植物样品全氮磷钾测定

1、植株全氮、磷、钾测定方法一、植物全氮测定（一）H2SO4-H2O2 消煮法1、适用范围本方法不包括硝态氮的植物全氮测定 , 适合于含硝态氮低的植物样品的测定。2、方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解 , 有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐 , 钾也全部释出。 消煮液经定容后 , 可用于氮、 磷、钾的定量。采用 HzO2为加速消煮的氧化剂，不仅操作手续简单快速，对氮、磷、钾的定量没有 干扰 , 而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作 ,防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。3、试

2、剂（1）硫酸 （ 化学纯 , 比重 ;（2）30%甩02（分析纯）。4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。5、操作步骤称取植物样品 （ 称准至装入 100ml 开氏瓶或消煮管的底部 , 加少量水润湿 ，加浓 H2SO45ml, 摇 匀（最好放置过夜）,盖上弯劲漏斗，在电炉或消煮炉上先小火加热 ，待ESQ发白烟后再升高温度， 当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加1-5滴H2Q，再加热至微沸，消煮约710min,稍冷后重复加HQ,再消煮。如此重复数次，每次添加的H2Q应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后 ， 再加热10min,除去剩余的 fQ2。取下冷却后，用水将消煮液无损地转移入 100ml容量

3、瓶中，冷却至 室温后定容 （V1）。 每批消煮的同时 , 进行空白试验 , 以校正试剂和方法的误差。6、注释（1）所用的H2Q应不含氮和磷。fO2在保存中可能自动分解，加热和光照能促使其分解 ，故应 保存于阴凉处。在 H2Q中加入少量HLSQ酸化，可防止H2C2分解。（2） 称样量决定于 NPK含量，健状茎叶称，种子,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样，可按干样 的5倍称样。称样量大时，可适当增加浓 HSQ用量。（3）加H2Q2时应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶劲内壁上，将不起氧化作用，若遗留下来还会影 响磷的显色。（ 4）上机分析准备的试剂指示剂溶液：取 10ml 指示剂储备液加入 500ml 容量

4、瓶，加入 4ml 磷酸盐缓冲液。用蒸馏水 定容。在分析前一天准备此试剂。（一般 1L 能分析 200 个样品）4mol/LNaQH : 在蒸馏水中溶解 80g 氢氧化钠并稀释定容至 500ml. （一般 1L 能分析 200 个样 品）1000ppm N 储备液 ; 在 1000ml 容量瓶中溶剂氯化铵，并稀释定容。分析标线梯度： 0、5、10、15、20、25ppm（二）水杨酸 -锌粉还原 - H 2SQ4- 加速剂消煮法1 、适用范围 包括销态氮的植物全氮测定 , 适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。2、方法原理样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用,生成硝基水杨酸 ,再用硫代硫

5、酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按HSQ-加速剂消煮法进行消煮法进行消煮样品，使样品中全部氮转化为铵盐。( 2)还原锌粉 (AR);(3) 水杨酸-硫酸:30g水杨酸溶于1L浓硫酸中。也可以该用含苯酚的浓硫酸：40g苯酚溶于1L浓硫酸中。4、仪器设备。同上。5、操作步骤称取磨细烘干样品(过筛)或新鲜茎叶样品，置于100ml开氏瓶或消煮管中，先用水湿润 内样品(烘干样),然后加水杨酸-硫酸10ml,摇匀后室温放置30min,加入NqSzQ约,锌粉和水10ml, 放置 10 min, 待还原反应完成后 , 加入混合加速剂 2g, 按土壤全氮测定方法进行消煮 , 消煮完毕 , 取下冷却后

6、，用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中，冷却至室温后定容(Vi) o用于滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮。每批消煮的同时 , 进行空白试验 , 以校正试剂和方法的误差。(三) 消煮液中铵的定量 (凯氏法 )1、适用范围。适合于各种植物样品消煮液中氮的定量。2、方法原理植物样品经开氏消煮、定容后，吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨，经蒸馏,用HBQ吸收，硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定,以甲基红-溴甲酚绿混合指示剂指标终点。3、试剂(1) 400g/L NaOH 溶液。(2) 20g/L H 3BO-指示剂溶液。( 3)酸标准溶液 c(HCL 或 1/2H2SO4)=L o4、仪器设备

7、。蒸馏装置或半自动蒸馏仪。入半微量蒸馏器的内室。另取150ml三角瓶，内加5 ml 2% H 3BO指示剂溶液（若为包括硝态氮的待测液，应加约6 mL的400g/L NaOH溶液）,通过蒸气蒸馏（注意开放冷凝水,勿使馏岀液温度超过 40 C ）。待馏岀液体积约达 5060ml时，停止蒸馏,用少量已调节至的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏岀液至由蓝绿色突变为紫红色 （ 终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同 ） 。与此同 时进行空白测定的蒸馏、滴定、以校正试剂和滴定误差。6、结果计算3 （N）, %= c（V-V 0） xx Dx 100/m;式中：3 （N）植物全氮的质量分数 ，;c酸标准溶

8、液的浓度,mol/L;V滴定试样所用的酸标准液体积，ml;V）滴定空白所用的酸标准液，ml; N 的摩尔质量 ,kg/mol;D分取倍数（即消煮液定容体积 W吸取测定的体积 V2） o二、植物全磷的测定（一）钒钼黄吸光光度法1、 适用范围。适合于含磷量较高的植物样品的测定（如籽粒样品）。2、方法原理植物样品经浓H2SO消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400490nm处用吸光光度法测 定。磷浓度较高时选用较长的波长 , 较低时选用较短波长。此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定,在HNQ HCI04和f

9、SQ等介质中都适用对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格 , 干扰物少 , 在可见光范围内灵敏度较低 , 适测范围广（约为120mg/L P）,故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定。3、试剂（1）钒钼酸铵溶液：钼酸铵（NH 4） 6M07O2 4H2O,分析纯溶于400mL水中，必要时可适当加热， 但温度不得超过 60 C。另将偏钒酸铵（NH4VO,分析纯）溶于300mL沸水中，冷却后加入250mL浓 HNO（分析纯）。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵 （溶液中，不断搅匀，最后加水稀释至1L,贮于棕色瓶 中。（2）NaOH溶液（c=6moI/L）:24gNaOH 溶于水，稀释至

10、100ml。（3） 二硝基酚指示剂（p =2g/L）:,6- 二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中。（4）磷标准溶液p （P）=50mg/L:（ 干燥的KHPQ（分析纯）溶于水，加入5ml浓HNO,于1L容 器瓶中定容。4、主要仪器设备。分光光度计。5、分析步骤准确吸取定容,过滤或澄清后的消煮液 520ml（ V2,含放入50ml容量瓶中，加2滴二硝基酚 指示剂，滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色，加入5ml钒钼酸铵试剂，用水定容（V3）。15min后，用 1cm光径的比色槽在波长 440nm处进行测定，以空白溶液（空白溶液消煮液按上述步骤显色 ）,调节 仪器零点。校准曲线或直线回

11、归方程 :准确吸取 50mg/L P 标准液 0， 1， ， ， 10， 15ml分别放入 50mL容量瓶中 ， 按上述步骤显色 ， 即得 0， ， ， ， ， 10， 15 ml P的标准系列溶液 ， 与待测液一起进行测定， 读取吸光度 ， 然后绘制校准曲线或求直线回归方程。-4p (P) X VX (V1/V2) X 103 (P) =m式中：3 (P) 植物磷的质量分数,%；p (P)从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，mg/L;V消煮液定容体积，ml;V2吸取测定的消煮液体积，ml;M显色液体积，ml;m称样量,g;10-4将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数。7、注

12、释(1) 显色液中 p (P)=15 mg/L时，测定波长 420nm;520mg/L用490nm。待测液中 Fe3+浓度 高应选用450nm,以清除Fe3+干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。(2) 一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如15C)时,需显色30min。稳定时间 可达 24h。(3) 如试液为 HCl,HClO4介质，显色剂应用 HCl配制；试液为SO介质，显色剂也用 HSC4 配制。 显色液酸的适宜浓度范围为 mol/L, 最好是 mol/L 。酸度高显色慢且不完全 , 甚至不显 色；低于mol/L易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为X10-3

13、 10-2mol/L, 钒酸盐为 8X 10-5X 10-3 mol/L 。4、此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中Fe3+浓度超过寸,它的黄色有干扰，可用扣除空白消除。二) 钼锑抗吸光光度法1、适用范围适合于含磷量较低的植物样品的测定 (如茎秆样品等 ) 。2、方法提要植物样品经浓 H2SO4 消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下 , 待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸 , 后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物 , 可用吸光光度法测定。3、试剂(1)6mol/L NaOH 溶液(2)%二硝基酚指示剂(3) 2mol/L(1/2 H 2SQ)硫酸溶液

14、：浓SQ加水至 100mL。(4) 钼锑贮存液：浓HSO(分析纯)126 ml缓慢地注入约400 ml水中，搅拌,冷却。钼酸铵(分 析纯)溶解于约60C的300ml水中，冷却。然后将 HSO溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100 % 酒石酸锑钾(KSbOC4O6 I/2H2O,分析纯)溶液,最后用水稀释至 1L,避光贮存。此贮存液含钼酸铵 为 1%,酸浓度为 c(1/2 H 2SO4)= mol/L(5) 钼锑抗显色剂：抗坏血酸(CsfO,左旋，旋光度+21+22,分析纯)溶于100ml钼锑贮存 液中，此液须随配随用，有效期一天，冰箱中存放，可用35天。(6) 磷标准工作液p (P)=5 mg

15、/L: 吸取100mg/L P标准贮存液稀释 20倍，即为5 mg/L P 标准工作溶液 , 此溶液不宜久存。4、主要仪器设备。同上5、分析步骤吸取定容过滤或澄清后的消煮液(V2,含P530 u g)于50ml容量瓶中，用水稀释至约 30ml,加12滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/L NaOH溶液中和至刚呈黄色 ，再加入1滴2mol/L(1/2 H2SO)溶液，使溶液的黄色刚刚褪去，然后加入钼锑抗显色剂，摇匀，用水定容（V3） o在室温高于15 C的条 件下放置30min后，用1cm光径比色槽在波长 700nm处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零 点。校准曲线或直线回归方程 ：准确吸取p

16、（P）= 5mg/L标准工作溶液 0,1,2, 3, 4,5 ml, 分别 放入50mL容量瓶中，加水至30ml,同上步骤显色并定容,即得0,按，L P标准系列溶液，与 待测液同时测定，读取吸光度，然后绘制校准曲线或直线回归方程。6、结果计算：同1o7、注释根据分光光度计性能，可选用650890nm波长处测定,880890nm处灵敏度高三、植物全钾的测定一火焰光度法（一）适用范围。适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。（二）方法提要植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定。（三）试剂K标准溶液p （K）= 100mg/L:（ 分析纯），在105110C干燥2h）溶于水，于1L容量瓶中定 容,存于塑料瓶中。（四）主要仪器设备。火焰光度计。（五）分析步骤吸取定容后的消煮液（V2）放入50mL容量瓶中，用水定容（V1）,直接在火焰光度计上测定 ，读 取检流计读数。校准曲线或直线回归方程准确吸取100mg/L K标准溶液0, 1, , 10, 20 ml,分别放入50mL 即得 0, 2, 5, 10, 20, 40 mg/L K 标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火