(完整word版)ABI7500-2.0软件使用指南0223XIE.doc

1、打开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power 绿色状态。首先，双击电脑桌面上的图标打开程序，打开程序单击OK ，待软件连接仪器并测试校准状态后（若有出现连接失败可尝试重启电脑，检查USB 线接口），出现如下界面，单击 Design Wizard 选项，红色箭头指示位置有个下拉菜单，下拉菜单中有一个Advanced Setup（高级设置）选项，如箭头所示：点击这个选项，可以进入下面这个界面，如上图所示，红色箭头从上到下指示的分别是（带 * 号 的必需填）实验名称、 仪器型号和 反应程序类型。而这个图是上面图的延续（自己电脑显示不完全） ，红色箭头从上到下指示的分别是 Plate Setup 选

2、项、 探针类型和 程序应用速度类型 ，一般使用的探针就是 TaqMan 探针，速度类型选择默认就可以了 （如果是 7500fast 的话则有快速模式可以选择） 。下一步我们可以看到左上角的红色箭头指示的一个 Plate Setup 选项 ，点击这个选项， 就可以进入下一个设置界面。红色箭头 和 指的是设定反应探针和反应样品名称，HBV ,HCV, 或以公司名称DAAN 、 KHB 。）箭头 处可以填写反应探针名称（如箭头 是选择报告荧光，一般使用的发光基团是使用的是 TAMRA 荧光，科华现在使用的是FAM ，箭头 是选择粹灭荧光，达安现在 BHQ ，在这个仪器中无此选择项，那么就选择none

3、。箭头 处可以填写样品名称。 点击箭头 和箭头 处可以添加反应探针体系名称和样品名称。箭头 和箭头 是选择对应探针体系和对应样品的曲线颜色，可选择也可以不选。（另：探针跟样品设定后可保存，方便以后实验调用，具体是点击箭头 下面的SavedTaeget，下次调用则点击Add Saved 。就可调出。 ）为了方便讲解，我假定有 1 个反应探针 DAAN 和 1 个样本 HBV1 ，如上图所示。设定完成之后，我们点击红色箭头所指的选项，进入下个界面。在上图， 我们可以看到一个类似反应板的界面， 黑色箭头指示的有玫瑰红色下划线那一排在选定反应孔后会显示出样本孔总数， 标准品总数和阴性对照总数。 从黑色

4、箭头可以看出暂时还有 48 个反应孔空余。蓝色箭头和分别是放大这个孔板界面的按钮，蓝色箭头是显示大小还原默认设置按钮。开始设置时；首先我们如红色箭头所示选定A1 孔，红色箭头指示的是反应探针名称，红色箭头指示的样品类型，选定反应体系后可以在U未知样本， S标准样本， N阴性样本 中选择一个。 红色箭头是个下拉菜单可以选择反应探针，在红色箭头指示的框里单击鼠标， 显示打钩就说明选定了反应体系。红色箭头指示的是样品名称，红色箭头是个下拉菜单可以选择样品名称。在红色箭头指示的框里单击鼠标，显示打钩就说明选定了样品名称。 红色箭头指示的参比荧光，仪器默认是ROX ，但是产品一般没有添加ROX 荧光，

5、所以必须选择 None。红色箭头指示的定量标准品的设置，可根据标准曲线的值从 4567 升序或是从 7654 降序的排列，单击可弹出以下界面，具体如下。上图中，红色箭头表示标准品的数量，表示标准品是否走重复孔，表示起始的浓度，表示 10的话则为升序，按照4567 的浓度； 1:10 的话则为降序，按照7654 的浓度。例如做了4 个标准品，每个标准品做1 个（即没有做复孔） ，起始浓度为10000，选择 10，选择箭头的自己选择孔位，点击左下角的Apply ，则在第 10 排按照 4567 次方的顺序排列。 。此外也可以选择鼠标双击类似反应孔板的那个界面，会出现下面这个界面:如上图所示，选定反

6、应孔双击后会出现这样一个界面，红色箭头指示的Task样品反应类型，红色箭头是指示的是Target反应探针，红色箭头指示的是Sample样品名称。这三个都是下拉菜单，可以选择前面设置好的反应体系和 样品名称。红色箭头是个文本框，可以备注样本的详细信息。 按照样本放置的实际情况设置好之后， 可以点击红色箭头指示的 Run Method 选项进入下个界面上图的箭头是设定反应体系体积的，箭头是添加反应程序阶段的，箭头是添加反应程序步骤的， 箭头和是制订收集荧光信号的标志，例如箭头所示高亮显示时表示在此步骤收集荧光信号。 （切记，收集荧光只能1 个地方，若是出现2 个收集荧光信号的，则软件上会有出现蓝色

7、的错误提示）设定好循环条件，就可以进行模板保存，以便下次实验时调用程序，点击位于软件中间最右方的键（注：这个键是由于本人电脑不是宽屏的（ 14 寸 acer。），如果是 AB 配的 E6500电脑则可以在软件上全部显示，不会出现键或是那些滑动条，但是。字体会小点，），选择保存运行的模板，命名。下次实验使用的时候就不用再在设条件，直接点击 method ，调出你所需要做的实验的扩增条件。open run还有上图左方的reaction setup（反应体系设置）和materials list （耗材清单）不需要我们去设置。点击箭头 所指的 run 进入运行界面。直接点击上图中的绿色 START 按钮，根据提示保存实验文件后开始实验，实验开始后在绿色 START 按钮 右方可出现实验的预计剩余时间。箭头表示的是实时的曲线图谱，表示的是实时的温度曲线图谱，表示的是实验的条件。实验结束后按箭头 所指的分析，出现以下界面。做完实验后，曲线会出现在上图，以对数图谱的形式出现，若想换为线性图谱，可点击箭头 所指示的去选择log 或 linear，其次，再点击箭头 的分析按钮（有实验数据的话会出现的是 analysis），样本的结果跟CT 会在右边的96 孔面板中出现，上面的显示不完全，曲线的基线 baseline 跟阈值 threshold 设置是在上图数字 下