中药三棱炮制工艺优化的考察

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减中药三棱炮制工艺优化的考察（作者：单位：邮编：）【摘要】目的优化中药三棱炮制工艺，考察影响三棱炮制的因素。方法参照中国药典重点考核醋制工艺，对其进行多 因素考察，设计正交实验，在此基础上参考文献中其它炮制工艺，进 行横向比较。考察标准以三棱的有效部位总黄酮为标准，采用紫外分光光度法（UV ）进行含量测定，并对数据作统计学处理（方差分析）， 找出最佳优化方案。结果醋炙三棱总黄酮含量为最高，比生品含量增 加29.79 %左右，麸炒三棱含量为最低，比生品含量减少52.25 %左右。 其它炮制方法中醋烤三棱总黄酮含量比生品含量增加13.10 %，醋煮三棱总黄酮含量比

2、生品含量增加 3.73 %，醋蒸三棱总黄酮含量比生品 增加8.63 %，清蒸三棱总黄酮含量比生品含量增加3.05 %;醋炙的最 佳工艺为20 %的用醋量浸润10min在150 C下炒制15min。结论炮制 方法直接影响三棱总黄酮含量，该研究为优选三棱最佳炮制工艺提供【关键词】 三棱；炮制工艺优化； 紫外分光光度法； 总黄酮Abstract:ObjectiveTo optimize the processing method of theChin ese traditi onal medic ine Rhizoma Sparga nii. MethodsTo study the vinegar

3、roasting-processingmethod emphatically, which isembodied by Chinese pharmacopoeia. Review the method by multifactor study, design the orthogonal expermient and on this foun dati on con sult other process ing method recorded by literature as well as compare with one another. The review criterion is b

4、ased on the valid part of gross flavone, utilize UV method to measure the content and cope with the datum by statistics so as to find out the optimal scheme.ResultsThe RhizomaSparga niiof vin egarroasti ng-process ing had the highest content of gross flav one, which in creased by 29.79% of the raw m

5、edici ne. Bran process ing Rhizoma Sparga nii holds the lowest content of gross flav one, which deareased 52.25% of the raw medici ne. Other process ing methods indicated that Rhizoma Sparganii processed by vinegar baking, steam, braisi ng as well as steam braisi ng severally in creased by 13.10%,3.

6、73% ,8.63%and 3.05% that of the raw medicine. The optimal processing method of vinegar toasting contained 20% vin egar usage, 10 min soakage and 15min frying. Con clusi on The processing method affects the content of gross flavone directly. The study may offer reference for optimizing the best proce

7、ssing method of Rhizoma Sparga nii.Key words:RhizomaSparganii. ; Optimal processing method ; UV; Gross flavone三棱是常用的活血化淤中药，具有破血行气，消积止痛的 作用，临床上用于心血管疾病以及子宫肌瘤、子宫内膜异位症等妇科疾病的治疗。目前三棱主要炮制方法以醋制法居多，部分地区尚有麸炒或酒麸炒等方法。醋制法中又包括炙、炒、煮、蒸等不同炮制工艺。 本实验重点以目前最常用的醋炙法1 为突破口，考察影响醋炙法 的因素和水平，探索最佳炮制工艺，并在此基础上与文献收载的其它 炮制方法进行横向比较。

8、1仪器与试药1.1仪器紫外分光光度仪（UV-2401PC ），电子天平（Mettler toledo）。1.2试药 三棱药材由河北安国药材市场购入，经鉴定为黑三棱 科植物黑三棱 Sparganium stoloniferum Buch.-Ham.的干燥块茎。芦 丁标准品（本校药化教研室提供，纯度 98% ）、95 %乙醇（分析纯）、 5 %亚硝酸钠、10 %硝酸铝、0.025 g/ml氢氧化钠、蒸馏水、醋（市售）。2方法和结果2.1对照品溶液的制备精密称取减压干燥至恒重的芦丁对照品（自制）0.011 2 g置100 ml的容量瓶中，加60 %乙醇适量使其完全 溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（0

9、.112 mg/ml ）。2.2供试品溶液的制备按照提取方法考察的结果（见“ 2.3”项） 对不同炮制样品（见“ 2.5 ”项和2.6”项）进行提取，得到供试品溶液。具体操作方法为取炮制样品粉末 5 g,置于100 ml圆底烧瓶中，加入 12倍量75 %的乙醇溶液水浴加热，每次提取1 h，提取3次,过滤， 合并滤液，置于100 ml的容量瓶中，并用75 %的乙醇溶液定容至刻 度，摇匀，即为供试品溶液。2.3标准曲线的考察231最大吸收波长的选择分别用对照品（芦丁）和供试品（三 棱醇提物）在紫外-可见分光光度仪上进行全波长扫描（200700nm），比较两者的最大吸收峰，结果在 250 nm和50

10、2.8 nm处各有 一个吸收峰，考虑在250 nm左右很多成分都有吸收，会干扰实验结 果，故选择502.8 nm为最大吸收波长。2.3.2标准曲线的绘制精密吸取 0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0， 6.0 ml上述标准液分别置于25 ml容量瓶中，再精密加入5 %NaNO21 ml摇匀，放置6 min ;加入10 %Al （NO3 ） 31 ml摇匀，放置6 min ; 加入NaOH溶液10 ml摇匀，用蒸馏水标定至刻度摇匀，放置15min， 配制成含芦丁 0，4.48，8.96，13.44，17.92，22.40，26.88 血/ml 的标准溶液。以第一瓶溶液作为空白对照，在波

11、长502.8 nm处测定其它浓度下的吸收率。以芦丁的浓度（卩g/ml ）为横坐标，吸光度为 纵坐标，绘制标准曲线（见图1），回归方程：Y=4.48X，r=1，表明 芦丁在4.4826.88/ml线性关系良好。图1芦丁标准曲线（略）2.4三棱提取方法的考察选用回流法提取三棱，考察乙醇浓度、提取时间、提取次数、乙醇用量倍数4个因素，每个因素考察3个水平，设计正交实验（见表 1）,考虑误差的影响，每次实验进行三次 平行实验。具体方法是按照正交表L9（ 34 ）设计实验，每次称取三棱粉末5 g （过40目筛），置于100 ml圆底烧瓶中，按照实验设计 进行回流提取，后放冷过滤到100 ml容量瓶中，定

12、容至刻度，摇匀， 然后通过分光光度仪在502.8 nm处进行含量测定，以确定最佳提取 方法。由实验结果（见表2）可知，提取因素主次为ACDB，结合比 位级可知最佳组合为 A2B1C3D3。方法学考察显示 ABCD均为极显 著因素（见表3）:F值均大于临界值，F0.01（2,18）=6.01 ，故最佳 提取工艺为A2B1C3D3。即用12倍量的75 %的乙醇溶液，每次提取 1h，提取3次，即为供试品溶液。表1三棱提取工艺实验因素和水平（略）表2三棱不同提取方案和实验结果（略）表3提取工艺方差分析（略）*示非常显著性差异2.5三棱醋炙工艺的考察参照文献2选用减压冷浸 方法净制三棱药材，切片备用。考

13、察醋炙温度、醋炙时间、浸润时间 和用醋量4个因素，各设3个水平，建立正交实验表L9 （34）（见表 4）。考虑误差的影响，每次实验进行3次平行实验。炮制后按照优选 后的方法提取（具体提取方法见供试品溶液的制备）。实验结果（见 表5 ）显示炮制因素的主次为DABC，结合比位级最佳组合为A2B2C1D2。方差分析（见表6）显示因素A、B为显著因素F值 F0.05（2,18）, F0.05（2,18）=3.55 ，而 B、C 对实验影响不显著F 值 F0.05（2,18）,故将B、C列入误差项处理。考虑实验最终测得含量 和饮片形性状特征，最终选择最佳工艺为D2A2B3C1，即用20 %的用 醋量浸润

14、10 min于150 C下炒制15 min即得。表4三棱醋炙工艺实验因素和水平（略）表5三棱不同醋炙方案和实验结果（略）表6醋炙工艺方差分析（略）*示显著性差异2.6三棱不同炮制品的制备及结果 参考文献收载的三棱其它 炮制工艺2,分别测定含量，并与本实验中醋炙优化工艺进行横向 比较，考察各方法的优劣（结果见表 7）。由结果可知优化后的醋炙 方法在黄酮含量上明显高于其它方法，说明优化后的醋炙工艺确实提 高了炮制饮片的质量。表7三棱不同炮制品总黄酮含量比较（略）3方法学考察3.1精密度实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，重复测定5次,测定芦丁含量，计算RSD。RSD

15、为0.62%。3.2重现性实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，重复测定5次,测定芦丁含量，计算RSD。RSD为0.53%。3.3稳定性实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，每隔10 min测定芦丁含量1次，计算RSD RSD为1.23%。3.4加样回收率实验 采用加样回收法，取已知含量的三棱粉末 5份，精密称定5 g，置于100 ml的容量瓶中，分别精密吸取 0.112 mg/ml的芦丁对照品溶液2 ml，置于上述100 ml的容量瓶中，按供 试品溶液制备及测定法操作,计算结果。芦丁的加样回收率为103.57 %, RSD 为 1.31 %。4讨论三棱目前有效成分不明确，可能的有效部位有黄酮类、甘 露醇、皂苷、挥发油3。由于黄酮多具有活血化淤的作用，故本实 验选用三棱总黄酮作为可能的有效部位，并以总黄酮为主要指标对其 炮制方法进行考察。优化后的醋炙法总黄酮含量明显的比其