上海交通大学遗传学上午6组果蝇杂交实验

1、果蝇杂交实验方案汇报人：谢思骏、黄柏如、 黎宇航、杨文斌1.实验的目的：1.1 验证基因伴性遗传 的规律1.2 验证基因连锁与交 换规律并计算重组值1.目的黑腹果蝇，Drosophila melanogaster1黑腹果蝇生活史2黑腹果蝇的饲养方法3研究的性状及显隐性42.实验材料： 黑腹果蝇也称黑尾果蝇（学名：Drosophila melanogaster），是被人类研究得最彻底的生物之一，为模式生物。其名字源于它喜好腐烂的水果以及发酵的果汁黑腹果蝇黑腹果蝇科学分类：界：动物界 Animalia门：节肢动物门 Arthropoda纲：昆虫纲 Insecta亚纲：有翅亚纲 Pterygota目

2、：双翅目 Diptera科：果蝇科 Drosophilidae属：果蝇属 Drosophila种：黑腹果蝇 D. melanogaster第一季度单击编辑副标题性别鉴别1黑腹果蝇雌性体长2.5毫米, 雄性较之要小。雄性腹部有黑斑 (black patch), 前肢有性梳 (sexcombs)，而雌性没有, 可以此来作区别。第一季度单击编辑副标题突变形状鉴别1黑腹果蝇生活史2果蝇的生活周期长短与温度有密切的关系。雌蝇可以一次产下5个0.5毫米大小的卵，总共约400个。它们有绒毛膜和一层卵黄膜包被，其发育速度受环境温度影响。10C15C20C25C卵幼虫 57天 18天8天5天幼虫成虫6天4天生活

3、周期长短与饲养温度的关系黑腹果蝇生活史2果蝇在25C，从卵到成蝇需要十天左右，成虫可活2633天。果蝇生活史如下图：黑腹果蝇的饲养方法3果蝇以酵母菌为主要食料，凡能发酵的基质都可做为果蝇饲料。实验室里主要用玉米。原种每2-4周换一次培养基，看到幼虫后就将成虫赶去。各品系之间避免杂交研究的形状及显隐性4 本次的研究野生型黑腹果蝇： 红眼、长翅、直刚毛（+、+、+）突变型黑腹果蝇： 白眼、小翅、卷刚毛（ww、mm、snsn）亲本的纯种培养1遗传式2果蝇杂交33.实验技术流程P XwXw X XWY F1 XWXw X XwY F2 0.25 XWXw：0.25 XwXw：0.25XWY：0.25

4、XwY遗传式-伴性遗传P wmsn/wmsn X +/Y F1 wmsn/+ X wmsn/Y F2 待测遗传式连锁与交换亲本的纯种培养1伴性遗传的观察2伴性遗传的进一步观察3连锁与交换的观察42.实验步骤亲本的纯种培养亲本饲养瓶的准备a. 饲料配制：根据上表，取应加水量的一半，加入琼脂，煮沸，待充分溶解后加糖煮沸溶解取另一半水混合玉米粉，加热，调成糊状。将上述两者混合，煮沸。待稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分调匀分装。水/ml琼脂/g蔗糖/g玉米粉/g酵母粉/g丙酸/ml玉米饲料2001.513171.41亲本的纯种培养亲本饲养瓶的准备b饲料瓶的准备取中型指管，以纱布包的棉花球做瓶塞。消毒后加入

5、饲料，冷却后用酒精棉花擦拭内壁，插入消毒过的吸水纸作为幼虫化蛹的干燥场所。亲本的纯种培养亲本饲养瓶的准备c. 亲代果蝇挑选将两个品系的果蝇麻醉后挑选外观完整健康的野生型果蝇4对，突变型8对，扫入准备好的饲养瓶中培养。 雌雄果蝇的区分：在肉眼看来,雄果蝇的尾部有黑点,较尖.雌果蝇的没有,是白的,较圆显微镜下雄果蝇的第一对腹肢上有性梳,和梳子长得很像。亲本的纯种培养果蝇的麻醉与转瓶先将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲，使之全部震落在培养瓶底，然后迅速打开培养瓶塞，将果蝇倒入去盖的麻醉瓶中，然后立即塞上棉塞。稍微打开棉塞，并在其上滴加23滴乙醚。待呈昏迷状态（附肢收缩，双翅紧贴背部）后将其倒到干净的滤纸

6、上观察。观察过程中如若果蝇醒来则可滴几滴乙醚于滤纸上（不可直接滴在果蝇上），用麻醉皿立即扣住复苏的果蝇，数秒钟后继续观察。观察结束后，用毛笔将果蝇扫入平放的培养瓶中，待其醒来后才可将瓶竖起伴性遗传的观察杂交用饲养瓶的准备同4.1.1 a、b伴性遗传的观察亲本处女蝇的挑选亲本在25C下培养7天后，即第8天，待瓶中出现蛹并且呈黑色时，将亲本果蝇麻醉弃去。第9天将瓶中的成蝇麻醉并挑出雌性至另一培养瓶，此即处女蝇。此后每12小时挑选一次直至挑出10只处女蝇。伴性遗传的观察雄性果蝇的挑选麻醉野生型果蝇培养瓶中的果蝇，挑选出10只外观完整健康的雄果蝇放入上述处女蝇培养瓶中。伴性遗传的观察 F1代生长情况的

7、观察日期蛹数量 成虫数量 伴性遗传的观察 F1代性状的观察记录及统计红眼白眼总计雄性 雌性 总计 伴性遗传的进一步观察杂交用饲养瓶的准备同4.1.1 a、b伴性遗传的进一步观察杂交亲本的挑选与转瓶子一代瓶中收集30对果蝇（不必再挑选处女蝇），注意区分雌雄，转移至3个新的培养瓶中，每瓶10对，25培养。转瓶：同4.1.2伴性遗传的进一步观察F2代生长情况的观察日期蛹数量 成虫数量 伴性遗传的进一步观察F2代性状的观察记录及统计观察结果统计日期各类果蝇数目白眼红眼白眼红眼其他 连锁与交换的观察杂交用饲养瓶的准备同4.1.1 a、b连锁与交换的观察杂交用饲养瓶的准备子一代瓶中收集30对果蝇（不必再挑选处女蝇），注意区分雌雄，转移至3个新的培养瓶中，每瓶10对，25培养。转瓶：同4.1.2 连锁与交换的观察F2代生长情况的观察日期蛹数量 成虫数量 连锁与交换的观察F2代性状的观察记录及统计表型眼色、翅形、刚毛F2后代数目合 计红眼、长翅、直刚毛 白眼