泉州医高专免疫学检验习题集酶免疫技术

1、第9章酶免疫技术一、选择题【A1型题】1. HRP的酶活性基团是A.糖蛋白B.亚铁血红素C.白蛋白D.球蛋白E.色氨酸2. 关于酶免疫技术的特点，正确的是A.酶标记物催化抗原反应，使其结果放大，提高了检测的灵敏度B.酶活性易受理化因素的影响，酶标记物稳定性差C.选择高质量的标记用酶是建立酶免疫技术最重要的前提D.底物以酶催化后的成色，使酶标记免疫反应结果得以放大E.酶免疫技术检测方法较为繁琐3. HRP的RZ值表示的是A.HRP在403nm与275nm的OD值之比B.HRP在420nm与275nm的OD值之比C.HRP在403nm与300nm的OD值之比D.HRP在275nm与403nm的OD

2、值之比E.HRP在290nm与275nm的OD值之比4. 目前ELISA中应用最广泛的底物是A.OPDB.ABTSC.TMBD.5-ASAE.p-NPP5. EMIT主要用于何种物质的测定A.大分子抗原B.小分子抗原或半抗原C.多克隆抗体D.单克隆抗体E.补体6. ELISA双抗体夹心法是A.酶标记特异性抗体用于抗原的检测B.属于竞争结合测定C.先将待测抗原包被于固相载体上D.标记一种抗体可检测多种抗原E.能用于半抗原物质的测定7 捕获法主要用于何种物质的测定A.IgGB.IgAC.IgMD.IgDE.IgE8. 下例何种方法用一种标记物可检测多种被测物A.ELISA双抗体夹心法B.ELISA

3、竞争法C.放免疫法D.ELISA捕获法E.ELISA间接法9. 用于标记的HRP，下面哪一项描述是正确的A.HRP是由具有酶活性的糖白主酶和无酶活性的亚铁血红素辅基构成B.根据HRP的RZ值可判断酶活性的高低C.HRP对酶催化反应中的受氢体专一性要求不高D.酶变性后，其RZ值不变E.HRP的底物为对-硝基苯磷酸酯 10. ELISA中的双位点一步法试验时，造成抗原测定值低于实际含量或假阴性的常见原因是A.固相抗过多B.待测物过浓C.标记抗体过多D.反应时间不够E.洗涤不彻底11. 酶免疫技术是根据何种特性分为均相和异相两类技术的A.抗原特性B.抗体特性C.抗原抗体反应后是否需要分离结合和游离酶

4、标记物D.酶的稳定性E.载体特性12. 关于均相酶免疫测定，以下哪一项是正确的A.多用于大分子物质的测定B.酶标抗原和抗体在固相载体表面形成复合物，作用于底物显色C.需要分离结合和游离酶标记物D.常利用酶标记抗原与抗体结合后的空间位阻降低酶活性E.酶标抗原与待测抗原竞争结合抗体，故最终酶活力的大小与标本中抗原量呈负相关13. 关于ELISA竞争法，下列叙述正确的是A.用于检测抗原B.被测物与酶标记物的免疫活性各不相同C.被测物多则标记物被结合的机会少D.待测管的颜色比对照管的浅则表示被测物量少E.结合于固相的酶标记抗原量与被测抗原量成正比14. 碱性磷酸酶AP常用的底物A.OPDB.TMBC.

5、p-NPPD.ABTSE.5-ASA15. 下述哪一种ELISA最常用于抗原的测定A.双抗体夹心法ELISAB.间接法ELISA C.竞争法ELISAD.捕获法ELISA E.补体结合法16. ELISA间接法是用于A.酶标记抗原用于检测抗体B.酶标记抗抗体用于检测抗体C.酶标记抗抗体用于检测抗原D.酶标记抗体用于检测抗原E.酶标记抗原用于检测抗原17. HRP催化的反应式为DH2+H2O2D+2H2O，何者习惯上被称为底物A.DH2B.H2O2C.DD.H2OE.酸性磷酸酶18. TMB经HRP作用后，加入硫酸终止反应后变为A.绿色B.红色C.橙黄色D.黄色E.蓝色19. 酶免疫分析技术中常

6、用于标记的酶有 EA.辣根过氧化物酶和过氧化氢酶B.碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶C.半乳糖苷酶D.过氧化氢酶E. B和C20. 以下哪些方法属于均相酶免疫技术A.捕获夹心法B.酶放大免疫测定技术C.ELISA夹心法D.斑点-ELISAE.ELISA竞争法【A2型题】21. 下列哪项不符合ELISA中固相载体的要求A.结合抗体或抗原的容量大B.抗原或抗体与其结合后，应保持免疫活性C.固相方法简便易行，快速经济 D.对蛋白吸附能力E.抗原或抗体与其结合后失去免疫活性22. 下列关于双抗体夹心法原理，不正确的是A.使用分别针对抗原不同决定簇的两种单克隆抗体作为酶标记物B.一种单克隆抗体作为固相抗体，另

7、一种作为酶标抗体C.可使标本和酶标抗体同时加入成为一步法D.用于检测二价或二价以的抗原E.采用高亲合力的单克隆抗体可提高检测的灵敏度和特异性23. 下面哪项不属于HRP的底物A.OPDB.TMBC.4MUGD.ABTSE.5-ASA24. 不属于ELISA试剂要求的是A.选择酶制剂时，酶的RZ值比酶活力指标更重要B.选择抗体要求具有高的比活性C.底物应颜色变化明显，反应终止后颜色稳定D.载体要示吸附性好，空白值低、透明度发E.抗原要求纯度高，抗原性完整25. 下面哪项不属于ELISA标记酶必须具备的特异性A.有可与抗原、抗体结合的基团B.标记抗原后，酶活性保持稳定C.当酶标记原与抗体结合后，酶

8、活性可出现激活或抑制D.酶催化底物反应一生成的信号易于测定、重复性好E.标记抗原后，不影响抗原的免疫活性【B1型题】（26-27题共用备选答案）A.HRPB.APC.半乳糖苷酶D.过氧化氢酶E.酸性磷酸酶26. 从植物辣中提取的是27. 大肠肝菌或小牛肠粘膜提取的是（28-30题共用备选答案）A.间接法B.双抗体夹心法测抗原C.竞争法测抗体D.捕获法E.竞争法测抗原28. 以下示意图是哪一种ELISA检测模式29. 以下示意图是哪一种ELISA检测模式30. 以下示意图是哪一种ELISA检测模式二、 名词解释 1.ELISA2.封闭（blocking）3.异相酶免疫测定（heterogenou

9、s enzyme immunosassay,异相EIA）4.包被（coating）5.均相酶免疫测定（homogenous enzyme immunosassay）三、 简答题1.试以ELISA为例，简述建立酶免疫实验方法的主要研究内容。2.简述酶免疫技术的分类。3.简述双抗体夹心法的原理。4.简述ELISA的基本原理、方法类型及应用。5.简述均相酶免疫测定的原理。参考答案一、选择题1.B 2.D 3.A 4.C 5.B 6.A 7.C 8.E 9.D 10.B11.C 12.D 13C 14.C 15.A 16.B 17.B 18.D 19.E 20.B 21.E 22.A 23.C 24.

10、A 25.C 26.A 27.B 28.A 29.B 30.C二、名词解释1.ELISA：全称为酶联免疫吸附试验，它是将抗原或抗体包被在固相载体表面，然后加入待测抗体或抗原和酶标抗原或抗体，反应后用洗涤的方法使结合在固相上的抗原抗体复合物与未结合的物质分离，最后加入底物，根据酶对底物催化的显色反应程度而对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的分析方法。2.封闭：是指在抗原或抗体包被ELISA板后，用1%5%牛血清蛋白或5%20%小牛血清再包被一次，以消除固相载体表面未吸附的位点，以防止非特异性吸咐。3.异相EIA：是指在酶免疫测定中，抗原抗体反应中，需分离游离的和与抗原（或抗体）结合形成复合物的酶

11、标记物，然后对经酶催的底物显色程度进行测定，再推算出样品中待测抗体（或抗体）的含量的方法。又可分为液相和固相酶免疫测定两种类型4.包被：是指将抗原或抗体结合在固相载体上的过程。5.均相酶免疫测定：均相法是利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变的原理，可以在不将结合和游离酶标记物分离的情况下，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。主要用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定。三、 简答题1. 试以ELISA为例，简述建立酶免疫实验方法的主要研究内容。答：ELISA是固相酶免疫的代表，此实验涉及以下几个方面的问题：酶标记物是酶免疫技术的核心组成部分，因此用于制备酶

12、标记物的抗原要求纯度高，抗原性完整；抗体则不仅需要特异性好、效价高、亲合力强以及比活性较高，而且还需要能批量生产和易于分离纯化。标记的酶要求活性高，稳定，标记后不影响抗原抗体的活性，作用专一性强，无害、价廉等优点。选用好的交联剂和交联方法制备出高质量的酶标记物。选用合适的酶作用底物。筛选有效的分离结合与游离酶标记物的方法。优化实验步骤。2. 简述酶免疫技术的分类。答：酶免疫技术按实际用途，分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类。酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需将结合和游离的酶标记物分离，分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定，异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。3. 简述双抗体夹心法

13、的原理。答：其基本工作原理是利用连接于固相载体上的抗体和酶标抗体可分别与待检标本中被测抗原上两个不同的抗原决定簇结合，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物。由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的。因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。测定复合物中酶作用于加入底物后生成的有色物质量，即可确定待检抗原含量。4. 简述ELISA的基本原理、方法类型及应用。答：基本原理是抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面；测定时，将待测样品（含待测抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成抗原或抗体复合物；反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量（免疫复合物）与待测标本中待检抗体或抗原的量成一定比例；经洗涤去除反应液中其他物质，加入底物进行显色，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。方法类型及应用：双抗体夹心法：用于检测抗原，适用于检测两个或两个以