HPV的检测及其临床应用PPT课件

1、HPV与宫颈癌的相关性 年轻性活跃的女性HPV感染率最高，感染高峰年龄为1828岁 多属于一过性感染，通过自身免疫将HPV消灭 只有持续感染HPV的妇女,才成为子宫颈癌高发人群 HPV感染到发展成为子宫颈癌需要925 年时间 30%发展成为CIN1,10%发展成为CIN2,10%进一步发展成为CIN3，1%发展成为子宫颈癌第1页/共16页HPV结构与亚型 共价双链环状DNA 病毒, 电镜下观察外形呈20 面体对称型 3个部分组成:早期区( E区) ,晚期区(L区)及上游调控区(非编码区) 按HPV在诱发生殖道恶性肿瘤中的危险性不同分为高危型和低危型两组。 高危型:呈持续性,不易自然缓解,CIN

2、2、CIN3及宫颈癌; 低危型:自然缓解率较高,湿疣病变和CIN1 国外：16 和18 型感染为主 我国：16, 58型为主第2页/共16页临床常用的HPV检测方法 病理学检查 细胞学检查 免疫组化检测 聚合酶链反应( PCR)技术 DNA芯片分型检测 杂交捕获DNA分析第3页/共16页病理学检查 鳞状上皮疣状乳头状增生 表皮角化不全 棘层不规则增厚 基底层增生 上皮脚延长 中表层出现灶状分布的挖空细胞等。第4页/共16页细胞学检查 挖空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞 细胞学诊断HPV感染敏感性较差第5页/共16页免疫组化检测 检测HPV的衣壳抗原来进一步明确HPV感染 所得阳性反应定位明确,

3、判断可靠 必须在HPV-DNA 复制成熟后才有衣壳装备 敏感性较低第6页/共16页聚合酶链反应( PCR)技术 设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进行体外扩增 敏感性最高,可对HPV进行分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进行序列分析 缺点为样品间易交叉污染导致假阳性第7页/共16页DNA芯片分型检测 一种微量分析技术, 以玻片作为DNA载体,固定了22型HPV-DNA探针(包括15种高危型HPV及7种低危型HPV )及一个球蛋白的对照探针 可同时对HPV进行检测及分型 可对多个型别的混合感染同时进行监控第8页/共16页杂交捕获DNA分析

4、 标本中的HPV-DNA 与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA 量成比例,因而可对HPV进行半定量检测 效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便第9页/共16页高危型HPV检测的临床应用 宫颈癌及癌前病变筛查 ASC - US的分流管理 宫颈病变治疗后的随访第10页/共16页宫颈癌及癌前病变筛查 高危型HPV-DNA 检测可用于30岁以上妇女的宫颈癌筛查。 若细胞学和高危型HPV-DNA均阴性,进展为C IN3 的危险性极低,可延长筛查时间的间隔。第11页/共16页ASC - US的分流管理 对于意义不明的非典型鳞状细胞(ASC-US)美国ASCCP推荐以下3种进一步评估的方法: 立即阴道镜检查; 重复细胞学检查; 高危型HPV-DNA ( hc22)分流管理第12页/共16页宫颈病变治疗后的随访 在行锥切术前及子宫切除术时均应用hc-2系统进行高危型HPV-DNA检测第13页/共16页小结 持续性高危型HPV感染是C IN进展的必要条件 HPV-DNA的病毒载量与HPV的持续感染及宫颈病变进展也密切相关