薄层色谱法原理

1、薄层色谱法薄层色谱法thin layer chromatography，tlc第一节第一节 薄层色谱法的基本原理薄层色谱法的基本原理 定义：薄层色谱法是将被分离的试样溶液点在薄层板的一端，再用溶剂把试样展开，从而使试样组分分离。 分型：吸附薄层色谱、分配薄层色谱法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱等。（一）薄层色谱法的原理 将一定粒度的吸附剂将一定粒度的吸附剂均匀地涂铺在表面光均匀地涂铺在表面光洁的玻璃板或塑料平洁的玻璃板或塑料平板上，制成薄层板。板上，制成薄层板。 把待分析试样的溶液滴把待分析试样的溶液滴加在薄层板的起始线加在薄层板的起始线上（点样）上（点样） 薄层板试样原点把薄层板放入层析缸中

2、，底端浸入适当溶剂。把薄层板放入层析缸中，底端浸入适当溶剂。 展开过程中，组分在展开过程中，组分在两相之间发生多次吸两相之间发生多次吸附附解吸平衡，解吸平衡，吸附吸附牢的组分随展开剂移牢的组分随展开剂移动慢，吸附弱的组分动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一随展开剂移动快，一段时后，组分被分离段时后，组分被分离，各组分在薄层板上形各组分在薄层板上形成不同距离的斑点。成不同距离的斑点。前沿原点ab比移值比移值r rf f原原点点到到溶溶剂剂前前沿沿的的距距离离原原点点到到斑斑点点中中心心的的距距离离 frcbrcarstf溶剂溶剂前沿前沿起始线起始线ababcabrf值相差越大，分离越好。一般要求

3、分值相差越大，分离越好。一般要求分离后组分的离后组分的rf值值在在0.20.8之间之间，各组，各组分的分的rf值之差应大于值之差应大于0.05，以防斑点重，以防斑点重叠。叠。（二）固定相和流动相 1、固定相（吸附剂） 常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸常用的吸附剂：硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸附树脂等。附树脂等。 吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应吸附剂的选择要合适，与流动相、被分离化合物不反应 2、流动相（展开剂） 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元混合溶剂作流动相，称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一般规则相同，展开剂的选用要从被分离试样组分极性、

4、吸附剂活性和展开剂的极性三个因素综合考虑。吸附剂和展开剂的选择 对于极性较小的被分离试样组分，应选用活性较强的吸附剂，极性较小的展开剂； 对于极性较大的被分离试样组分，应选用活性较弱的吸附剂，极性较大的展开剂。被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之间的关系活泼活泼吸附剂吸附剂（固定相）（固定相）展开剂展开剂（流动相）（流动相）极性极性不活泼不活泼被分离物质被分离物质bbacc非极性非极性非极性非极性极性极性a展开剂成分的选择：展开剂成分的选择：对于容易分离的化合物，用单一溶剂展开优点：溶剂简单，分离重现性好。对于难分离组分，则选用二元、三元、甚至多元溶剂 rf太小加入强极性展开剂 rf过大降低展开剂的极性优化优化1.占比例较大的溶剂为主要溶剂，可使试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组分rf值，改善分离效果。2.分离酸性或碱性组分时，往往在展开剂中加入少量酸或碱，以防这些组分离解，使这些组分的斑点更加集中和清晰，从而提高分离度。3.当展开剂的粘度太大时，可在展开剂中加入粘度小的溶剂，以降低展开剂粘度，从而提高展开速度。谢谢