微生物的生理生化反应ppt课件

1、l在生活细胞中存在的化学反响称之为代谢。在生活细胞中存在的化学反响称之为代谢。l微生物在代谢活动中的生理生化反响呈现出很微生物在代谢活动中的生理生化反响呈现出很大的多样性。大的多样性。l淀粉的水解实验淀粉的水解实验l糖发酵实验糖发酵实验l吲哚、甲基红、吲哚、甲基红、V-P V-P 反响反响l微生物对大分子的淀粉不能直接利用，必需靠产生的胞外淀粉酶将其分解后才干吸收利用。l微生物的胞外酶如淀粉酶、脂肪酶等将大分子物质的分解过程可以经过察看细菌菌落周围的物量变化来证明。l淀粉遇碘液呈蓝色，但在淀粉被细菌水解的区域，遇碘不再呈蓝色，这可作为细菌产生淀粉酶的证据。 1 1、淀粉的水解实验、淀粉的水解实

2、验l菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌。菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌。l培育基：固体淀粉培育基。培育基：固体淀粉培育基。l溶液或试剂：卢戈氏碘液。溶液或试剂：卢戈氏碘液。l器材：无菌培育皿，接种环，试管架。器材：无菌培育皿，接种环，试管架。操作步骤： 1无菌操作制备淀粉固定培育基平板。 2将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌分别在同一平板不同的部分划线接种，在平板的反面分别写上菌名。 4将平板倒置在37温箱中培育24h。 5察看各种细菌的生长情况。滴入少量卢戈氏碘液于平皿中,悄然旋转平板,使碘液均匀铺满整个平板。+枯草大肠结果：将结果填入下表。“表示阳性，“表示阴性。菌名枯草芽孢杆菌大肠杆菌淀粉水解实验2 2、

3、糖发酵实验、糖发酵实验l糖发酵实验是常用的鉴别微生物的生化反响。某些细菌能利用糖类作为碳源和能源，使糖类分解而产酸产气或产酸不产气。不同种的细菌对于各种糖类利用才干不同，分解产物也不同。l大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；l普通变形杆菌只能分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。l伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖。 1.菌种：大肠杆菌，普通变形杆菌斜面各一 支。 2.培育基：葡萄糖发酵培育基试管和乳糖发 酵培育基试管各3支内装有倒置的杜汉氏 小管。 3.仪器或其他器具：试管架，接种环等。 产酸指示剂、倒置小管l1.用标签纸在各试管外壁上分别标明发酵培育基称号和所接种的细菌菌名。l2.取

4、葡萄糖发酵培育基试管3支，分别接入大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为对照。l另取乳糖发酵培育基试管3支，同样分别接入大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为对照。l在接种后，轻缓摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。l 3.将接种过和作为对照的6支试管均置37培育2448h。l 4.察看各试管颜色变化及杜汉氏小管中有无气泡。l实验报告l 将结果填入下表。“+表示产酸或产气，“-表示不产酸或不产气。l糖类发酵大肠杆菌普通变形杆菌对照葡萄糖发酵乳糖发酵l吲哚实验吲哚实验indol testindol testl甲基红实验甲基红实验methyl red testmethyl red

5、testlV.P.V.P.反响反响Voges-Prokauer testVoges-Prokauer testl了解实验原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。l吲哚实验、甲基红实验、伏-普实验主要用来鉴别大肠杆菌与产气肠杆菌Enterobacter aerogenes。l主要是用于水的细菌学检查，由于大肠杆菌虽非致病菌，但在饮水中假设大肠杆菌超越一定数量那么表示受粪便污染；l而产气肠杆菌那么广泛存在于自然界中，因此，检查水时要将二者区分开来。 l有些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。吲哚与对二甲基氨基苯甲醛结合，就会构成红色的玫瑰吲哚。l色氨酸水解反响l吲哚与对二甲基氨基

6、苯甲醛反响l大肠杆菌吲哚反响阳性，产气肠杆菌为阴性。l某些细菌在糖代谢过程中，将培育基中的糖分解为甲酸、乙酸、乳酸等，使培育基变酸，参与培育基中的甲基红指示剂pH4.2红色-6.3黄色，可使培育基由原来的桔黄色变为红色，即甲基红阳性反响。l大肠杆菌发酵葡萄糖产酸;l产气肠杆菌将有机酸转化为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等。l某些细菌可利用葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进展缩合，脱羧变成乙酰甲基甲醇，此物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成红色化合物，即伏-普反响阳性，没有红色化合物产生那么为阴性。l产气肠杆菌伏-普反响阳性，大肠杆菌伏-普为阴性。 l菌种

7、大肠杆菌，产气肠杆菌；l培育基 蛋白胨水培育基，葡萄糖蛋白胨水培育基；l溶液或试剂 甲基红试剂，40KOH，5-萘酚，乙醚，吲哚试剂等。l1接种与培育l (1)将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接种于2支蛋白胨水培育基中做吲哚实验，置37温室中培育2天。l (2)将上述二菌分别接种于2支葡萄糖蛋白胨水培育基中做甲基红实验与伏-普实验，置37温室培育2天。l2察看结果l (1)吲哚实验l 于培育48小时后的蛋白胨水培育物内加34滴乙醚，摇动数次，静置13分钟，待乙醚上升后，沿管壁徐徐参与2滴吲哚试剂，在乙醚和培育物之间产生红色环状物为阳性反响。l (2)甲基红实验l 培育48小时后，将葡萄糖蛋白胨水培育物分为两小管其中一管留做伏-普实验，在一管内加甲基红试剂2滴，培育基变红色者为阳性，黄色者为阴性。 (3)伏普实验 培育两天后，将另一支葡萄糖蛋白胨水培育物内参与510滴40KOH，然后参与等量的5-萘酚溶液，用力振荡，再放入37温箱中保温1530min，以加快反响速度。培育物呈红色者，为阳性。1结果将实验结果填入下表。“+表示阳性反响；“-表示阴性反响。菌名吲哚实验甲基红实验 伏普实验大肠杆菌产气肠菌对