中国药典2015版-微生物限度检查解析

1、中国药典2015年版-微生物限度检查解析质量部房有荣2014.06.21目录 药品微生物检验的现状与发展 中国药典2015年版-微生物限度标准修订解析 中国药典2015年版-非无菌产品微生物检查 菌种的传代、保藏与管理 药品微生物污染源的调查与分析 微生物实验室相关要求与质量管理药品微生物检验的现状与发展 历史沿革 新中国第一部药典（1953年版）收载了无菌检查法 我国开展药品微生物限度检查始于1972年。 1978年颁发了第一个“药品卫生标准”。 1995年版中国药典首次收载了微生物限度检查法，2000年版收载了微生物限度标准。 从第八届药典委员会（2005版中国药典）开始设立微生物专业委员

2、会。药品微生物检验的现状与发展 2005版将按剂型制定限度修订为按给药途径制定限度强调微生物检验的“方法验证”无菌检查培养时间与国外接轨 2010版 质量标准体系基本与国外接轨 强调对微生物检验过程的验证及过程控制 部分品种特别是抗生素品种的无菌检查法由附录走入各论。2015版版修订后的中国药典微生物检验修订后的中国药典微生物检验系统成为一个较完备的标准体系，系统成为一个较完备的标准体系，将收载将收载15个左右的微生物检查法个左右的微生物检查法或知道原则或知道原则修订后的中国药典微生物检测修订后的中国药典微生物检测系统与国外完全一致系统与国外完全一致对实验环境进行了重大修改对实验环境进行了重大

3、修改中国药典的标准修订：中国药典的标准修订：1.医药产品的发展2.基本“矛盾”“有菌的环境”生产“无菌的产品”3.特殊的医药环境输液品滥用！中西药并存！4.不断有人死亡“欣弗事件”5.药品微生物污染的反思药品微生物检验的现状与发展面临的挑战：面临的挑战：1.方法验证与方法适用性建立实验室自身的方法依据体系2.维护、计量、校准、性能确认和使用监控（温度测量装置、培养箱、水浴箱、烘箱、压力灭菌器、天平、量器等等）3.供应商评估与现场审计使用正确的、有严格质量保障的产品药品微生物检验的现状与发展质量管理：质量管理：中国药典2015年版-微生物限度标准修订解析标准修订内容修订思路1 中国药典2010年

4、版一、二、三部限度标准的相关内容合并。修订思路2参考EP7.0，USP35，JP X V标准，修订中国药典的微生物限度标准。标准修订内容参考欧美日药典标准修订菌数标准表达方式：指数形式10ncfu，最大可接受限度值遵守2倍规则：101cfu： 可接受的最大菌数为 20； 102cfu： 可接受的最大菌数为 200； 103cfu： 可接受的最大菌数为 2000：依此类推。检查指标：需氧菌总数：TAMC（替代细菌数）-胰酪大豆胨琼脂培养基耐胆盐的格兰阴性菌（替代大肠菌群）检查制剂分类：齿龈、皮肤制剂原辅料、中药提取物、中药饮片的控制呼吸道制剂耐胆盐格兰阴性菌的控制修订后限度标准更清楚明了（共8项

5、、4个表）1.制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂和原辅料 应符合无菌检查法规定。 2.用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂 应符合无菌检查法规定。 3. 非无菌化学药品制剂、生物制品制剂、不含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准（见表 1） 4. 非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准（见表 2）5. 非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准（见表 3） 6. 中药提取物及中药饮片的微生物限度标准（见表 4） 7.有兼用途径的制剂 应符合各给药途径的标准。 8.霉变、长螨者 以不合格论。 表表 1非无菌化学药品制剂、生物制品制剂、不含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准非无菌化学药品

6、制剂、生物制品制剂、不含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准 表表 2 非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准表表 3 非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准表表 4 中药提取物及中药饮片的微生物限度标准中药提取物及中药饮片的微生物限度标准注注*：限度未做统一规定。：限度未做统一规定。 执行及制定标准的注意事项执行范围： 生产、贮存、销售过程中的药品 药用原料、辅料 中药提取物、中药饮片 新药标准 进口药品标准复核 药品质量考察及仲裁标准执行的注意事项：l 药典标准出处：中国药典通则项下【微生物限度】要求。l 沙门菌检查

7、： 检查对象：口服制剂 含药材原粉（不再界定是否为动物药材） 含脏器提取物（不区分是否为中药制剂）l 原辅料、中药提取物和中药饮片，参考制剂的要求及生产工艺特点设置控制军检查要求中国药典2015年版-非无菌产品微生物检查法 格式变化 通用要求 检测环境 供试品前处理-抑菌性去除 微生物计数法使用范围-可采用替代检查方法 微生物计数定义变化-需氧菌总数（胰酪大豆胨琼脂），霉菌和酵母菌总数（沙氏葡萄糖琼脂） 菌种 传代 保藏 菌液制备-室温2小时，28C，24小时内使用 培养基 培养条件-需氧菌总数 3035C 35天；霉菌和酵母菌数 2025C 57天。增加新概念 1.MPN法使用范围：含菌量较

8、低的供试品细菌总数测定 2.“分散均匀”：并非一定要溶解 3.偏差调查概念引入 当检验结果出现超常或超标时需要进行偏差调查 调查范围：人、机、料、法、环控制菌检查法修订解析 本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法-新增内容在各控制菌项下：生化试验和“应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验”改为较少的生化试验或“采用其他适宜方法进一步鉴定”-较大改变检查项目菌种的传代、保藏与管理控制程序控制程序菌种来源菌种来源菌种的保菌种的保管管菌种的复菌种的复活活菌种确认菌种确认菌种的储菌种的储存和领用存和领用菌种的销菌种的销毁及领用毁及领用记录记录菌种传代、

9、保存、使用及销售记录菌种名称：菌种名称： 菌种编号：菌种编号： 保管人：保管人： 日期：日期： 药品微生物污染源的调查与分析微生物实验室相关要求与质量管理2015年版药典框架 人员、培养基、试剂、菌种、环境、环境、样品、检验方法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量控制、实验记录、结果判断检测报告、文件人员 相关的教育背景 应经过生物安全方面培训，保证安全 不断地继续培训，保证知识与技能不断地更新 熟悉、规范理解和执行 能力评估-通过质量控制、能力验证等 培训、考核等档案培养基 培养基的配制处方、配制方法、灭菌方法的验证、PH值及一般要求强调容器材质对培养基质量的影响（一般为玻璃容器

10、） 培养基的贮存自配培养基标记（信息）、贮藏、注意事项及作废培养基的处理自配培养基标记，增加“配置人”信息 培养基的质量控制质控程序、常规检测项目、过程控制及适用性实验、环境检测培养基的要求试剂 应有对试剂进行接收、检查和贮存的程序； 关键试剂在开启和储存过程中，对每批试剂的适用性进行验证，进行管理控制，保存和记录相关信息； 标明名称、制备依据、适用性、浓度、效果、储存条件、制备日期、有效期限及制备人菌种 来源：标准菌株，标准储备菌株，工作菌株，可以使用“可以溯源的商业派生菌株” 保藏：标准储备菌株的纯度和特性确认 传代和使用：5代之内，“标准菌株如果经过确认试验证明已经老化、退化、变异、污染

11、等或菌株已无使用需要时应及时灭菌销毁”； 管理：应有程序文件，包括申购、操作、转种传代、纯度特性确认记录，注明名称、标准号、接种日期、代数、培养基和培养条件、保藏的位置和条件等。环境 实验室的布局和运行 环境监测 清洁、消毒和卫生设备建立仪器设备管理制度 清洁保养制度 操作规程 使用、监控的记录清单化管理清单化管理标识化管理标识化管理分类管理分类管理样品检验方法 方法选择：应根据检验目的选择适宜方法 方法确认：药典方法、标准方法应进行方法适用性确认 新方法使用前进行替代方法的验证 注意对商业系统的试剂盒等检测方法和数据的确认。污染废弃物的处理 应有妥善处理废弃样品、过期（或失效）培养基和有害废弃物的设施和制度 减少环境和材