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文档简介
1、2016 前 言民以食为天,食以安为先。食品安全关系着民生、关系到社会的稳定与经济的发展,是任何时候都不能忽视的大事。食品安全问题是一个全球性问题。当一个国家经济处于快速发展阶段时,食品安全问题就彰显得尤为突出。以往食品污染,添加剂滥用,不法分子唯利是图的掺杂造假以及极端分子的投毒作案等,致使局部地区或全国范围内食品安全事件时有发生。食品安全事件屡屡发生的原因是多方面的,除了法律、法规、标准、管理等需要强化外,再就是一些客观因素的不足所致。因素一是负责检验食品安全的检验室建制数量有限,尤其是欠发达地区和广大农村地区;二是检验室的检验成本较高,影响了应该送检的样品未能及时送检;三是检验室的检验周
2、期较长,有些样品如蔬菜、豆浆、鲜类食品等,没等检测报告出来食品就已经销售完毕了。如何解决这些客观因素的不足呢?较好的办法之一就是开展快速检测。目 录一、概述二、采样要点三、常见食的快速检测举例一、快速检测的定义二、快速检测的意义我国近30年来经济快速发展,社会处于转型时期,而且还会持续相当长的一段时期。在这种迅猛的商品经济运行中,食品安全也出现了一些问题,如农药、鼠药、甲醇、亚硝酸盐等群发性食物中毒,甲醛、吊白块、注水肉、瘦肉精等事件的发生等。我国在提高食品安全整体水平方面仍有很长的路要走,我国对现场快速检测有着特殊的需求。三、快速检测的时间概念四、现场快速检测方法的主要形式 现场快速检测方法
3、的形式大体上有以下几种:1 试纸法1.1 用试纸显色来定性或作为限量指示:如农药、敌鼠钠盐等。1.2 用试纸层析显色来定性并来作为限量指示:如苏丹红、瘦肉精等。1.3 用试纸显色的深浅来半定量:如食用油酸价、过氧化值等。2 试管法2.1 用试管显色来定性并来作为限量指示:如毒鼠强、生豆浆等。2.2 用试管显色的深浅来半定量:如亚硝酸盐、甲醇、二氧化硫等,比色定量可以是目视,也可以用便携式光度计。3.滴瓶法:将标准溶液放在滴瓶中,根据消耗的滴数量来判定被检物质的含量。如酸碱、氧化还原性物资等。4.便携式仪器法:如便携式甲醇速测仪、酸度计、电导仪、温湿度计、中心温度计、食用油极性测定仪、辐照度计、
4、ATP荧光度仪等。五、现场快速检测结果的表述及注意事项 一、常见食物中毒类:如农药、鼠药、金属毒物、有毒油脂、亚硝酸盐、甲醇、生豆浆、有毒豆角等的快速检测方法。二、非法食品添加物与劣质食品类:如掺杂造假、食品物理或化学性质的改变等。三、食品生产、加工和储运控制环节类:如温度、洁净度、消毒效果等。四、生物性污染类:如细菌总数、大肠菌群。注意:在生物性污染项目中,致病菌是常见食物中毒因子。八、引发食品安全问题的主要原因采样不是本课所讲的重点,但采样却是快速检测不可忽视的内容,这里仅讲现场快速检测的采样要点:1 1 为了监测总体样品的安全卫生状况,应注意采样的代表性原则。均衡地,不加选择地从全部批次
5、的各部分随机性采样。2 2 为了检验样品掺假、投毒或怀疑中毒的食物等,应注意采样的典型性原则。根据已掌握的情况有针对性地采样。如怀疑某种食物可能是食物中毒的原因食品,或者感官上已初步判定出该食品存在卫生质量问题,而进行有针对性的选择采样。 3 3 当检出阳性样品或不合格样品时,应考虑采样方法是否正确。4 4 对检出的阳性样品或不合格样品,必要时应送实验室进一步检测。一、有机磷和氨基甲酸酯类农药及鼠药的快速检测检测意义:在农业生产中,会在很长的一段时间内使用化学性农药,如果不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用了不该使用的农药,就会引起农药超标或农药中毒。食物中毒发生后,快速筛查出
6、是否是由有机磷或氨基甲酸酯类的农药或鼠药所致,对于及时抢救伤者具有重要意义。 农药的检测重点是有机磷或氨基甲酸酯类农药。蔬菜表面测定法(粗筛法):擦去蔬菜表面泥土,滴23滴浸提液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。放置10min进行预反应,将速测卡对折后,用手捏3min时,打开与空白对照实验卡比较判定。蔬菜整体测定法:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL浸提液,震摇50次,静置2min以上。取23滴浸提液滴在速测卡上,以下操作与表面测定法相同。中毒残留物的检测:取样品适量于容器中,加入2
7、倍量的乙酸乙酯,充分震摇后静置,取澄清液于蒸发皿中,在水浴上蒸干乙酸乙酯,取1mL磷酸盐浸提液溶解蒸干后的残渣,取残渣溶液23滴于速测卡白色药片上进行检测。注意事项注意事项:1 目前国内外所使用的农药残留测定方法(纸片法和分光光度法)的检验原理基本相同,测定中的干扰物质也基本相同。葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时(包括含叶绿素较高的蔬菜),不要剪的太碎。测定番茄时,可将提取液放在茄蒂处浸泡2min,取浸泡液测定。测定韭菜或大蒜时,可整根或整粒放入容器中,加入提取液后振摇提取测定。2 检测样品的速测卡预反应放置的时间应与
8、空白对照卡放置的时间尽量一致。红色药片与白色药片叠合反应的时间控制在3min,打开观察结果的时间应以1min内为准。 4 4 操作方法与结果判断操作方法与结果判断4.1 4.1 食盐中亚硝酸盐的快速检测及食食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别:盐与亚硝酸盐的快速鉴别:取食盐1平勺(约0.1g),加入到检测管中,加纯净水至1mL刻度处,摇溶,10min后与标准色板对比,该色板上的数值乘上10即为食盐中亚硝酸盐的含量mg/kg。当样品出现血红色且有沉淀产生或很快退色变成黄色时,可判定亚硝酸盐含量相当高,或样品本身就是亚硝酸盐。4.3 4.3 固体或半固体样品的检测固体或半固体样品的检
9、测:取均匀的样品(如香肠)1.0g 至10mL比色管中,加纯净水至10mL,充分震摇后放置,取上清液或滤液 1mL加入到检测管中(乳粉溶解后不用过滤,直接取乳浊液加入到检测管中),将试剂摇溶,10min 后与标准色板对比,找出颜色相同或相近的色阶,该色阶上的数值乘上10 即为样品中亚硝酸盐的mg/kg含量。如果测试结果超出色板上的最高值,可将样品再稀释10倍,测试结果乘上100即为样品中亚硝酸盐的含量。5 5 注意事项注意事项5.1 5.1 亚硝酸盐含量较高时,试剂显红色后不久会变为黄色,将黄色溶液再稀释放入另一新的速测管中又会显出红色,由此区分是亚硝酸盐还是食用盐。5.2 5.2 当样品反应
10、后的颜色大于标准色板2.00mg/L色阶时,应将样品稀释后再测,计算结果时乘上稀释倍数。5.3 5.3 生活饮用水中常有亚硝酸盐存在,不宜作为测定用稀释液。 直接取植物油适量(约5ml)于清洁、干燥容器中,将油样温度调整至255,将试纸端插入油样中并开始计时,试纸插入油样12秒立即取出,将试纸块面朝上平放,反应计时视环境温度而定,在规定的时间内比色有效。最佳反应时间为5分钟,38分钟内比色有效。 1.1.检测方法:检测方法:比浊法和免疫层析胶体金竞争法。比浊法和免疫层析胶体金竞争法。2.2.检测原理检测原理2.12.1比浊法:比浊法:是将是将样品中的三聚氰胺经提取后与试剂反应生成相对稳定的混悬
11、液,在比浊管中目视判定结果。2.22.2免疫层析胶体金竞争法:免疫层析胶体金竞争法:是将样品加入到速测卡的加样孔中,若样品中三聚氰胺的浓度高于1mg/L ,样液流到 T 区时,金标抗体全部形成无色复合物,不会出现可见红紫色T线(阳性结果)。若样品中三聚氰胺的浓度低于1mg/L,样液流到 T 区时,会逐渐凝集成一条可见的红紫色T线(阴性结果);当只有红紫色T线或T线C线都不出现时,说明速测卡失效。假冒伪劣的奶粉中,蛋白质含量往往不能达标。长期食用这种奶粉,会造成婴幼儿营养不良,生长发育迟缓,干瘦水肿,头大体小,免疫力降低,器官受损甚至危及生命。因此,测定奶粉中蛋白质的含量是食品安全检测中重要的项
12、目之一。 n国家行业标准规定:n优极品蜂蜜的含水量20% n合格品蜂蜜的含水量24% n劣质蜂蜜或掺假蜂蜜的含水量大于24%n方法:将蜂蜜轻轻混匀,再轻轻倒入250ml量筒中(可多倒入一些),将洁净干燥的蜂蜜比重计轻轻插入蜂蜜中央,任其自然下沉(下沉时间不少于15分钟)至不再下沉为止,水平观察,按蜂蜜弯月面的上缘取读数,用换算表计算出蜂蜜农度与含水量。本方法适用于餐饮具与食物加工器具表面洁净度的快速检测。ATP是三磷酸腺苷的英文缩写,是生物能量转化产物, 存在于所有活的细胞体中。当ATP接触到荧光素酶后,就会发生反应产生出光,物体表面残留的食物和微生物越多,ATP也就越多,发出的荧光也就越强,
13、采用荧光光度计,可将这种光的强度加以记录。 ATP荧光测定仪,荧光素酶在被检物体表面10cm10cm的区域内,用拭搽拭抹采样,按仪器使用说明书操作记录测试结果。由于不同仪器的灵敏度不同,同一样品在不同仪器上显示的数据(RLU)有所不同,可在参考不同仪器附带的卫生监测控制推荐表基础上,加上日常检测积累的数据,制定出适宜的控制指标。与洁净擦法的注意事项基本相同。食品微生物快速检验方法开展微生物快速检测工作的意义据世界卫生组织估计,在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中,70是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。2000年至2002年,中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市
14、的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况的监测结果表明,微生物性食物中毒仍居首位,占39.62;化学性食物中毒占38.56;动植物性和原因不明的食物中毒均占10左右。传统的微生物检测方法,主要包括形态检查和生化方法,涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁多。1955年德国学者F.J.Forg 发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法纸片法纸片法,使原来的检测周期由72小时缩短到15小时,材料成本降低了四分之三,同时大大简化了操作程序。从此,这种生化检测方法开始发展起来。另外,将培养基固化在试剂盒中的速测盒法,也是一种较为简洁快速的检测方法,省去了大量的实验准备工
15、作。开展微生物快速检测所需的基本条件一间通风良好、面积不需要很大的独立房间或野外帐篷;一个便携式紫外线消毒灯;一台便携式恒温培养箱;一个食品微生物快速检测箱,箱内备有实验用的工具和器皿、检测用测试片和试剂盒。有条件时,可增加一台高压锅或红外线消毒柜(家用消毒碗柜也可);具备以上设备和无菌操作概念即可进行检测了。1. 点燃酒精灯,营造局部无菌环境。取样和加样时尽量靠近酒精灯操作。操作工具如镊子、剪子、长柄勺、小刀等,在酒精灯上用火焰消毒后使用。2. 用75%酒精棉球将手和样品开口处周围抹擦消毒。3. 将无菌袋或无菌器皿放在天平上,用无菌器皿拿取样品称量25g或25ml,加入225mL生理盐水将样品溶解,或将样品放入盛有225mL生理盐水的均质管中将样品溶解(此为10倍样品稀释液),从中取1mL加入到无菌试管中,加入9mL生理盐水,混匀(此为100倍样品稀释液),一般情况下,取原液和10倍及100倍样品稀释液进行检测。4. 餐饮具卫生状况的检测,按照国家标准GB14934纸片法进行。 无菌操作和注意事项微生物检测流程图固体样品:取1:10溶解稀释液液体样品:取原液致病菌检测试剂盒36培养6h18h如果某增菌液发生混浊即预示含有某种致病菌可将混浊的增菌液接种到相应测试片上,36培养1824h验证结果 1. 食物中毒样品的快速筛查2.卫生指示菌与致病菌的监测固
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