根尖细胞有丝分裂制片与观察教学课堂

1、实验一实验一 植物根尖细胞有丝分裂制片与观察植物根尖细胞有丝分裂制片与观察1知识分享1、学习植物根尖有丝分裂制片技术；2、了解和辨别有丝分裂各个时期的染色体特征；3、掌握染色体的观察和计数方法。一、实验目的一、实验目的2知识分享 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时经过适当取材处理，加以固定、离析、染色、压片等步骤，可以迅速地将细胞分散附着于载玻片和盖玻片之间，再置于显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各个时期的细胞和染色体。细胞由第一次有丝分裂结束到第二次有丝分裂结束所经历的过程为一个细胞分裂周期，包括间期、前期、中期、后期和末期。 间期：一般持续时间比较长，是核内染色

2、体dna合成的过程，能看到核的变化，如核和其内的核仁体积增大，核内存在染色质，一般情况看不到染色体。二、实验原理二、实验原理3知识分享 前期：细胞核内染色体呈细丝状，在核内互相缠绕成团。核仁开始消失，核膜随之破裂。此时染色体已由两条染色单体所组成，只在着丝点处连结。 中期：各染色体的着丝点排列在赤道面上，两臂伸向赤道面的两旁。纺锤体完全形成，其一端与染色体的着丝点相连结，另一端集中于细胞的极处。中期染色体高度浓缩，具有各物种染色体的典型形态，是染色体计数的最好时期。 后期：每一染色体的着丝点分裂，两条染色单体彼此分开成两个子染色体，子染色体在纺锤丝的牵引下，分别移向两极。 末期：移向两极的染色

3、体，逐渐松散成染色质，纺锤丝逐渐消失，在赤道面上开始出现细胞板，把一个细胞分隔成两个子细胞，核膜重新形成，核仁出现，逐渐进入间期状态。 4知识分享5知识分享三、仪器与材料三、仪器与材料 1、材料：小麦的根尖。 2、用具及药品：显微镜、恒温箱、载玻片、盖玻片、染色缸、试剂瓶、酒精灯、镊子、剪刀、纱布、吸水纸；无水乙醇、45%醋酸、卡诺固定液（无水乙醇 冰醋酸=3 1）、1n盐酸、蒸馏水、1%醋酸洋红、改良品红。6知识分享四、实验程序四、实验程序 （1）取材：选取小麦种子浸泡于温水中，使种子吸胀，再置于垫有湿滤纸的培养皿中，于25条件下发芽，待根长约1-2cm在大量细胞进行分裂时剪根。 （2）预处

4、理：剪取的根尖放入盛有蒸馏水的小瓶，置于冰水溶液中，0-3处理24小时。 （3）固定：主要是杀死细胞，尽可能保持生活时的真实状态并便于染色。将经过预处理的根尖冲洗干净后，用滤纸吸去沾着的水滴，以卡诺固定液固定24小时。 （4）解离：将固定好的根尖移入盐酸酒精离析液中，在35下离析8分钟，或在1n盐酸中，60下离析15分钟。7知识分享（5）染色：将离解好的根尖用蒸馏水冲洗几次，在1%醋酸洋红中染色2-4小时；或置于染色缸里，加改良品红溶液，静置染色10-15分钟。（6）压片：取已染色的根尖，置于载玻片上，在分生组织处切取一小块，加45%醋酸（或改良品红）一滴，盖上盖玻片，用刀片架起盖玻片一角，用

5、镊子尖轻敲几下，使材料分散，移去架起的刀片，再轻敲几下，在酒精灯上微微加热，吸去多余的染液，用手指垂直压片（切勿移动盖玻片），即可镜检。（7）观察：在显微镜下观察上述制片，先用低倍镜找到分裂相后转高倍镜，可清楚观察到有丝分裂各个时期的图象。8知识分享9知识分享10知识分享11知识分享12知识分享13知识分享14知识分享15知识分享16知识分享17知识分享18知识分享19知识分享20知识分享21知识分享22知识分享23知识分享24知识分享25知识分享26知识分享27知识分享28知识分享29知识分享30知识分享31知识分享32知识分享33知识分享34知识分享35知识分享36知识分享37知识分享38知识分享39知识分享40知识分享41知识分享42知识分享43知识分享44知识分享45知识分享46知识分享47知识分享48知识分享49知识分享实验注意事项实验注意事项 ： 实验的第六步，敲片一定要用力均匀，不能太用力敲，否则会敲破盖玻片，也不能用力太小，否则细胞不能分散开，压片时用拇指垂直瞬间用力往下压，这样得到的染色体才能在一