猪繁殖与呼吸综合征病毒课件

1、猪繁殖与呼吸综合征病毒1 猪繁殖与呼吸综合征病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)(PRRSV) 猪繁殖与呼吸综合征病毒2 PRRSVPRRSV属于属于尼多病毒目、动脉炎病毒科，该科尼多病毒目、动脉炎病毒科，该科 还包括马动脉炎病毒（还包括马动脉炎病毒（EAVEAV）、鼠乳酸脱氢酶）、鼠乳酸脱氢酶 增高症病毒（增高症病毒（LDVLDV）、猴出血热病毒（）、猴出血热病毒（SHFVSHFV） PRRSV LDV EAV SHFV 一、猪繁殖与呼吸综合征病毒的分类地位一、猪繁殖与呼吸综合征病毒的分类地位 猪繁殖与呼吸综合征病毒3 猪繁殖与呼吸综合征猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)(PRRS)，又称

2、蓝耳病，又称蓝耳病 19871987年年首次暴发于美国北卡罗纳州首次暴发于美国北卡罗纳州“神秘病神秘病”， 导致至少导致至少100100万头猪死亡万头猪死亡 19911991年，年，PRRSPRRS席卷欧洲大陆席卷欧洲大陆 19961996年，年，PRRSPRRS在我国首次爆发；同年，丹麦再次暴在我国首次爆发；同年，丹麦再次暴 发发PRRSPRRS，全国，全国40-50%40-50%的母猪出现流产、死胎和断奶的母猪出现流产、死胎和断奶 前仔猪的大量死亡前仔猪的大量死亡 20002000年，美国再次大爆发年，美国再次大爆发PRRSPRRS，并将其列为当前最，并将其列为当前最 严重的猪病毒性传染病

3、严重的猪病毒性传染病 目前，目前，PRRSPRRS遍及世界养猪国，并呈流行态势遍及世界养猪国，并呈流行态势 二、二、PRRSVPRRSV的发现与流行的发现与流行 猪繁殖与呼吸综合征病毒4 三、猪繁殖与呼吸综合征的危害三、猪繁殖与呼吸综合征的危害 母猪母猪早产、流产、死胎、早产、流产、死胎、 弱仔弱仔 公猪公猪精液品质下降精液品质下降 初生仔猪初生仔猪高死亡率高死亡率 其它年龄猪其它年龄猪呼吸系统疾病呼吸系统疾病 猪繁殖与呼吸综合征病毒5 根据美国农业部根据美国农业部20052005年统计的资料表明，年统计的资料表明，20042004年，年， 蓝耳病导致的直接经济损失为蓝耳病导致的直接经济损失为

4、5.60325.6032亿美元。亿美元。（ Neumann et al. J Am Vet Med Assoc. 2005 Aug Neumann et al. J Am Vet Med Assoc. 2005 Aug 1;227(3):385-92)1;227(3):385-92)。 猪繁殖与呼吸综合征的危害猪繁殖与呼吸综合征的危害 猪繁殖与呼吸综合征病毒6 20062006年，高致病性年，高致病性PRRSPRRS在我国在我国1010多个省市大规多个省市大规 模爆发，至少模爆发，至少200200万头猪发病，不仅对我国养猪万头猪发病，不仅对我国养猪 业造成巨大的经济损失，而且导致了严重的环业造

5、成巨大的经济损失，而且导致了严重的环 境问题。境问题。 猪繁殖与呼吸综合征病毒7 自自20092009年年6 6月份以来，安徽、湖北等地出现月份以来，安徽、湖北等地出现PRRSPRRS疫疫 情，分析了情，分析了6-116-11月份从安徽、湖北、湖南等省份月份从安徽、湖北、湖南等省份 采集的采集的394394头发病猪的感染情况，发现高致病性头发病猪的感染情况，发现高致病性 PRRSVPRRSV变异株阳性率为变异株阳性率为75.6%75.6%。 猪繁殖与呼吸综合征病毒8 四、四、PRRSV病毒粒子与基因组病毒粒子与基因组 猪繁殖与呼吸综合征病毒9 PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒 病毒粒子呈

6、球形，直径为48-83nm， 平均大小为50-65nm 核衣壳直径25-30nm，核衣壳呈二 十面体对称 外绕一脂质双层膜，囊膜表面有明 显的纤突 PRRSV病毒粒子病毒粒子 AAA 猪繁殖与呼吸综合征病毒10 蓝耳病病毒基因组组成与复制蓝耳病病毒基因组组成与复制 猪繁殖与呼吸综合征病毒11 主要结构蛋白主要结构蛋白GP5GP5 GP5GP5蛋白：由蛋白：由ORF5ORF5编码，是编码，是PRRSVPRRSV最主要的保护性最主要的保护性 抗原。抗抗原。抗GP5GP5的单抗能中和病毒的单抗能中和病毒, ,而且目前唯一确而且目前唯一确 定的中和表位位于定的中和表位位于GP5GP5的胞外区，是研究的

7、胞外区，是研究PRRSPRRS新新 型疫苗的良好目标基因。型疫苗的良好目标基因。 猪繁殖与呼吸综合征病毒12 主要结构蛋白主要结构蛋白M M M M蛋白：由蛋白：由ORF6ORF6编码，是编码，是PRRSVPRRSV中最保守的蛋中最保守的蛋 白，是一种非糖基化蛋白。与白，是一种非糖基化蛋白。与GP5GP5通过二硫键通过二硫键 连接形成异源二聚体连接形成异源二聚体 猪繁殖与呼吸综合征病毒13 主要结构蛋白主要结构蛋白N N N N蛋白：即核衣壳蛋白，由蛋白：即核衣壳蛋白，由ORF7ORF7编码，免疫原性编码，免疫原性 极强，但针对此蛋白的抗体均是非中和性的抗体。极强，但针对此蛋白的抗体均是非中和

8、性的抗体。 甚至有研究表明杆状病毒表达的甚至有研究表明杆状病毒表达的N N蛋白不仅不能提蛋白不仅不能提 供保护，反而对保护有干扰作用。供保护，反而对保护有干扰作用。 可能的原因？可能的原因？ 猪繁殖与呼吸综合征病毒14 非结构蛋白非结构蛋白 解析非结构蛋白的结构与功能是目前研究的重点解析非结构蛋白的结构与功能是目前研究的重点 猪繁殖与呼吸综合征病毒15 EAVEAV非结构蛋白研究非结构蛋白研究 猪繁殖与呼吸综合征病毒16 五、五、PRRSVPRRSV的生物学特性的生物学特性 一种血清型，两种基因型（欧洲型、美洲型），两一种血清型，两种基因型（欧洲型、美洲型），两 种基因型间的全基因组序列同源性

9、仅为种基因型间的全基因组序列同源性仅为50-60%50-60%，但，但 临床表现、病理变化非常相似（是如何进化的？）临床表现、病理变化非常相似（是如何进化的？） 具有比较严格的宿主细胞特异性，在体内，肺泡巨具有比较严格的宿主细胞特异性，在体内，肺泡巨 噬细胞是其主要靶细胞噬细胞是其主要靶细胞 通过受体介导的内吞侵入细胞。目前已经确定的受通过受体介导的内吞侵入细胞。目前已经确定的受 体主要有：硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、体主要有：硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、CD163CD163 猪繁殖与呼吸综合征病毒17 六、六、PRRSVPRRSV的的4 4大特征大特征 1 1、高度变异、高度变异 2 2、免

10、疫抑制、免疫抑制 3 3、持续感染、持续感染 4 4、抗体依赖性增强、抗体依赖性增强 猪繁殖与呼吸综合征病毒18 （1 1）高度变异）高度变异 猪蓝耳病病毒基因组结构猪蓝耳病病毒基因组结构 猪繁殖与呼吸综合征病毒19 l1996-20091996-2009年国内年国内PRRSVPRRSV分离株基分离株基 因组的遗传进化，揭示我国因组的遗传进化，揭示我国PRRSVPRRSV 存在存在4 4个亚型个亚型 l代表毒株：代表毒株： 疫苗株疫苗株 CH-1aCH-1a株株 HB-1(2002)HB-1(2002)株株 JXA1JXA1株株 1996-20091996-2009年中国分离株年中国分离株 全

11、基因组聚类分析全基因组聚类分析 （6767株株PRRSVPRRSV） 猪繁殖与呼吸综合征病毒20 1996-20091996-2009年中国分离株年中国分离株 ORF5ORF5基因进化树分析基因进化树分析 (496(496株株PRRSVPRRSV的的ORF5ORF5序列序列) ) 07QN HeNY1 XJ07 AHES3 DY07 LA TQ FX07 JN GXHZ12 HuNXB ZJ06 SY0608 GXHZ4 BQ Henan-1 GY Henan-1(2) GXHZ16 HuN711 EF534356 HeNMN BQ07 HeNWY LJ JX-1 JXHR GXHZ21 GX

12、HZ14 GXHZ19 SD HSH08 HeN-14 GDSD1 YNYX3 YNYX1 NXZHW NXZHN NXHY Rongchang-1 GSLZH YN03 YN02 GZZB GZWM GZKB GZKY GZHW1 GZDJ GZHX GZCJ GZHL GZWB ZJWL HZ061226 SDWF2 henan07-1 FH NB070319 SZ-L WJ-1 SH HBGS JX0504 WJ-3 FY HB-Tsh1 HB-Xt1 Jiangxi Hainan-2 Hainan-1 LC07 BB07 CX07 TQ07 WF07 TWO7 KS06 LS06 SH

13、02 CZ07 NB HLJMZ3 HLJMZ1 HLJMZ2 GXLZ7 HeN-9 HeN-4 SZH08 Jiangxi-1 HUB HB1 HB3 HB2 SD5 XH-GD WUH3 HPBEDV JXA1 SD14 HUN11 ZX07 CL07 WJ-2 AHZHP HuN829 HuN504 HeN-1 HUB2 HUB1 YH 06-JS-1 HeN-16 06-HZ-2 HeN-15 HeN-10 HUN4 JX143 06-SH-2 NX06 FY080108 SHX 06-JX-2 07NM BJsy06 HeN-LY JX1 ZJCJ HEN46 HeN-13 Hun

14、an-3 HeNPD JXNS HZ070105 WUH2 07HEN 07HEBTJ 06-TZ SD4 Guizhou-1 Hunan-2 GXHZ13 GD(2) HUN4(2) NM1 07HBEZ Hunan-1 CA HEB1 HUN3 SD7 HuN329 JSyx FY060915 SD3 HNly HUN7 HUN5 BJ HeN-JY NT JS-B LY07 Jiangxi(2) SC07 06-JX 06-HZ-1 GXHZ2 JiangSu AHL81 ZSB JXQS1 HBX05 Jiangxi-3 Jiangxi-3(2) Jiangxi-2 AH-1 HNsf

15、 ZS070921 GD1 GD3 GD4 GD2 06-JX-5 06-JX-3 FZ SCH07 AH1 ShanDong-3 SD-JN ShanDong-3(2) 06-JS-2 AHZC YN2008 SX2007 GS2008 XL2008 JX2006 HN2007 GD2007 SHH JXwn06 TJ JLYS LN TJDMJ TJZHJ3 TJZHJ2 HUNX4 HUN17 GXLZ5 GXHP-4 GXHP-2 GXHP-6 GXHP-5 GXHP-3 HNyz HNld GD 07BJ GDY1/2007 GDY2/2007 GDYF106-JX-4 HUNH4

16、XS HUN6 HUNH2 HUN15 HeNE1 WUH1 AHYT JXTZ JXCD9 JXYC HBTZ JXD05 JXA10 JXNC8 JXB21 JXZ3 JXBH3 JXC2 AHCFZC HLJZY HLJDF JX5 JX-2(2) HUN2 JX4 JX3 HUN16 AHCFSH AHXA YN10 BD-8 EU075303 HQ-5 PRRSV-J31 AHHG JXGD HeNZK HM-1 GC-2 GCH-3 ST-7 HQ-6 HB-4(hs) HUNL1 AHXS4 AHAQ3 AHHB NB/04 Wujin/06 HeN-2 HeN-2(2) HeN

17、-5 HeN-8 SX-2 Yizheng/06 Rugao/06 Lianyungang/05 04-HZ-3 Siyang/06 GDZC1 CC-2 JXH72 JXHUA1 HBD32 HBH52 HBA81 SH061130 HBD41 SX-3 HBXT HeN-6 Taizhou/06 HeNYE4 HeNXY2 Changzhou/05 TZ-1 SD-ZQ TZ-2 Zhenjiang/05 HeN-12 GDHZ1 Tianchang/05 SX-1 05-JX-1 HBAN1 HB-1/3.9 HB-1(3.9) HB-1(sh)/2002 HZ-1 NB-3 HZ-4

18、SX-4 HZ-2 HB-3(cz) HB-3(cz)(2) AHHU2 04-HZ-1 HZ-X/2003 JX-3 GDCZ2 NB-1 GDDG1 GDCZ1 GD-1 AHXZ AHW01 05-QZ Suzhou/05 JX-2 XS070425 YN06 Yunnan-08 HeN-11 HBSY5 HB066 HBJZ2 AHTM JXQS3 WZ HeN-7 HBSZ Em2007 HBX04 HBJM2 HB-2(sh)/2002 CH-1a CH-1R YA1 CH2004 CH2003 CH2002 JA142 NVSL SP S-1 LMY ZJJ07 16244B F

19、J04A SD1 SD-2 SD6 PRRSV03 PRRSV02 VR-2332 PA8 JXHS PL97-1 PL97-1-LP1 YN08 YN01 YN05 CC-1 YN04 YN09 YN07 AY684971 GS2003 GS2002 GS2004 HZ07 AF090173 RespPRRS MLV MLV RespPRRS Repro ZJJ04 QZ ZJJ05 NH04 XX03 HBC86 HBH61 HeN-3 SX071226 SD2 SD-1 LY03 AY885248 WF03 PRRSV01 S1 HT06 AY737282 LS05 TW07-1 AY5

20、13611 FJ-1 MN184A MN184B LV4.2.1 LV 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 l1996-20091996-2009年国内年国内PRRSVPRRSV分离株分离株ORF5ORF5基因的遗传进化基因的遗传进化 ，发现，发现GP5GP5蛋白不仅存在抗原漂移蛋白不仅存在抗原漂移 猪繁殖与呼吸综合征病毒21 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(1)(1) 猪繁殖与呼吸综合征病毒22 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(2)(2) 猪繁殖与呼吸综合征病毒23 Based on GP5(2002) Based on GP5(2006)

21、 Based on Genome and GP5(2009) 疫苗疫苗 株株 CH-1a HB-1 HB-1强毒株强毒株 疫苗株疫苗株 CH-1a HB-1 HP-PRRSV Li et al., 2010 HP-PRRSVHP-PRRSV的溯源的溯源(3)(3) 猪繁殖与呼吸综合征病毒24 l蓝耳病病毒在我国高度变异蓝耳病病毒在我国高度变异 病毒本身的特性（病毒本身的特性（RNARNA病毒）：突变、病毒）：突变、 缺失、插入缺失、插入 免疫压力免疫压力 疫苗疫苗/ /疫苗、强毒疫苗、强毒/ /强毒、强毒强毒、强毒/ /疫苗株疫苗株 间的重组间的重组 猪繁殖与呼吸综合征病毒25 （2）免疫抑制

22、）免疫抑制 Temporal sequence of events after infection of a pig with PRRSV (From Lopez et al, 2004) 慢慢 中和抗体？中和抗体？ 细胞免疫？细胞免疫？ 猪繁殖与呼吸综合征病毒26 IFN replicatio n PRRSV proteins IKK TBK1 IPS-1IPS-1 STINGSTING PRRSVPRRSV抑制干扰素抑制干扰素 等天然免疫反应等天然免疫反应 PRRSVPRRSV编码蛋白诱编码蛋白诱 导的细胞免疫能导的细胞免疫能 力也不强力也不强 抑制细胞免疫抑制细胞免疫 猪繁殖与呼吸综合征病毒27 非中和表位的诱骗效应？非中和表位的诱骗效应？ 过度糖基化的屏蔽效应