副猪嗜血杆菌感染的诊断和防制策略

1、副猪嗜血杆菌感染的诊断和防制策略袁森泉 译自pig progressrespiratory disease(special)2002，2225林 颖 校 通过预防性免疫接种和抗生素治疗，可以防制副猪嗜血杆茼感染。但是，要成功地防制全身性疾病，就必须作出准确的诊断，并要了解受害猪群中副猪嗜血杆茵的流行病学。 副猪嗜血杆菌(haemophillus parasus)仍然是许多养猪生产者关心的主要问题。副猪嗜血杆菌独自或者与其它微生物(比如猪链球菌或猪繁殖和呼吸综合征病毒)一起造成的死亡，可使保育期死亡率达到10之高。副猪嗜血杆菌引起的疾病可早在保育舍内最初2周时就开始出现，并一直持续到肥育期早期。

2、感染高峰通常见于保育期的46周。 通常可见到副猪嗜血杆菌定居于健康猪的上呼吸道，并常常可在鼻腔内、扁桃体内和气管前段分离到，而不见其引起任何临床症状。但是，副猪嗜血杆菌的有些菌株会破坏上呼吸道的防卫机制从而在敏感猪引起全身感染。这些菌株可能是致病性的，可引发glasser氏病的特征性病变，即纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎。副猪嗜血杆菌有时候可引起肺部病变。 与副猪嗜血杆菌感染有关的临床症状通常是非特异性的。全身感染的特征是高热(10451075。 f)、虚脱、食欲不振、呼吸困难、关节肿胀、肢端发红以及中枢神经系统症状(比如运动失调和战栗)。可发生猝死，这种情况下常常缺乏眼观病变。正确呈送

3、样本 要作出副猪嗜血杆菌感染的诊断，必须从表现临床症状和病变的猪分离到这一细菌。然而，副猪嗜血杆菌是一种要求很高的细菌，从临床病料中进行分离常常不能获得成功。在呈送供分离副猪嗜血杆菌的病料时遵守一定的原则，可大大提高确诊的机会(表1)。对于出现了临床症状而未加治疗的猪实施安乐死，并尽快采集其组织器官病料在冷藏条件下送检，可成功地分离到病原。 最近，采用聚合酶链反应(pcr)技术提高了副猪嗜血杆菌感染诊断的灵敏度。pcr试验与传统微生物学方法相比有若干优点。应用这一技术不需要对分离的菌株进行培养和生化鉴别，甚至可检测无活力的细菌。尽管pcr技术非常有助于确定副猪嗜血杆菌与猪死亡的关系，但如果要进

4、行自家菌苗接种，就总还是要进行病原分离。 选择具有代表性的样本去作副猪嗜血杆菌 pcr试验或进行病原分离，对于作出正确诊断来说，是极为重要的。副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道中的一种共栖菌。在采集自鼻腔、扁桃体或气管的病料中分离到这一细菌，或者得到pcr实验的阳性结果，对于评估疾病是否由副猪嗜血杆菌引起来说，是没有意义的。只应从全身各部位采集样品，比如从浆膜、心包、腹膜、关节和脑膜等处采样送检进行副猪嗜血杆菌感染诊断。组织和或受害器官的拭子是进行pcr试验和病院分离的合适样本。只有少数定居 副猪嗜血杆菌可定居于出生后仅数小时的仔猪。将母猪鼻腔分离到的菌株与二个猪群中引起全身性疾病的菌株相互比较，结果表

5、明可能致病的副猪嗜血杆菌在母猪群中的流行率很低。所以，在仔猪仍然受到母源免疫力保护的时候只有很少的个体会被群内可能致病的菌株定居。这些猪被认为是将致病菌株带人保育舍的健康带菌猪，它们就在保育舍内与敏感猪相混合。 抗副猪嗜血杆菌的母源免疫力大约在仔猪56周龄时降低，这一时期与保育舍内副猪嗜血杆菌引起肺部病变的时间一致。不再受母源免疫力保护的敏感猪很容易因与先前的致病菌携带猪相接触而发生全身性疾病。 对于副猪嗜血杆菌引起的疾病进行流行病学研究，对于制定防制策略来说是极为重要的。为获得有价值的资料供免疫接种之用，必须将分离自受害猪全身各处的副猪嗜血杆菌菌株进行鉴定并进行比较。副猪嗜血杆菌可根据外膜蛋

6、白质(omp)特性以及血清型和基因型进行分类。已经报告了两种主要的omp型(page i型和型)以及15个血清变种群。这些技术可提供有关副猪嗜血杆菌各菌株表型特征的重要信息。但是，与分子技术(比如基因分型)相比，这一技术的识别能力很低。 副猪嗜血杆菌的基因分型正在成为研究猪群内和不同猪群间感染流行病学的主要工具之一。这一技术具有较高的识别力以及对任何副猪嗜血杆菌菌株进行鉴别的能力，而无论这些菌株属于哪一个血清变种群。reppcr技术已经成功地被用于副猪嗜血杆菌的基因分型。采用reppcr技术，可对特定猪群中引起疾病的流行菌株进行基因分型，并将其与以前的分离株、新的分离株、菌苗菌株和分离自来源猪

7、群的菌株进行比较。这些信息对于副猪嗜血杆菌的防制都是极为重要的。 另一个需要加以考虑的有趣因素是，只有少数几种菌株会在特定的猪群引起全身性疾病，而与从同一猪群的猪上呼吸道分离到的菌株的变异性无关。最近，在美国10个猪场用 reppcr指纹技术对副猪嗜血杆菌进行的分子流行病学调查表明，一般只有13种流行菌株与某一猪群的全身性疾病有关。这一信息对于采用自家菌苗来防制副猪嗜血杆菌来说，是很有价值的。防制策略可采用免疫接种或者治疗的方法来防制副猪嗜血杆菌感染。市场上有若干种商品菌苗出售。有些菌苗中含有一些特定血清型的菌苗株，而另一些则含未分型的菌株。自家菌苗也已被用来防制副猪嗜血杆菌感染。这些菌苗是用

8、分离自临床发病猪的菌株以及有副猪嗜血杆菌感染特征的病变中的菌株制成的。据报告，尽管这两种类型的菌苗都可在某些猪群内降低发病率和死亡率，自家菌苗的结果一般来说比较稳定。 据报告，副猪嗜血杆菌不同血清型之间仅偶然表现有不稳定的交叉保护作用。含有血清型4和5的菌苗能减少血清型13和14攻击后病变的发生，但表现对血清型2和12的攻击无任何保护作用。另一项研究评价了二种含副猪嗜血杆菌血清型2和5菌株的实验菌苗。这二种菌苗都对同源攻击具有具有保护作用，但在对血清型2免疫的猪用血清型5攻击或者相反时，均未见任何异源保护作用。最近一项研究中采用了血清型5的菌苗菌株以及血清型14和非分型的攻击菌株，评价了同源保

9、护作用和异源保护作用。实验菌苗对同源攻击表现了保护作用，但用异源菌株攻击时未见任何保护作用。 这些实验的结果表明，如果将在猪群引起疾病的副猪嗜血杆菌菌株应用在菌苗之中(商品菌苗或自家菌苗)，则可能成功地产生保护作用。抗副猪嗜血杆菌的异源保护作用非常有限，这一事实也许可以解释为什么某种商品菌苗当应用于其它猪群时可能无效。在这些情况下，采用自家菌苗可能非常有助于控制疾病。为了替某一猪场选择一种合适的菌苗，应遵循以下一些原则： 1、只能在非呼吸道的部位进行副猪嗜血杆菌的分离，比如在胸膜、心包、腹膜、关节和脑膜等处； 2、应将从全身各部位分离大量菌株并对这些菌株进行比较，以便确定引起该猪群发病的主要菌

10、株。 repprc技术是鉴别和比较副猪嗜血杆菌各菌株的最可靠的技术； 3、一旦选定了菌苗菌株并在猪群中实施了自家菌苗免疫接种，就应对所有的新病例采样和送检，以便进行细菌分离、基因分型并与菌苗进行比较。通过对新病例进行监测，从而可在必要时对自家菌苗进行更新。 在进行副猪嗜血杆菌免疫接种时，还有一个需要考虑的重要因素，即免疫接种实施时间的选择。业已证明，在母猪分娩前2周时对其进行免疫接种，可保护仔猪到进人保育舍的时候。然而，对仔猪进行免疫接种可以取得更好的结效果，因为发病往往会推迟。仔猪进入保育舍时应该对其进行免疫接种，2周后应再进行一次。如果对母猪和仔猪都进行免疫接种，那么应该谨慎决定仔猪免疫接种开始的时间，因为母源抗体会干扰仔猪特异性免疫应答的产生。结 语 副猪嗜血杆菌的防制取决于对病原的正确诊断，对引起猪群内全身疾病的菌株进行准确鉴别，以及选择适当的疫苗和免疫接种时间。采用以16s为基础的pcr技术，提高了副猪嗜血杆菌诊断的灵敏度，但必须分离病原以便进一步对其进行