药物检测技术 第4章 药物的杂质检查技术

1、一、药物的纯度一、药物的纯度 、定义：、定义：药物的纯净程度，又称药用药物的纯净程度，又称药用规格规格( (最高杂质限量最高杂质限量) )，因药品的纯度检，因药品的纯度检查主要针对杂质检查，因此杂质检查又查主要针对杂质检查，因此杂质检查又称纯度检查。称纯度检查。纯度检查纯度检查制剂检查制剂检查有效性有效性安全性安全性性性 质质改变原料改变原料改变工艺改变工艺新药研究新药研究需需检检查查杂杂 质质（forin、impurities）有毒副作用的物质有毒副作用的物质无毒副作用无毒副作用影响药物的稳定性和疗效影响药物的稳定性和疗效无毒副作用无毒副作用不影响药物的稳定性和疗效不影响药物的稳定性和疗效影

2、响药物的科学管理的物质影响药物的科学管理的物质二、药物中杂质的来源二、药物中杂质的来源杂质来源杂质来源生产引入生产引入贮藏引入贮藏引入原原 料料反应物反应物试试 剂剂催化剂催化剂生产生产器皿器皿水解水解氧化氧化异构化异构化消旋化消旋化霉变霉变潮解潮解 在药物生产过程中引入杂质的途径为在药物生产过程中引入杂质的途径为 A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成净造成 C. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成混晶等造成 D. 所用金属

3、器皿及装置等引入杂质所用金属器皿及装置等引入杂质 E. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质解引入的杂质 例例三、杂质的分类三、杂质的分类 按来源分按来源分一般杂质：一般杂质：自然界是中分布较广，容易引入的物自然界是中分布较广，容易引入的物 质。其方法收载在中国药典的质。其方法收载在中国药典的附录附录 中。中。 特殊杂质特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏指某一个或某一类药物的生产或贮藏 过程中引入的杂质。杂质检查方法收过程中引入的杂质。杂质检查方法收 载在中国药典载在中国药典正文正文各药品的质量标准各药品的质量标准 中。中。水杨酸水杨酸C

4、OOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH+CH3COONaCHCH3 3COOH+COOH+水解一步水解一步臭味臭味例例阿司匹林阿司匹林 水杨酸水杨酸按危害性分按危害性分ClCl- -、SOSO2-2-、FeFe3+3+、H H+ +、OHOH- -、H H2 2O O剧毒剧毒重金属、砷盐重金属、砷盐 中国药典（中国药典（20152015年版）中规定的一般杂质年版）中规定的一般杂质 检查中不包括的项目是检查中不包括的项目是 A. 硫酸盐检查 B. 氯化物检查 C. 溶出度检查 D. 重金属检查 E. 砷盐检查 例例（一）杂质限量（一）杂质限量 指药物中允许杂质存在的最大指药物中允许杂质存

5、在的最大量，通常用百分之几或百万分之几量，通常用百分之几或百万分之几（ppmppm）来表示来表示四、四、 药物的杂质限量与检查法药物的杂质限量与检查法杂质限量杂质限量 （二）药物的杂质检查法二）药物的杂质检查法 杂杂 质质检查法检查法灵敏度灵敏度对照法对照法比较法比较法 1. 1. 对照法对照法 需对照物质需对照物质 限量检查法限量检查法 （Limit TestLimit Test） 特点：不需知道杂质的准确含量。特点：不需知道杂质的准确含量。选择待检杂质作对照选择待检杂质作对照供供试试品品稀稀释释对对照照 2. 2. 灵敏度法灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂，系指在供试品溶液中加入试剂，

6、在一定反应条件下在一定反应条件下, ,不得有正反应出现不得有正反应出现 不需对照物质不需对照物质50ml H50ml H2 2O + 5O + 5滴滴HNOHNO3 3 不浑浊不浑浊纯水中纯水中ClCl- -合格合格 3. 3. 比较法比较法 含量测定法：测定杂质的绝对含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、含量，如测定吸收度、pHpH值等。值等。 特点：特点：准确测定杂质的量。准确测定杂质的量。不需对照物质不需对照物质（三）（三） 杂质限量的计算杂质限量的计算%100供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量供试品量标准溶液浓度标准溶液体积杂质限量L=C标V标/ms 100% 检查某药物中的

7、砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.00004，应取供试品的量为 A. 0.50g B. 5.0g C0.050g D. 2.50g E. 0.250g一、一般杂质检查规则一、一般杂质检查规则 药品检验操作标准药品检验操作标准规定：规定：1. 1. 遵循平行操作原则遵循平行操作原则 (1)(1)仪器的配对性：仪器的配对性： 如纳氏比色管应如纳氏比色管应配对配对, ,刻度线高低相差不超过刻度线高低相差不超过2mm2mm，砷盐，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致检查时导气管长度及孔的大小要一致 (2)(2)对照品与供试品的同步操作对照品与供试品的同步操

8、作 2. 2. 正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围 1g1g不超过不超过2%2%，1g1g不超过不超过1% 1% 3. 3. 正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法 4. 4. 检查结果不符合规定或在限度边检查结果不符合规定或在限度边缘缘 时应对供试管和对照管各复查二份时应对供试管和对照管各复查二份 二、氯化物检查法二、氯化物检查法（一）原理 对照法 白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc（二）检查方法（二）检查方法 药典附录药典附录 1.1.除另有规定外，取各药品项下除另有规定外，取各药品项下规定量的

9、供试品，加水溶解使成规定量的供试品，加水溶解使成25ml25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸性），再加稀硝酸10m110m1；溶液如不澄；溶液如不澄清，应滤过；置清，应滤过；置50ml50ml纳氏比色管中，纳氏比色管中，加水使成约加水使成约40m140m1，摇匀，即得供试溶，摇匀，即得供试溶液。液。 2. 2.另取各药品项下规定量的标准另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置氯化钠溶液，置50ml50ml纳氏比色管中，纳氏比色管中，加稀硝酸加稀硝酸10m110m1，加水使成，加水使成40m140m1，摇匀，摇匀，即得对照液。即得对照液。 3.

10、 3.于供试溶液与对照溶液中，分于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液别加入硝酸银试液1.0m11.0m1，用水稀释，用水稀释使成使成50m150m1，摇匀，在暗处放置，摇匀，在暗处放置5 5分钟，分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得观察，比较，即得（三）测定条件（三）测定条件 1. 1. 标准标准NaClNaCl溶液溶液 1010 gClgCl /ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含50508080 g g的的ClCl 所显浑浊所显浑浊梯度明显，相当于标准梯度明显，相当于标准NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。 2. 2.

11、 反应需在硝酸酸性条件下进行，反应需在硝酸酸性条件下进行，且以且以50ml50ml供试溶液中含稀硝酸供试溶液中含稀硝酸10ml10ml为为宜。宜。 （1）加速AgCl浑浊的形成； （2）产生较好的乳浊； （3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。3. 3. 试剂：硝酸银试剂：硝酸银4. 4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸供试液和对照液稀释后，再加硝酸 银溶液，使生成白色浑浊而不是白银溶液，使生成白色浑浊而不是白 色沉淀色沉淀 5. 5. 避光、暗处放置避光、暗处放置5 5分钟后比浊，因氯分钟后比浊，因氯 化银见光易分解。化银见光易分解。6. 6. 比浊方法：同置于黑色背景上，自

12、比浊方法：同置于黑色背景上，自 上向下观察。上向下观察。 7. 7. 平行操作原则平行操作原则 （四）干扰及排除 1 1. . 若供试品有色若供试品有色，需经处理后方可检查。，需经处理后方可检查。 （1 1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。中氯化物的检查。在对照液中加一定量供在对照液中加一定量供试液。试液。 （2 2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。再依法检查。 2. 2. 不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物 （1 1）加水振摇，过滤

13、，取滤液进行）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。检查。 （2 2）加热，放冷，过滤，取滤液进）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。行检查。 （3 3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。 例一. 药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（B）A. 硫酸 B. 硝酸 C. 盐酸 D. 醋酸 E. 磷酸 例2. 中国药典 （2015年版） 规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10gCl/ml）58ml的原因是（D）A. 使检查反应完全B. 药物中含氯化物的量均在

14、此范围C. 加速反应D. 所产生的浊度梯度明显E. 避免干扰 例3. 采用硝酸银试液检查氯化物时，加 入 硝 酸 使 溶 液 酸 化 的 目 的 是（ABCDE）A加速生成氯化银浑浊反应B消除某些弱酸盐的干扰C消除碳酸盐干扰D消除磷酸盐干扰E避免氧化银沉淀生成例4. 当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（AB）A内消色法B外消色法C比色法D差示比浊法 E差示可见分光法 例5. 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（ABC）A. 所用比色管需配套B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C. 避光放置5分钟D. 用硝酸银标准溶液做对照E. 在白色背

15、景下观察 三、硫酸盐检查法三、硫酸盐检查法（一）原理 对照法白色浑浊药物：4HCl224BaSOBaClSO白色浑浊）、（对照：4HCl242BaSOBaClSOKVc（二）测定条件 1. 1. 标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶溶液中含液中含0.10.10.5mg0.5mg的所显浑浊梯度明显，的所显浑浊梯度明显，相当于标准相当于标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。 2.2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且反应需在盐酸酸性条件下进行，且以以50ml50ml供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。

16、 3. 3. 试剂：氯化钡试剂：氯化钡 4. 4. 供试液和对照液稀释后，再加供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀白色沉淀 5. 5. 比浊方法：同置于黑色背景上比浊方法：同置于黑色背景上自上向下观察。自上向下观察。 若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。 （三）干扰及排除（三）干扰及排除例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（D）A. 标准氯化钡B. 标准醋酸铅溶液C. 标准硝酸银溶液D. 标准硫酸钾溶液 E. 以上都不对 四、铁盐检查法四、铁盐检查法1. 原理 对照法 红色药物： 36SCNFeHCl6SCNFeFeFe

17、3o23红色、对照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc（一）硫氰酸盐法 ChP(2005)、USP(24) 2. 2. 检查方法检查方法 药典附录药典附录 除另有规定外，取各药品项下规除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成定量的供试品，加水溶解使成25ml25ml，移置移置50ml50ml纳氏比色管中，加稀盐酸纳氏比色管中，加稀盐酸4ml4ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg,50mg,用水稀释使成用水稀释使成 35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml，再，再加水适量稀释成加水适量稀释成50ml50ml，摇匀；，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液

18、一定量制如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液的标准铁溶液, ,置置50ml50ml纳氏比色管中纳氏比色管中, ,加水使成加水使成25ml25ml，加稀盐酸，加稀盐酸4ml4ml与过硫与过硫酸铵酸铵50mg50mg，用水稀释使成，用水稀释使成35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml，再加水适量稀，再加水适量稀释成释成50ml50ml，摇匀）比较，即得，摇匀）比较，即得 3. 3. 测定条件测定条件 （1 1）用）用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2 2O O

19、（硫酸铁（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止FeFe3+3+的水解），标准铁溶液临用前稀释的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液而成，标准铁溶液1010 g Feg Fe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+显色梯度明显，显色梯度明显，一般取标准铁溶液一般取标准铁溶液1.01.05.0ml 5.0ml （2 2）反应需在盐酸酸性条件下进行，）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以且以50ml50ml供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸4ml4ml为宜。为宜。 （3 3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫

20、）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行氰酸铵，使反应向正反应方向进行 （4 4）检查）检查FeFe2+2+和和FeFe3+3+ （5 5）铁盐检查时，加氧化剂氧化）铁盐检查时，加氧化剂氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+。加过硫酸铵可氧化。加过硫酸铵可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。原或分解褪色。 加硝酸后加热也可氧化加硝酸后加热也可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+ （6 6）比色方法：同置于白色背景）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。上，自上向下观察。 4. 干扰及排除干扰及排

21、除 (1) (1)为了提高灵敏度或供试管与对照为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。分取正丁醇层比色。 (2)(2)具环状结构的有机药物，需经具环状结构的有机药物，需经700700800800炽灼破坏处理后再依法检查。炽灼破坏处理后再依法检查。 （二）巯基醋酸法 对照法本法灵敏度较高，但试剂较贵 红色药物：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20FeFe2332Feml红色对照：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20323FeFeml例1. 中国药典（2015年版）规定铁盐的检查方法为（A）A. 硫氰酸盐法B. 巯基

22、醋酸法C. 普鲁士蓝法D 邻二氮菲法E. 水杨酸显色法例2. 中国药典（2015年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（AB） A. 使药物中铁盐都转变为Fe3+ B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C. 使产生的红色产物颜色更深 D防止干扰 E便于观察、比较 例3. 中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（D）A. FeB. Fe2+C. Fe3+D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不对 五、重金属检查法五、重金属检查法 以铅为代表以铅为代表中国药典（中国药典（20152015年版）共收载四法。年版）共收载四法。 第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法第二法第二法 炽灼残渣

23、法炽灼残渣法第三法第三法 硫化钠法硫化钠法第四法第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 （一）第一法 硫代乙酰胺法1. 原理 对照法 SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黄色棕黑色药物：PbSSHPbpH3.522 黄色棕黑色、对照：PbSSH)Pb(NOpH3.5223 Vc 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。 2. 测定条件 （1 1）用硝酸铅配制标准铅贮备液）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止（加硝酸防止PbPb2+2+水解），标准铅溶液水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅标准溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅标准溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，适宜比色

24、范围为，适宜比色范围为27ml27ml溶溶液中含液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。 （2 2）本法用）本法用2ml pH3.52ml pH3.5的醋酸盐的醋酸盐缓冲液控制溶液缓冲液控制溶液pHpH值为值为3 33.53.5。 （3 3）显色剂：从）显色剂：从ChPChP（19901990）开）开始改用硫代乙酰胺做显色剂始改用硫代乙酰胺做显色剂 (1)(1)供试品如有色，需经处理后方可检查供试品如有色，需经处理后方可检查外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。其他无干扰的有色溶液。 3. 3. 干扰及排除干扰及排除（2 2）若供

25、试品中有微量）若供试品中有微量FeFe3+3+存在存在, , 会氧化硫化氢生成单质硫会氧化硫化氢生成单质硫, ,干干扰比色扰比色, ,加入抗坏血酸或盐酸羟胺加入抗坏血酸或盐酸羟胺(0.5(0.51.0g)1.0g)还原还原FeFe3+3+为为FeFe2+2+, ,可消除可消除干扰干扰（3 3）若供试品为铁盐，）若供试品为铁盐，Fe3+Fe3+在盐酸中生成物用乙醚提在盐酸中生成物用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加中，加KCNKCN掩蔽，然后用第三法检查掩蔽，然后用第三法检查 (4)(4)若药物本身若药物本身含有与含有与S2-反应的物质反应的物质时可加入掩蔽

26、剂消除干扰。如时可加入掩蔽剂消除干扰。如SbSb2+2+中中重金属的检查，要在碱性下加重金属的检查，要在碱性下加KCNKCN掩掩蔽蔽SbSb2+2+后，依第三法检查后，依第三法检查配位化合物药物：-OH2KCNSb （二）第二法 炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。 1. 1. 原理原理 对照法对照法500500600600炽灼后的残渣，炽灼后的残渣，加硝酸处理后，依一法检查。加硝酸处理后，依一法检查。 依一法检查氯化物残渣置坩埚中样品：缓冲液左右调节至、炽灼残渣 mlS0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法检查对

27、照：空坩埚缓冲液溶液）（标准、 ml0 . 25 . 3pHNOPbOHOHNHHClHNOSOH232233422. 操作方法 含钠及氟的有机药物应用铂含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）重金属） （三）第三法 硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。 1. 原理 对照法 黄色棕黑色药物：PbSSNaPbNaOH22 黄色棕黑色、对照：PbSSNa)Pb(NONaOH223 V

28、c2. 2. 测定条件测定条件 （1 1）NaOHNaOH碱性条件下碱性条件下（2 2）显色剂：硫化钠）显色剂：硫化钠（四）第四法 微孔滤膜法 适用于含适用于含2 25 5 g g重金属杂质及有色重金属杂质及有色供试液的检查。供试液的检查。 依一法检查，结果微孔滤膜过滤后依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。比较色斑。 P66-67P66-67六、砷盐检查法六、砷盐检查法 （一）古蔡法 ChP（2005）3332AsHAsOHHClZn1. 原理 对照法 遇遇HgBrHgBr2 2试纸生成黄色棕色的砷试纸生成黄色棕色的砷斑，与斑，与2ml2ml标准砷溶液在相同条件下生标准砷溶液在相同条件下生

29、成的砷斑比较成的砷斑比较2. 2. 操作方法操作方法 （1 1）标准砷斑用）标准砷斑用2ml2ml标准砷溶液制备标准砷溶液制备（2 2）供试品需经有机破坏，则标准砷）供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行操作溶液应平行操作3. 测定条件 (1)(1)标准砷溶液临用新配，标准砷溶液临用新配，1 1 gAs/mlgAs/ml。 (2)(2)酸为反应物，酸量应足够，所以加酸为反应物，酸量应足够，所以加 浓盐酸浓盐酸5ml5ml。 （3 3）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是: : 还原还原As5+As5+为为As3+As3+，加快反应速度；，加快反应速度；A.A. 碘化钾被氧

30、化生成的碘化钾被氧化生成的I I2 2又可被氯化又可被氯化亚锡还原为亚锡还原为I I- -，I I- -与反应中生成的与反应中生成的ZnZn2+2+能形成稳定的配位离子，有利能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；于生成砷化氢的反应不断进行；C.C.氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；D. D. 可抑制微量可抑制微量SbSb的干扰。的干扰。 （4 4）醋酸铅棉花的作用）醋酸铅棉花的作用: : 吸收硫化物，消除锌粒及供试品吸收硫化物，消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花中少量硫化物的干

31、扰，醋酸铅棉花60mg60mg装管高度装管高度606080mm80mm。（5 5）锌粒应无砷）锌粒应无砷（6 6）砷斑不稳定，应立即观察）砷斑不稳定，应立即观察4. 干扰及排除干扰及排除（1 1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加硫代硫酸盐时，加HNOHNO3 3，使氧化成，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。砷盐的检查。 （2 2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将化亚锡试液，将FeFe3+3+还原为还原为FeFe2+2+。如枸橼。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。酸铁铵

32、中砷盐的检查。（3 3）具环状结构的有机药物，要先行）具环状结构的有机药物，要先行 有机破坏后再进行检查。有机破坏后再进行检查。 常用的有机破坏方法：常用的有机破坏方法：碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查（4）供试品中有强氧化剂加）供试品中有强氧化剂加H2SO4先先 行分解。行分解。 （5 5）本法适用于不含）本法适用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于 100100 g g的供试品。的供试品。 （二）Ag-DDC法 （二乙基二硫代氨基甲酸银二硫代氨基甲酸银法）法）原理：对照法3332AsHAs

33、OHHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33红色） 、操作： 砷化氢与砷化氢与Ag-DDCAg-DDC溶液作用，还原溶液作用，还原AgAgDDCDDC为红色胶态银，直接比色或于为红色胶态银，直接比色或于510nm510nm波长处测定吸收度，进行比较。波长处测定吸收度，进行比较。 用有机碱吸收反应产生的用有机碱吸收反应产生的HDDCHDDC有利于反有利于反应的进行。应的进行。USPUSP用吡啶用吡啶,ChP,ChP用三乙胺用三乙胺七、干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定条件下干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水经干燥后所减失的重量，主要是水分，也

34、包括其它挥发性物质。分，也包括其它挥发性物质。测定方法：测定方法： 、恒温常压干燥法、恒温常压干燥法 、恒温减压干燥法、恒温减压干燥法 、常温减压干燥法、常温减压干燥法（一）常压恒温干燥法（一）常压恒温干燥法 、定义、定义: :适用于受热较稳定的药物。干适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为燥温度一般为105105。 干燥失重干燥失重% %失重失重/ /供试品重供试品重100100 、操作、操作: :第二次及以后各次称重均应在第二次及以后各次称重均应在 规定条件下继续干燥规定条件下继续干燥1h1h后进行后进行 直至直至MnMnMn-Mn-1 10.3mg0.3mg为恒重。为恒重。、注意、注意(

35、1)(1)供试品厚度：供试品厚度：A.A.一般一般5mm5mm； B.B.疏松疏松10mm10mm；C.C.大粒结晶粒度大粒结晶粒度2mm2mm。(2)(2)干燥温度：干燥温度：A.A.一般一般105105； B.B.含结晶水要提高温度；含结晶水要提高温度； C.C.含水量大且熔点低要先低温后含水量大且熔点低要先低温后105105(3)(3)特殊供试品：特殊供试品： 膏状物粗砂粒及玻璃棒并均匀搅拌膏状物粗砂粒及玻璃棒并均匀搅拌 （二）减压干燥法（二）减压干燥法 （真空干燥）（真空干燥） 适用于熔点低，受热不稳定或水适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。分难赶除的药物。除另有规定外，压力应

36、在除另有规定外，压力应在2.67kPa2.67kPa（20mmHg20mmHg）以下。）以下。、测定方法、测定方法(1)(1)卡尔费休水分滴定法卡尔费休水分滴定法( (费休法费休法) )：适用于加热易破坏，不适于氧化剂适用于加热易破坏，不适于氧化剂/ /还原剂还原剂/ /水反应的物质。水反应的物质。(2)(2)甲苯法甲苯法: :适用颜色较深药物适用颜色较深药物/ /氧化剂氧化剂 还原剂还原剂/ /皂类皂类/ /油类等。油类等。(3)(3)甲醛法甲醛法: :不适于不适于(1)(2)(1)(2)用用(3)(3)法。法。八、水分八、水分测定测定法法、费、费 休休 法法(1)(1)原理原理: :非水溶

37、液中氧化还原滴定非水溶液中氧化还原滴定, ,标标 准滴定液即费休液准滴定液即费休液(I(I2 2+SO+SO2 2+ +吡啶吡啶+ +甲醇甲醇) )I I2 2+SO+SO2 2+H+H2 2O SOO SO3 3+HI+HISOSO3 3+HI+HI+无水吡啶氢碘酸吡啶无水吡啶氢碘酸吡啶+ + 硫酸酐吡啶硫酸酐吡啶( (不稳定不稳定) )硫酸酐吡啶硫酸酐吡啶+ +无水甲醇无水甲醇 甲基硫酸氢吡啶甲基硫酸氢吡啶( (稳定稳定) )总反应方程式总反应方程式: :I I2 2+SO+SO2 2+3C+3C2 2H H5 5N+CHN+CH3 3OH+HOH+H2 2O 2CO 2C2 2H H5

38、5N NHI+CHI+C2 2H H5 5N NHSOHSO4 4CHCH3 3 (2)(2)操操 作作 水分标定费休液：水分标定费休液： 干燥具塞玻璃瓶中重蒸馏水干燥具塞玻璃瓶中重蒸馏水30mg30mg 无水甲醇无水甲醇2 25ml5ml费休试液滴至终点费休试液滴至终点 并用空白校正，得：并用空白校正，得：F=W/(A-B)F=W/(A-B) * *(F=4.0(F=4.0为宜，为宜，F3.0F3.0不宜再用不宜再用) )F-F-滴定度滴定度( (相当水重量相当水重量/ml/ml费休液费休液) mg/ml) mg/ml W- W-重蒸馏水重量重蒸馏水重量(mg)(mg) A- A-滴定消耗费

39、休液容积滴定消耗费休液容积(ml)(ml) B- B-空白消耗费休液容积空白消耗费休液容积(ml)(ml)供试液测定：供试液测定： 将中重蒸馏水换上供试品，使将中重蒸馏水换上供试品，使终点由黄色至红棕色终点由黄色至红棕色/ /永停滴定法指示永停滴定法指示终点，得：终点，得：供试品中水分含量供试品中水分含量%=(A-B)F/W%=(A-B)F/W100%100%(3)(3)注注 意意 吡啶和甲醇即是反应物又是溶剂吡啶和甲醇即是反应物又是溶剂 终点指示法可：终点指示法可： . .2 2自身作指示剂自身作指示剂 . .永停滴定法指示：电流计突然偏转且永停滴定法指示：电流计突然偏转且数分钟不退回数分钟

40、不退回 费休试剂：要求纯度高，含水量费休试剂：要求纯度高，含水量0.1% 0.1% 其中的其中的I I2 2干燥器中干燥器中48hr48hr； SOSO2 2用浓用浓H H2 2SOSO4 4脱水后再配制脱水后再配制 供试品取量：以消耗费休液供试品取量：以消耗费休液1 15ml5ml为宜为宜 实验条件：不宜在温度高的环境中操作实验条件：不宜在温度高的环境中操作 检查不含金属的有机药物或挥发性无检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质机药物中混入的无机杂质( (金属氧化物或无金属氧化物或无机盐类机盐类) )。 1. 1. 原理原理 样品炭化样品炭化/ /分解后分解后+ H+ H2

41、2SOSO4 4湿润湿润700700800800炽灼至恒重炽灼至恒重炽灼残渣（硫酸灰分）炽灼残渣（硫酸灰分）限量一般为限量一般为0.1%0.1%0.2%0.2% 九、炽灼残渣检查法九、炽灼残渣检查法2. 操作方法残渣（恒重）完全灰化蒸气除尽至放冷至全部黑色、无烟雾，炽灼至恒重的坩埚样品燒乾燥器放冷至室溫再灼高温灼烧湿润，直火加热直火缓缓加热8007004215 . 0SOHSOH42ml3. 3. 注意事项注意事项 （1 1）供试品的取样量应根据炽灼残渣）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。限量和称量误差决定。（2 2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采

42、用铂坩埚。用铂坩埚。（3 3）若残渣需留作重金属检查，则）若残渣需留作重金属检查，则500500600600炽灼至恒重。炽灼至恒重。（4 4）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化硫酸盐，并帮助有机物炭化 十、溶液颜色检查法十、溶液颜色检查法控制药物中有色杂质限量的方法。控制药物中有色杂质限量的方法。 采用三种方法检查：采用三种方法检查： 第一法第一法 目视比色法目视比色法 即与标准比即与标准比色液比较的方法，色液比较的方法，标准比色液的配制标准比色液的配制 个色号标准比色液种色调种色调标准贮备液溶液、不同量水稀释不同比例5055CuSOCoCl

43、OCrK42722第二法 分光光度法 单一波长定量第三法 色差计法 全波长范围定量 本法是通过色差计直接测定溶液本法是通过色差计直接测定溶液的的透视三刺激值透视三刺激值，对其颜色进行定量，对其颜色进行定量表述和分析的方法。表述和分析的方法。 测色仪器一般为光电积分型色差计测色仪器一般为光电积分型色差计十三、澄清度检查法十三、澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质，检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项用作注射剂的原料药一般应作此项检查。检查。 1. 检查方法 对照法 比较供试品溶液供试品规定级号的浊度标准液 2. 浊度标准液的配制 中国药典规定用浊度标准液作为中国药典规定

44、用浊度标准液作为澄清度检查的标准。澄清度检查的标准。 反应原理：乌洛托品在偏酸性条反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。操作：1.001.00硫酸肼溶液与硫酸肼溶液与1010乌洛乌洛托托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液品溶液等量混合配制浊度标准贮备液 浊度标准原液浊度标准原液 浊度标准液（浊度标准液（5 5个级号）个级号）稀释稀释3. 3. 判断：判断：药典中规定的药典中规定的“澄清澄清”，系，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过剂

45、，或未超过0.50.5号浊度标准液。号浊度标准液。4. 4. 溶剂溶剂：水、酸、碱、有机溶剂：水、酸、碱、有机溶剂* * 有机酸的碱金属盐类药物强调用有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水新沸过的冷水”定义：定义： 药物生产和贮存过程中，据药物生产和贮存过程中，据药药物自身物自身性质、生产方法、工艺条件性质、生产方法、工艺条件可能引入的杂质。可能引入的杂质。第三节特殊杂质检查第三节特殊杂质检查旋光法旋光法物理法物理法化学法化学法光谱法光谱法色谱法色谱法检查方法检查方法四、分光光度法：四、分光光度法： 利用杂质与药物利用杂质与药物对光选择吸收差对光选择吸收差异异，通常选药物无吸收而杂质有吸收

46、，通常选药物无吸收而杂质有吸收的波长测的波长测 规定值规定值 ( (一一) )紫外分光光度法紫外分光光度法、药物无吸收而杂、药物无吸收而杂质质有吸收：有吸收：肾上腺素肾上腺素(药物药物)肾上腺酮肾上腺酮（杂质）（杂质）310nm无吸收无吸收有吸收有吸收规定在规定在310nm处测处测0.05、药物与杂、药物与杂质质在某一波长有重叠在某一波长有重叠碘解磷定碘解磷定分解产物分解产物294nmmax无吸收无吸收262nmmin有吸收有吸收x不含分解产物不含分解产物A294/A262A294/A262Amax/AminAmax/Amin含分解产物含分解产物A294/A262A294/A262(Amax(

47、Amax0)/(Amin+Ax)0)/(Amin+Ax)A294/A2623.1A294/A2623.1合合 格格( (二二 ) )比色法：比色法：u 供试品试剂供试品试剂u 对照品试剂对照品试剂 比色比色 AF710-3AF710-3目视目视 比色计比色计 ( (三三) )红外分光光度法：红外分光光度法：l 常测药物中无效常测药物中无效/ /低效晶型。低效晶型。遵循朗伯比尔定律遵循朗伯比尔定律数学表达式：数学表达式：A Akbckbcl A A 吸光度；吸光度；l K K 比例常数；比例常数；l B B 基态原子层的厚度；基态原子层的厚度；l C C 蒸汽中基态原子的浓度。蒸汽中基态原子的浓度。基本原理( (四四) )原子吸收分光光度法：原子吸收分光光度法： 分析方法分析方法-标准曲线法标准曲线法配制一组含有不同浓度被测配制一组含有不同浓度被测元素的标准溶液，在与试样测元素的标准溶液，在与试样测定完全相同的条件下，按浓度定完全相同的条件下，按浓度由低到高的顺序测定吸光度值。由低到高的顺序测定吸光度值。绘制吸光度对浓度的校准曲线。绘制吸光度对浓度的校准曲线。 测定试样的吸光度，在校准测定试样的吸光度，在校准曲线上求出被测元素的含量。曲线上求