【微生物检验】食品中细菌总数的测定ppt课件

1、1、检验程序、检验程序检样检样做成几个适当倍数的稀释液做成几个适当倍数的稀释液选择选择2-3个适宜稀释度个适宜稀释度各以各以1ml之量分别入灭菌平皿内之量分别入灭菌平皿内每皿内参与每皿内参与460C左右适左右适量营养琼脂量营养琼脂培育培育48小时小时报告菌落数报告菌落数第一节第一节 菌落总数测定菌落总数测定2、检样处置、检样处置1以无菌操作将检样以无菌操作将检样25g或或25ml剪碎，放于含有剪碎，放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内瓶内灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内瓶内预置适当数量的玻璃珠或灭菌乳钵内，经充分振摇或预置适当数量的玻璃珠或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨

2、制成研磨制成1：10的均匀稀释液。的均匀稀释液。 固体检样在参与稀释液后，最好置灭菌均质器中以固体检样在参与稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000r/min100000r/min的速度处置的速度处置1min，做成，做成1：10的的均匀稀释液。均匀稀释液。2用用1ml灭菌吸管汲取灭菌吸管汲取1：10稀释液稀释液1ml，沿管壁徐徐，沿管壁徐徐注入含有注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内留意吸灭菌生理盐水或其他稀释的试管内留意吸管尖端不要触及管内稀释液，振摇试管混合均匀，制管尖端不要触及管内稀释液，振摇试管混合均匀，制成成1：100的稀释液。的稀释液。3另取另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺

3、序的灭菌吸管，按上项操作顺序,制制10倍递增倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支支1ml灭菌吸管。灭菌吸管。4根据食品卫生规范要求或对检样污染情况的估计，根据食品卫生规范要求或对检样污染情况的估计，选择选择23个适宜稀释度，分别在制个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，倍递增稀释的同时，即以汲取该稀释度的吸管移即以汲取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。个稀释度作两个平皿。5稀释液移入平皿后，应及时将凉至稀释液移入平皿后，应及时将凉至460C营养琼脂培营养琼脂培育基育基(可放置在可放置在4610C

4、水浴锅内保温水浴锅内保温)注入平皿注入平皿15ml20mL，混合均匀混合均匀.同时将营养琼脂培育基倾入加有同时将营养琼脂培育基倾入加有1ml稀释液不稀释液不含样品的灭菌平皿内作空白对照。含样品的灭菌平皿内作空白对照。 6等琼脂凝固后，翻转平板，置等琼脂凝固后，翻转平板，置3610C恒温箱内恒温箱内培育培育482h取出，计算平板内菌落数目取出，计算平板内菌落数目,乘以倍数，即乘以倍数，即得每得每g每每mL样品所含菌落总数。样品所含菌落总数。 3、菌落计算方法、菌落计算方法1菌落计数方法菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，

5、以防脱漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释检查，以防脱漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。度的各平板平均菌落总数。2菌落计数的报告菌落计数的报告平板菌落数的选择平板菌落数的选择 选取菌落数在选取菌落数在30300之间的平板作为菌落总数测定规范。之间的平板作为菌落总数测定规范。一个稀释度运用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个稀释度运用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，那么不宜采用，而应以一个平板有较大片状菌落生长时，那么不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，假设片状无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，假设

6、片状菌落不到平板的一半，而其他的一半中菌落分布又很均匀，菌落不到平板的一半，而其他的一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时菌落之间无明显界限，假设仅有一条链，状菌落生长时菌落之间无明显界限，假设仅有一条链，可视为一个菌落数；假设有不同来源的几条链，那么应将可视为一个菌落数；假设有不同来源的几条链，那么应将每条链作为一个菌落计。每条链作为一个菌落计。 稀释度的选择稀释度的选择 应选择平均菌落数在应选择平均菌落数在3030300300之间的稀释度，乘以稀之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。假设有两上稀

7、释度，其生长的菌落数均在释倍数报告之。假设有两上稀释度，其生长的菌落数均在3030300300之间，那么视两者之比如何来决议。假设其比值之间，那么视两者之比如何来决议。假设其比值小于或等于小于或等于2 2，应报告其平均数；假设大于，应报告其平均数；假设大于2 2那么报告其中那么报告其中较小的数字。较小的数字。 假设一切稀释度平均菌落数均大于假设一切稀释度平均菌落数均大于300300，那么应按稀，那么应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 假设一切稀释度的平均菌落数均小于假设一切稀释度的平均菌落数均小于3030，那么应按稀，那么应按稀释度最低的平均

8、菌落数乘以稀释倍数报告之。释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 假设一切稀释度均无菌落生长，那么以小于假设一切稀释度均无菌落生长，那么以小于1 1乘以最乘以最低稀释倍数报告之。低稀释倍数报告之。 假设一切稀释度的平均菌落数均不在30300之间，其中一部分大于300或小于30时，那么以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。菌落数的报告 菌落数在100以内时，按其实有数报告;大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。留意英文表述l菌落总数aerobic bacterial count大肠菌群coli

9、form bacteria沙门氏菌salmonella致泻性埃希氏菌diarrheogenic escherichia coli霉菌和酵母molds and yeasts金黄色葡萄球菌staphylocl菌落构成单位colony form unitl微生物学检验 microbiological examination讨论1l真菌菌落算不算菌落总数？请学生比较新老国标中关于菌落的定义的差别 讨论2l新国标上菌落总数计算公式上n 分别代表什么？ ln1 第一稀释度低稀释倍数平板个数含适宜范围菌落数n2 第二稀释度高稀释倍数平板个数含适宜范围菌落数讨论3l成片的菌落如何计数？ 讨论4l对原始记录表的

10、评价 l设计原始记录表菌落总数的测定菌落总数的测定 平板菌落计数法平板菌落计数法 菌落总数记录报告菌落总数记录报告产品名称生产车间班次生产日期抽样日期检验日期细菌总数检验依据 培养基接种营养琼脂培养基结果报告数（个/g或ml）AB平均数110-110-210-310-410-5空白备注检验员：日期：复核：日期：记录表按照以下原那么进展可以满足检验过程的复现；可以实现培育基和试剂的溯源及复现其制备过程；一页原始记录根本包括该样品的多个常规检验工程，也就是一份样品的一切微生物检验工程在一张原始记录上表达。为了符合实验室资质认定评审的要求，能够会有点繁，而且根本上没有方法对原始记录作假，由于记录上表达的内容环环相扣。 菌落总数的测定菌落总数的测定 出现的实践任务问题出现的实践任务问题做菌落总数检测时,发现稀释倍数大的比稀释倍数小的平皿上生长的菌落数还多,而且空白对照又没长菌,我找不出啥缘由？我做的菌落总数的测定，是把浓缩的复合芽孢杆菌进展10-8、10-9、10-10稀释，在涂布法汲取0.1ml的3个浓度的时候，培育皿中长出来的菌2个10-9长了一大片的菌连在一同，10-8也有一个这样，其他的几乎不长，终究怎样会事？检测菌落总数时,有些菌落难以区别,有没有什么好的试剂,能添加菌落的可见率？我公司做的菌落总数和技术监视局