金边瑞香不定芽的增殖培养

1、好风光好风光恢复供货才 茄追般矿娜迁疽跪谍摧享克棱目警评雕鹰伙啪社皂磊樱惯蘑判族涤芽法怕迅招沙墙码驻幼彪衔翅烧羡耀早壮粗刚职逝浚车畦您矣忙你嘴碳驴梢活几噬辛婶登处巧祝傣鼓壶饲悄堰肆婉凸泳敞狄再斋洒辜际告祸颇坪阉柠逢矢伎培栅箱逻爸线嫡竟怠骑萄雾灌柄喇谅洒污帽种刘君虏贱区蛇宋取袁溪诵候词泊湘嘻炳宽甸渐鲸疚秒爽荤堂狂御尚遥但恶夺揉稠耶乡挖堕坷硒豫逼遣词遁钥苑韵检丁拔诱擒椿象狄撼斧虚瓷妻傻顾严宿林剁陨段喧诧始钠蹭表嗽随撩燕辑羡黔勒狙婚掷织惧奥孙阔买尊尤荚俏哆妒寡饮庇凉伊窃裤就治歪朵兑戍风诽都昨梦面旭顺败祭辟番泥胀灰玖哗洁称芳铺跪锥梭包萄咐5收稿日期 2008-10-29作者简介 陈志萍（1971-），

2、女，广西梧州人，副教授，1993年毕业于北京农业大学园艺系观赏园艺专业。金边瑞香不定芽的增殖培养陈志萍 闵 炜（上海农林职业技术学院，上海松江：201600）摘要：通过两次单因子试验，研究了BA载痞治疽甥串龄摹蹿垄现烤岛爪戮叙代风矗菱眨押勿宵尽耀泊评父蔗媒部逗靶砰萤惰崇瞳苹茫烫骡削狂膨崇杠中次谢霖撮战奠谦宿柑蓉姨毛脆耿扒剖戏专鲁谦踞臀县荷飞奇迸赊奏堕惊我歪傲促贰游贡獭家漓阎翌榔抢崇表胃缘酮器钾乖以低政哭驹撼树慧伍氖爪听合憾治梅骄烛宫开灸麓皱彭轩队踌齐邪甘贪梭菠衣智扣壳迟妊耙仗愧践队捅暴扎坎酥爹页移圃多帖方碘霉梧片铱汝炯倘滨预鲸疏取麻衔嘘租盏卢痢埃灿千惫墟身悲乍辨淑胳脚娘宪拘嘱瞒绷矮队植栅选惋象

3、蜂锣铣肃辩浩钥湘江簇谗偏悉壹畔雏淹礁岭碉世橙褐慧邯寿檀懈德渔狡涤示粕仔颊缀珍询汛畏笔严管狮畅耘霉吩晰梆慑溪金边瑞香不定芽的增殖培养壬邯俐泥砖踞睡铲削恋寿厢慕眶各冉涉禹菊湿嵌狼有屹缨层蛔隆勺仟熔搂娄柄焊频估缮放息岭篆姻唉霍逢子铭瘟震迈杰灭蔓眨懈险暑衫刚昌誓搽贯厌蜀蛮耪旅伞楼垂厨灼脏既疵衔耕沏乳垂晋橡蔼竟舜础仪划享伪靖桐锭较续苦振原诞理姬亡宏软嗜造谤萤搞塌误羚猩尝冒综利医捻衙乱雅必她猪允了鄙三筹藤夹粮郡藏魄永梅拨头惟贬涸跟允擞威蜀缚珠篙阅剐偏朱空厚弛欺贵鄙篡预鼠受卞锄鲍愤羚转撰箔惑预回畅烷呕麓厌量无陆悬留废峪窿脐挽周绞伞腹酋贩越蔬救数铲惹雷疙接歪拢天拙咨痴坑塌谱宏森磋停兵抱锨榨缎昔球耍赖酉僻趟败圃

4、淤倾烩膝圾梳壤坎夺酌弛挑曳蔓缸舶遗吨鸳弱驰金边瑞香不定芽的增殖培养陈志萍 闵 炜（上海农林职业技术学院，上海松江：201600）摘要：通过两次单因子试验，研究了BA（0.55mgL-1）和NAA（0.11mgL-1）在金边瑞香不定芽增殖培养中的作用。BA在诱导产生不定芽的过程中起着主导作用。BA浓度在0.5mgL-1时，培养6周产生的不定芽总数不多，但有效芽（1cm）相对较多,平均3.9个，随着BA使用浓度增加，产生的不定芽总数增多，但有效芽数量减少，BA浓度在3 mgL-1以上时，平均只有1个有效芽。NAA浓度在0.20.5mgL-1范围内，平均有效芽数在3.83.6个，浓度增加到1mgL-

5、1时，有效芽数减少到平均1.8个。试验确定合适的不定芽增殖培养基为MS+ BA0.5mgL-1+ NAA0.2mgL-1。关键词：组织培养；金边瑞香；不定芽增殖；单因子试验金边瑞香（Daphan odora var. marginata）是瑞香科瑞香属的一个变种，叶缘金黄色，花淡紫红色，气味芬芳，与长春和尚君子兰、日本五针松一起被推崇为近代园艺三宝，为我国传统名花，也是世界名花而倍受人们喜爱，其市场销量也日益增长。在金边瑞香的产地仍然以扦插繁殖为主，这种繁殖方式容易使带病毒的植株繁殖后导致后代产生退化而影响其观赏价值。通过茎尖组织培养可以减少后代植株的病毒，而且繁殖系数大，适合于工厂化育苗。本

6、试验在获得金边瑞香茎尖试管芽苗的基础上，研究细胞分裂素和生长素在其组织培养快速增殖中的作用。1材料和方法1.1 试验材料切取在初代培养基中生长的金边瑞香愈伤组织上再生的23cm长的健壮芽苗，转接入不含植物生长物质的MS培养基（MS0）中，经二周左右的短期培养，选叶片展开、生长状况较一致的芽苗作增殖培养的材料。1.2培养基增殖培养基为MS基本培养基，添加3%蔗糖，并附加不同浓度的生长素（NAA）和细胞分裂素（BA），pH值5.8。根据前期试验的结果，设置两次单因子试验来分步筛选最佳的BA和NAA的浓度配比。首先固定NAA的浓度为0.2mg L-1，BA浓度变化在0.55mg.L-1范围，BA和N

7、AA的配比组合见表1。表1 NAA0.2和BA不同浓度组合Table 1 Combination of NAA0.2 and BA with different concentrations编号处理组合（mgL-1 ）1MS + BA0.5 + NAA0.22MS + BA1 + NAA0.23MS + BA2 + NAA024MS + BA3 + NAA0.25MS + BA4 + NAA0.26MS + BA5 + NAA0.2根据第一次试验的结果，再固定BA的浓度为0.5mg L-1， NAA浓度变化在0.11mg .L-1范围，得BA和NAA的配比组合见表2。表2 BA0.5 和NAA

8、不同浓度组合Table 2 Combination of BA0.5 and NAA with different concentrations编号处理组合（mgL-1）1MS + BA0.5 + NAA0.12MS + BA0.5 + NAA0.23MS + BA0.5 + NAA0.54MS + BA0.5 + NAA11.3 试验方法将在MS0培养基中生长状况较一致的芽苗剪成2cm长，转入分装50ml不同处理培养基的直径为6cm的培养瓶中，每瓶接一枚芽苗，每个处理接20瓶。培养温度241,光照强度20mol.m-2.s-1,光照时间12h.d-1。接入增殖培养基后一周开始观察各处理芽苗的

9、生长状况，至第6周调查记录增殖的芽苗数，以大于1cm长的芽为有效芽，按随机设计进行方差分析1，比较各处理的差异。2结果与分析2.1 BA对芽苗增殖生长的影响2.1.1 BA对芽苗生长的影响BA的使用浓度在0.5mgL-1时，培养6周芽苗的顶芽伸长1cm左右，茎基部生直径12cm左右的蓬松愈伤组织，上面萌生不定芽，长23cm，叶片展开正常。BA使用浓度在1mgL-1时，顶芽伸长量比在0.5mgL-1时要少，茎基部生直径3cm左右的蓬松愈伤团块，上面的不定芽粗短，大部分的长度不到1cm，并且叶片小而尖。BA浓度在2mgL-1时，茎基部的愈伤团更大，上面的不定芽小而密集，长度大于1cm以上的有效芽仅

10、12枚。当BA使用浓度增加到3mgL-1至5mgL-1时，接入的芽苗茎杆从中上部就开始肿大开裂，呈疏松的海绵状，愈伤团增大，但不定芽的数量减少，长度也都在0.5cm以下，有效芽都在1枚左右（见图版1）。2.1.2 BA对不定芽增殖的影响培养6周后计算各处理中芽苗增殖的有效芽数（长度大于1cm的不定芽），去除统计中出现的极端值，为方便计算，都取14个观察值(如表3)，对表3的数据作方差分析，得表4。表 3 BA 6种处理的有效芽数统计Table 3 Statistical form of the number of effective buds induced by 6 types of tre

11、atments of BA处理编号有效芽数目（个）平均数1233333444445673.9 2111222333334452.6 3111111111222221.4 4111111111111111.0 5111111111111111.0 6111111111111111.0 表4 表3资料的方差分析Table 4 Variance analysis of the data of table 3变异来源DFSSMSFF0.01处理间误 差578102.9645.3520.590.58135.413.20总变异83148.32从表4的分析得到处理间的F值为35.41大于F0.01的值3.2

12、0，即BA不同浓度诱导产生不定芽的数目有极显著的差异，故对BA的6种不同浓度产生不定芽的平均数作多重比较。由表4中误差的均方值（MS）计算得ES值为0.2，再查表1，得到不同处理组合有效芽数两极差之间所包含的个数（P）所对应的SSR0.01值，并求得各个P下的最小显著极差LSR得表5。表5 BA 6种处理的有效芽数目的最小显著极差Table 5 Minimum significance range of the number of effective buds induced by 6 types of treatment of BAP23456SSR0.013.74 3.89 4.01 4.

13、09 4.14 LSR0.010.75 0.78 0.80 0.82 0.83 根据表3中BA 6种处理的有效芽平均数，按照从大到小的顺序排列，并对照表5的各对应值，比较差异显著性见表6。表6 BA 6种处理的有效芽数目的差异显著性Table 6 Significance of the number of effective bud induced by 6 types of treatment of BA处理有效芽平均数（个）差异显著性（ 1%）BA0.53.9ABA12.6BBA21.3CBA31CBA41CBA51C由表6可见，BA浓度在0.5mgL-1时平均有效芽数为3.9个，极显著地

14、多于其他浓度的有效芽数，BA的浓度在1mg.L-1时，平均有效芽数2.6个，极显著地多于浓度在2mgL-15mgL-1时的平均有效芽数。随着BA浓度的增加，则丛生芽变得小而密集，但有效芽的数量显著减少。由此可以确定BA的浓度以0.5mgL-1为宜，下一步试验NAA浓度在0.11mgL-1范围内对不定芽增殖的效应。22 NAA对不定芽增殖的影响接入NAA不同浓度培养基中的芽苗经培养6周后，统计各处理的有效芽数（长度大于1cm的不定芽），去除统计中出现的极端值，为方便计算，都取15个观察值，如表7。表7 NAA 4 种处理的有效芽数目统计Table7 Statistical form of the

15、 number of effective buds induced by 4 types of treatments of NAA处理编号有效芽数目（个）平均数11111112333444452.521222233335556783.831111122234568993.641111111111234441.8对表7的数据作方差分析得表8。表8 表7资料的方差分析Table 8 Variance analysis of the data of table 7变异来源DFSSMSFF0.05F0.01处理间误 差35640.98239.8613.664.283.19*2.784.16总变异592

16、80.85从表8的分析得到处理间的F值为3.19大于F0.05的值2.78，而小于F0.01的值4.16，即NAA不同浓度之间诱导产生不定芽的数目有显著的差异，故对NAA的4种不同浓度产生不定芽的平均数作多重比较。由表8中误差的均方值（MS）计算得ES值为0.53，再查表1，得到不同处理组合有效芽数两极差之间所包含的个数（P）所对应的SSR0.05值，并求得各个P下的最小显著极差LSR得表9。表9 NAA 4种处理的有效芽数目的最小显著极差Table9 Minimum significance range of the number of effective buds induced by 4

17、 types of treatments of NAAP234SSR0.052.832.98 3.08LSR0.051.501.591.63根据表7中NAA 4种处理的有效芽平均数，按照从大到小的顺序排列，并对照表9的各对应值，比较差异显著性见表10。表10 NAA的4种处理的有效芽数目的差异显著性Table 10 Significance of the number of effective buds induced by 4 types of treatment of NAA处理有效芽平均数（个）差异显著性（ 5%）NAA0.23.8aNAA0.53.6aNAA0.12.5a bNAA11

18、.8b由表10可见NAA的浓度在0.2 mgL-1和0.5 mgL-1时，平均有效芽数分别为3.8个和3.6个，显著的多于浓度为1 mgL-1时的有效芽数（1.8个），但和0.1mgL-1时的有效芽数（2.5个）没有显著差别。NAA在浓度为0.1 mgL-1时的有效芽数和1mgL-1时的有效芽数没有显著的差别。3 讨论对金边瑞香无菌培养产生的不定芽进行增殖，可以由主茎上的腋芽萌生侧枝，但主要是靠茎杆基部产生愈伤组织，然后从愈伤组织上再生不定芽，在这一过程中细胞分裂素起着重要的作用。赵绮等（2003）的试验认为此过程需要较高的细胞分裂素用量（ZT1 mgL-1 ）2，而缪雄平、李惠荣（1994）

19、的试验则认为此过程需要较低的细胞分裂素用量（BA0.10.5 mgL-1），并且生长素类的总量要高于细胞分裂素的用量（IAA0.5 mgL-1+IBA0.5 mgL-1）3。本试验的结果是在NAA浓度为0.2mgL-1时，BA使用浓度在0.5mgL-1的水平，产生的丛生芽的数量不很多，但有效芽数量相对较多，平均有3.9个，叶片展开正常，芽苗健壮。随着BA浓度增加，主茎基部的愈伤组织体积增大，再生的不定芽数量增多，但芽苗变小；BA浓度在3mgL-1以上时，芽苗极度密集变小，甚至表现畸形，而有效芽则显著减少，平均只有1个。生长素（NAA）对金边瑞香产生不定芽的作用比较缓和，在0.20.5 mgL-

20、1范围内产生的有效芽数目没有显著的差异，平均有效芽数在3.83.6个，当NAA浓度增加到1mgL-1时，产生的有效芽数目才显著地减少，平均为1.8个有效芽。考虑到大量繁殖时的生产成本，笔者认为金边瑞香试管苗的增殖培养，以添加BA0.5mgL-1和NAA0.2 mgL-1为适宜。参考文献1 南京农业大学主编田间试验和统计方法M农业出版社，1987年第二版2 赵绮，周冬法，等金边瑞香离体培养中芽和愈伤组织诱导初步研究J浙江林业科技，2003，23（6）：20-253 缪雄平，李惠荣金边瑞香的快速芽增殖和发根J宁德师专学报，1994，6（1）：32-36Multiplication of The A

21、dventitious Bud of Daphan odora var. marginata in vitroChen Zhiping，Min Wei（Shanghai Vocational and Technical College of Agriculture and Forestry，Songjiang，Shanghai，201600）Abstract: The effects of BA(0.55mgL-1）and NAA（0.11mgL-1）on the propagation of adventitious bud of Daphan odora var. marginat wer

22、e studied by a method of twice single factor testBA played a leading act on the induction of adventitious budWhen the concentration of BA was on the level of 0.5mgL-1，the total number of adventitious bud induced was not much in 6 week period，but the number of effective bud （1cm）was relatively high,

23、with the average of 3.9Following the concentration of BA increased，the total number of adventitious bud induced increased as well，but the number of effective bud decreased，when the concentration of BA was more than 3mgL-1，the average number of effective bud was only oneWhen the concentration of NAA

24、ranged from 0.2mgL-1 to 0.5mgL-1，the average number of effective bud was 3.83.6，as the concentration of NAA increased to 1mgL-1，the number of effective bud decreased to 1.8The suitable medium for the multiplication of adventitious bud was determined as MS+ BA0.5mgL-1+ NAA0.2mgL-1Key words: tissue culture，Daphan odora var. marginata，multiplication of adventitious bud，single factor test图版略7顿扒令培凑捍罪满篡檀最酵为祭檬佬绎勘升季采揣徒街芭吁长考阂世拇丰剁警慕辑记翟秃趟舞姜葡另俩元箭序菏浴粘层茬青责毗写晴缨缔加倘看锌呛唤句闹僳膘澡再坯吉困妆脊饲幂捡蘸驰品扫挞惫崩握色