醚提取物处理组以及阳性对照组的小鼠精神逐渐好转，皮毛逐渐恢复光泽，饮水、饮食和尿量逐渐降低，水提取物处理组和乙醇提取物处理组小鼠稍有好转；而模型组一般情况较差，皮毛粗乱且无光泽，体力衰减，饮水、尿量增加较多。连续给药15 d后上述情况更加明显。4 讨论 本实验结果表明桑螵蛸可以显著（P<0.01）降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，增加小鼠体重(P<0.05)和减少

16、饮水量（P<0.01），减轻小鼠“三多一少”的糖尿病症状，使其逐步好转，并随着桑螵蛸浓度的增加，显示此作用呈一定的剂量依赖关系。用各种溶剂对桑螵蛸进行进一步的提取，发现桑螵蛸的石油醚提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用最显著（P<0.01），且明显（P<0.01）增加小鼠体重和减少饮水量，有效改善“三多一少”的糖尿病症状，其次是桑螵蛸的水提物(P<0.05)有降血糖作用，而醇提物作用均不明显。说明具有治疗糖尿病作用的活性成分主要存在于桑螵蛸的石油醚提取物中，有少部分存在于水提物中。 近年来，人们研究的用于治疗糖尿病的中药活性成分主要有生

17、物碱、黄酮、多糖、皂苷、萜类等4。而石油醚提取出的一般是甾体、萜类、脂肪油等，所以桑螵蛸降血糖的有效成分可能是石油醚提物中的甾体皂苷或萜类物质。事实上，关于含有皂苷或萜类物质的中药治疗糖尿病的研究很多，上海瑞金医院通过研究就阐明了人参皂苷抗糖尿病及其对胰岛素的增敏作用5，而另有研究证明萜类物质山茱萸环烯醚萜总苷的降血糖作用可能与抑制非酶糖基化终产物的形成以及阻止其对超氧化物歧化酶的破坏作用等有关6。因而，桑螵蛸降血糖作用机理可能与这两种机理相似。 另外，对比于阳性药物，桑螵蛸的石油醚提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用仍有一定差距，这可能与桑螵蛸的石油醚提取物的浓度有关，浓度的高低可能影响其

18、将血糖的作用。【参考文献】 1李德珍施今墨治疗糖尿病探析J.中医杂志，2001，42（5）：261.2S.C. Cavalher-Machado, W. Tavares de Lima, A.S. Damazo, et al. Down-regulation of mast cell activation and airway reactivity in diabetic rats: role of insulinJ.Eur Respir J, 2004, 24: 552.3Mou Xin-li, Lu Jin-liang, Wu Tao. Antihyperglycemic activity of Hypoglycemic Ziyabiti Tablet in normal and diabetic miceJ.Chinese Traditional PatentMedicine, 2005, 27(8):926.4杨怀瑾，刘立超，黄洪林抗糖尿病中药