公开课基因工程郝世强课件

1、公开课基因工程郝世强距高考距高考24天天，冲啊冲啊！公开课基因工程郝世强基因工程考前冲刺基因工程考前冲刺 主讲教师主讲教师：郝世郝世强强公开课基因工程郝世强1.不同生物间基因移植成功，说明生物共有一不同生物间基因移植成功，说明生物共有一套套 ，从进化的角度看，这些生物具，从进化的角度看，这些生物具有有 。2.这个特点说明了：这个特点说明了：遗传密码遗传密码 共同的原始祖先共同的原始祖先酶具有专一性酶具有专一性公开课基因工程郝世强5.直接分离基因直接分离基因“鸟枪法鸟枪法”最大的缺点是工作量最大的缺点是工作量大，大， 。6.6.人工合成基因法人工合成基因法 逆转录法：以信使逆转录法：以信使RNA

2、RNA为模板，在为模板，在 的作的作用下将脱氧核苷酸合成合成用下将脱氧核苷酸合成合成DNA(DNA(基因基因) )。 直接合成法：根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信直接合成法：根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使使RNARNA核苷酸顺序，再据此推算出基因核苷酸顺序，再据此推算出基因DNADNA的脱氧核的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。带有带有一定一定的盲目性的盲目性逆转录酶逆转录酶公开课基因工程郝世强7.基因运载体必须具备的条件基因运载体必须具备的条件 8.基因工程育种与传统育种技术相比，具有的优点是基因工程育种与传统育种技术相比，具有

3、的优点是9.在将质粒导入细菌时，一般要用在将质粒导入细菌时，一般要用 处理细菌，处理细菌，以增大细菌细胞壁的通透性。以增大细菌细胞壁的通透性。10.10.培育转基因动物，受体细胞一般选用培育转基因动物，受体细胞一般选用 。 a.能够在宿主细胞内复制并稳定的保存能够在宿主细胞内复制并稳定的保存 b.据多个限制酶切点，以便与外源基因连接据多个限制酶切点，以便与外源基因连接 c.具有标记基因，便于进行筛选具有标记基因，便于进行筛选育种周期短，目的性强，能克服远缘杂交不亲和障碍等。育种周期短，目的性强，能克服远缘杂交不亲和障碍等。氯化钙氯化钙受精卵受精卵公开课基因工程郝世强 “基因剪刀基因剪刀” “基

4、因针线基因针线” “基因的运载体基因的运载体”公开课基因工程郝世强基因操作的工具基因操作的工具1.1.基因的基因的“剪刀剪刀”限制性内切酶（限限制性内切酶（限制酶）制酶）一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将列，并在特定的切割点上将DNA DNA 分子切断。分子切断。专一性专一性公开课基因工程郝世强限制性内切酶限制限制酶酶公开课基因工程郝世强、基因的针线、基因的针线DNADNA连接酶连接酶作用部位：作用部位：磷酸二酯键磷酸二酯键作用：作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来将互补配对的两个黏性末端连接起来作用对象：作用对象：DNADNA片

5、段片段类别类别限制酶限制酶DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用底物作用底物 DNA分子分子DNA片段片段脱氧核苷酸脱氧核苷酸DNA分子分子作用部位作用部位 磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键氢键氢键作用结果作用结果 形成黏性末端形成黏性末端或平末端或平末端形成重组形成重组DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子分解成两条分解成两条单链单链DNADNA分子分子 公开课基因工程郝世强3 3、基因的运输工具、基因的运输工具载体载体常用常用运运载体载体受体细胞受体细胞种类种类来源来源质粒质粒细菌细菌细菌、动植物细胞等细菌、动植物细胞等病毒病毒细菌病毒（噬菌

6、体）细菌病毒（噬菌体）细菌等细菌等植物病毒植物病毒植物细胞植物细胞动物病毒动物病毒动物细胞动物细胞公开课基因工程郝世强提 取 目 的提 取 目 的基因基因目的基因与目的基因与运载体结合运载体结合目的基因导入目的基因导入受体细胞受体细胞目的基因的目的基因的检测和表达检测和表达基因工程基本操作步骤基因工程基本操作步骤公开课基因工程郝世强检测目的基因是否表达检测目的基因是否表达：分子水平分子水平：受体细胞是否产生特定的蛋白质：受体细胞是否产生特定的蛋白质个体水平个体水平：受体细胞是否表现出特定的性状：受体细胞是否表现出特定的性状 目目的的基基因因的的检检测测类型类型检测内容检测内容方法方法分分子子检

7、检测测导入导入检测检测目的基因是否进入受目的基因是否进入受体细胞体细胞DNA分子杂交分子杂交(DNA和和DNA之间之间)转录转录检测检测目的基因是否转录出目的基因是否转录出mRNA分子杂交分子杂交(DNA和和mRNA之间之间)翻译翻译检测检测目的基因是否翻译成目的基因是否翻译成蛋白质蛋白质抗原抗原抗体杂交抗体杂交个体水个体水平平检测检测包括做抗虫、抗病的接种实验，包括做抗虫、抗病的接种实验，如饲喂法、感染如饲喂法、感染法等法等公开课基因工程郝世强（ 第一步水解第一步水解产物（单位产物（单位bp）第二步水解第二步水解产物（单位产物（单位bp）A酶切割酶切割2100将第一步水将第一步水解分离后，解分离后，分别用分别用B酶酶切割切割1900 200 1400800 60010001000500500B酶切割酶切割2500将第一步水将第一步水解产物分离解产物分离后，分别用后，分别用A酶切割酶切割1900 6001300800 50012001000 200经经A酶和酶和B酶同时切割酶同时切割1900 1000 800 600 500 200公开课基因工程郝世强公开课基因工程郝世强 公开课基因工程郝世强 基因工程（基因工程（1）2.（6）重组质粒、质粒重组质粒、质粒 核区（大型环状