海尔福对铅致雄性小鼠生殖腺毒性的拮抗作用

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减海尔福对铅致雄性小鼠生殖腺毒性的拮抗作用（作者：单位：邮编：）作者：覃淑云，秦小云，张树球，方晓燕【摘要】目的 探讨海尔福对铅所致的雄性小鼠生殖腺毒性的拮抗作用。方法 取健康昆明雄性小白鼠，随机分为对照组、染铅组、 治疗组3个实验组，进行醋酸铅染毒亚慢性毒性实验，治疗组用海尔 福进行治疗。结果 醋酸铅染毒组雄性小鼠的生殖腺有不同程度的病 理学改变，精子计数、直线运动精子数、活精子率下降，而静止不动 精子数、精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变率升高；海尔福治疗 组小鼠的生殖腺病理学改变有不同程度的改善，精子计数、直线运动精子数、活精子率有所升高，而静止不动精子

2、数、精子畸形率和初级 精母细胞染色体畸变率有所降低。结论海尔福对铅所致的雄性小鼠生殖腺毒性有拮抗作用。【关键词】 海尔福；铅中毒；生殖毒性；诱变力试验；小鼠Abstract: Objective To explore Haierfu syrup in protection aga inst lead pois oning on gen ital gla nd in male mice. MethodsKunming male mice were ran domly divided into con trol group,leadpoisoninggroup and therapeutic gr

3、oup. Sub-chronictoxicity test was performed with lead acetate pois oning. The therapeutic group was give n Haierfu syrup. Results In lead poisoning group, the pathologicalchanges in genital glands ofmice were obtained; sperm count, linear movementsperm and live sperm rate decreased; the elevatedmoti

4、 onl esssperm,cacospermia and primary spermatocyte chromosome aberration rate were found. In Haierfu group, the pathological changes in gen ital gla nds of mice ameliated to differe nt degree, sperm count, linear movementsperm and live sperm rate elevated, and moti onl esssperm, cacospermia and prim

5、ary spermatocytechromosomeaberration rate decreased. Conclusion Haierfu syrup can preve nt gen ital gla nds of male mice from lead pois oning.Key words: Haierfu syrup; lead poisoning;genitaltoxicity; mutage ni city tests; mice铅是一种对人体有害的重金属元素，普遍存在于自然界中。环境中的生活性铅污染也很严重，铅对健康的影响已成为相当突出的社会 问题。铅对健康的影响是多方面的

6、，铅对雄性睾丸和附睾的毒性也得 到了公认，人们对铅损害生殖腺的研究较多，但对用于干预铅损害生殖腺的研究报道较少，笔者通过观察海尔福对铅致小鼠性腺毒性的拮 抗作用及其机制，为铅中毒的预防治疗提供科学依据。1材料与方法1.1材料 选用体重1822g的健康昆明种雄性小白鼠30只（本 院实验动物中心提供）。1.2主要试剂醋酸铅为购于上海化学试剂厂的分析纯试剂，用 时以蒸馏水配成相应浓度的溶液。海尔福口服液由本课题组研制，主 要成分有茯苓、银花、甘草等中药提取精制而成，具有清热解毒作用， 对人体无毒副作用，由容县星火饮料厂生产（桂卫食准字：93 075号）。1.3方法30只小白鼠随机分为3组，每组10只

7、，即染铅组、 治疗组、对照组。以醋酸铅溶于蒸馏水中灌胃染毒，灌胃量为40mg /kg，治疗组在染毒同时，每只灌胃1.5ml海尔福溶液，对照组灌 胃等量的生理盐水。每天1次，每周5天，连续7周，所有的小鼠自 由摄食、饮水。所有动物在7周后处死。取下双侧睾丸，一侧用10% 的福尔马林固定、制作石蜡切片，苏木精-伊红染色后用光镜观察病 理组织学变化。取附睾消化后测定精子计数、直线运动精子数、活精 子率、精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变率。1.4观察指标1.4.1精子计数和精子活动度的测定 取一侧附睾按常规制备精 子悬液，将精子悬液置37C恒温水浴孵育20min，按文献1方法， 在23 C以上室温下

8、，用高倍镜计数2000个精子，计算精子活动度和 活精子率，然后将剩余的精子悬液在6080C水浴中处死精子，计数精子数，计算出每克附睾中精子数量。142精子畸形实验 取另一侧附睾，制备精子悬液参照文献2 方法制片，染色，每只小鼠计数 1000个完整精子，并计算精子畸形 率。143睾丸初级精母细胞染色体畸变分析 处死小鼠前5h腹腔 注射秋水仙碱4mg/kg，然后颈椎脱臼处死小鼠，按文献3方法制 备初级精母细胞染色体观察片，每只小鼠制备 23张玻片，计数50 个合格的中期分裂相细胞，分别记录各种畸变出现的数量，计算畸变 率。2结果2.1小鼠睾丸的形态改变 光学显微镜下发现：对照组小鼠睾 丸切片，生精

9、小管结构完整，细胞排列紧密，从基底膜至管腔有57层生精细胞，生精细胞层次分明，从管外侧到中央分别为精原细胞、 初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞，细胞排列致密，管腔内有 多量精子；染铅组小鼠睾丸与对照组相比，肉眼观察发现，有不同 程度的萎缩，小鼠睾丸光镜切片，出现灶性生精细胞层次减少，次级 精母细胞脱落，细胞稀疏；海尔福治疗组，肉眼观察发现，睾丸萎 缩不明显，小鼠睾丸光镜切片，细胞排列稍微稀疏，生精细胞层次偶 有减少，次级精母细胞有些脱落，但不是很明显。2.2小鼠精子计数和精子活动度见表1。2.3小鼠精子畸形率的影响 见表2。2.4小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变率 见表3。表1小鼠精子计数和

10、精子活动度（略）与染铅组比较，a： t=2.79 , Pv0.05 ;与对照组比较，b: t=0.46 ,P 0.053讨论精原细胞在青春期开始增殖活动，精原细胞经过多次有丝分 裂增殖后，部分细胞分化发育成为初级精母细胞， 初级精母细胞进行 第一次成熟分裂，形成2个次级精母细胞，后者经第二次成熟分裂， 形成2个单倍体的精细胞，精细胞经形态学变化后成为精子，精子进 入附睾后，经过数日的发育，才能达到功能上的成熟，并具备受精能 力。本次动物实验用40mg/kg剂量的醋酸铅给雄性小鼠灌胃，其对小 鼠睾丸生精上皮的损伤很明显，曲细精管层次减少，管腔中精子数减 少，生精细胞变性、坏死。附睾管内的精子也随

11、着减少，初级精母细 胞染色体畸变率升高，且出现环状和链状多价体，对染色体发生至少 2次以上的损伤产生相互易位，说明铅可损伤染色体致初级精母细胞 染色体畸变率和精子畸形率升高，影响精子的运动，使精子活动度下 降，损害了小鼠的生殖功能。因此，预防铅对男性生殖健康的影响是 一项十分重要的工作。表2小鼠精子畸形率及构成比（略）与染铅组比较，a：x 2=8.98，Pv 0.01 ;与对照组比较，b：x2=8.98，P0.05表3小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变率（略）与染铅组比较，a：x 2=3.94，Pv 0.01 ;与对照组比较，b：x2=0.40, P0.05铅确能损伤小鼠的性腺，影响生精功能，损伤

12、了生精细胞，使生 精细胞数量减少，结构和功能受损，因而使产生的精子数量减少，质 量下降，精子活动度下降，活精率减少，精子畸形率升高。其机制可 能是：铅可通过睾丸屏障进入睾丸组织内， 且在睾丸内有一定的蓄 积作用，损伤睾丸的生精细胞4。铅可对睾丸组织产生脂质过氧 化作用，使大鼠血和睾丸匀浆中 MDA升高，抗氧化酶SOD GSHPXI 低5。而MDA升高，抗氧化酶SOD GSHPXI低引起严重的氧自 由基增加，活性氧分子的显著升咼，而且睾丸中缺乏自由基清除剂 MTs （金属硫蛋白）这种具有保护作用的蛋白6。铅可致精原细 胞正常分裂受到抑制，成熟精子减少或缺乏。铅可使生精细胞核变形， 线粒体空化以及

13、胞浆中出现包涵体7铅能通过睾丸屏障，诱发小 鼠精原细胞和初级精母细胞染色体畸变8。铅可致染色体断裂、姐 妹染色单体交换（SCE）、DNA单链或（和）双链断裂、DNA片断缺失等:9。吴卫平等10报道，铅能降低Sertoli细胞蛋白质生物合成， 造成该细胞代谢障碍，抑制精子生成；铅能使精子顶体反应作用增加， 使精子与卵细胞相互作用障碍，精子穿透卵细胞能力下降，造成生育 能力降低。染铅小鼠海尔福治疗后其生殖腺病理学改变有不同程度的改善，精子计数、直线运动精子数、活精子率有所升高，而静止不动精子数、精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变率有所降低。考虑其机制可能为：海尔福具有抗氧化、清除自由基作用2及海尔

14、福富含锌、硒、钙等微量元素5对抗脂质过氧化而保护性腺细胞免 受损害，而且能增加性腺能量代谢，从而促进组织修复，从而也使生 精功能得到一定程度的恢复，精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变 率有所降低。有学者认为锌能保护细胞免受氧化损伤，抑制脂质过氧 化11而海尔福含有丰富的锌12。促铅排出13，减少其 在睾丸组织的积蓄，降低铅对性腺的直接毒性作用。【参考文献】:1黄勤，黄幸纾工业品六六六对小鼠精子影响研究J.浙江医科大学学报,1987,16(1):9-11.:2高青.一种改进的小鼠精子畸形检测方法J .卫生研究,1989,18(1):13-14.:3张桥.卫生毒理学基础M .3版.北京:人民卫生出

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