AKTAPurifier使用-文档资料

1、1AKTA Purifier使用2一、仪器使用注意事项3AKTApurifier4流路图InletPump压力感应器混合器在线滤器进样阀色谱柱紫外检测器电导检测器PH计收集器5使用环境对操作环境的要求：室内温度：440度相对湿度：1090输入电压：100240VAC功率：400AV900AV重量：40KG-70KG注意事项：1、主机要有良好的接地；计算机和主机不要用同一电源2、当把主机置于远端控制时，com线不要长于15m6仪器使用（1）准备工作：1、Buffer、超纯水、20%乙醇，0.45um或0.22um滤膜过滤、除气。2、样品15000rpm离心10min，除颗粒、除气。7仪器使用（2

2、）以分子筛为例：1、清空废液缸。2、准备好收集管。3、开机：先开主机，后开电脑，避免连接错误。4、将入口崩头A轻轻放入超纯水中，注意注意A A和和B B不要不要搞反。如有需要此时可更换定量环。搞反。如有需要此时可更换定量环。5、检查泵后润洗液是否充足，泵后管路是否充满，允许有少量气泡。6、对对A A泵两个泵头进行抽气，各泵两个泵头进行抽气，各10ml10ml。7、打开程序，低流速运行5分钟，然后运行Pumpwash，观察压力是否正常观察压力是否正常8、使用Inject模式冲洗10ml，待紫外平稳即可装柱8仪器使用（3）装柱：在有流速和设置保护压力的情况下装柱，约0.3ml/min，从上到下，打

3、开柱子上端后，使液体充满上端，避免进入气泡，然后将上端拧成半紧状态。然后打开下端，再将上端拧紧。120ml柱子可直接观测接口管路一段时间，看是否有气泡装好后检查紫外检测线，以及出口处出液情况。注意：在管路连好后，稍微将连接处管路向外拔一注意：在管路连好后，稍微将连接处管路向外拔一下，如果很容易拔出说明没连好下，如果很容易拔出说明没连好。9仪器使用（4）柱子连好后观察压力情况，刚接上一般压力比正常压力稍低，属正常现象。即使压力不超过报警压力，也不要将流速提高到正常流速以上。 Superdex75 10/300GL 24ml 流速0.6ml/min Highload16/60 superdex75

4、 120ml 流速1ml/min20%乙醇流速减半。10仪器使用（5）进样：1、用注射器洗进样环，特别是入口处容易残入口处容易残留上次进样样品留上次进样样品，需要特别注意。2、进样时保证进样阀处于load位置。3、注射器吸取样品时，尽量避免气泡，少量微小气泡关系不大。4、进样体积大于定量环体积，否则容易进气泡。11仪器使用（6）使用完毕：1、系统保存于20%乙醇2、倒掉废液3、擦干所有积水4、仪器配件归位12维护每天：维护每天：系统（System）： 检查系统是否渗漏. 如果数天不使用仪器，须用水将系统冲洗干净，并将层析柱和pH计拆下，之后用20%乙醇清洗系统，并用20的乙醇保存所有的流路。系

5、统泵（Pump P-900）:检查系统泵是否渗漏，如果发现泵头发生渗漏，或是流量不准确，则需更换泵头密封圈。更换缓冲液时，需排尽泵头里的残存气泡，否则会影响流速的准确性。13维护每周维护每周缓冲液筛网（Inlet filters）： 检查筛网是否很脏，如有必要须更换.在线滤器（On-line filter）： 清洗滤器，如有必要须更换滤膜，否则会形成很高的在线压力，损坏层析柱。泵冲洗液（Pump rinsing solution）： 更换泵后冲洗液（20%乙醇）。如果冲洗液瓶中液体量增加，说明泵头密封圈渗漏，须更换14维护每三个月维护每三个月紫外监测仪（Monitor UV-900）：检测光源

6、强度（应大于20）及使用时间（大于4000hr）、光栅翻转时间（大于2000hr） 保护光纤，防止折断或扭弯，否则无法采集数据或数据不准在不做柱层析时，注意关掉光源，尽量延长灯的使用寿命和减少光栅的机械磨省。10ml系统100ml系统15维护每六个月维护每六个月Monitor UV-900 清洗UV流通池，如果样品很脏则须更频繁的清洗.Monitor pH/C-900 检查和校正pH计（pH计在不使用时必须保存在下述溶液中：1:1 mixture of pH 4 buffer and 2 M KNO3或pH4.0的饱和KCl溶液中）Mixer M-925 检查混合仪及接头是否松动16维护每年V

7、alve INV-907, IV-908 and PV-908 检查阀是否渗漏，如果渗漏则需更换阀头维护每两年维护每两年 Mixer M-925 更换混合池17系统清洗（系统清洗（Cleaning the Cleaning the systemsystem）每天工作结束后每天工作结束后(At the end of the day)如果系统仍将使用之前一天的相同缓冲液，则可以用10的使用流速，用缓冲液冲洗泵如果将在第二天更换缓冲液，则需用水用PumpWash功能将泵冲洗干净几天停用仪器（几天停用仪器（Leaving for a few days）先用水PumpWash冲洗之后，再用冲洗之后，再用

8、20%的乙醇将系统冲洗干净，包括所有的进口管路和出口管路都用20的乙醇保存好18每月清洗（每月清洗（Monthly cleaningMonthly cleaning）必须每月按时清洗系统或在遇到问题时清必须每月按时清洗系统或在遇到问题时清洗系统（如色普峰出现重影）：洗系统（如色普峰出现重影）：用用1M NaOH ，执行SystemWashSystemWash指令指令. 之后立即用水将NaOH冲洗干净.19系统移动（系统移动（Moving the systemMoving the system）移动系统时小心谨慎，拆下外围的部件和管道，并防止剧烈震动，20小心！（小心！（WARNING!WARN

9、ING!）在更换部件时必须关掉所有的电源.如果有水或缓冲液渗入到仪器内部带电部位，须立即关掉电源，并求助于维修工程师21 P900柱塞泵初次使用或停用一段时间后再次使用时，首先以较低的流速运行，逐渐增加流速。切记不要开机后即高速运行22需要注意的问题1、废液溢出注意：每次用完倾倒废液，使用之前看下废液缸，没倒的话，清空并提醒上一位同学。2、不充20%乙醇注意：2天不用必须充20%乙醇，当天必须充上水，切忌保存在Buffer里3、使用频率过高，时间过长。注意：尽量节约蛋白使用，减少仪器使用次数。使用时尽量节约时间，平衡时不需要走整个柱体积，进样后也一样。合理安排时间，尽量不要出现因为有事而长时间的空走。4、用大柱子进行分析注意：大柱子用于制备，小柱子进行分析。5、开机使用pumpwash注意：为避免对泵造成损伤，开机运行后不要立即使用pumpwash，应先用低流速走几分钟。保证抽过泵头后