川贝枇杷糖浆的限量检测

1、川贝枇杷糖浆的限量检测川贝枇杷糖浆的限量检测配制培养基配制培养基清洗、烘干、制无菌水清洗、烘干、制无菌水包扎、灭菌包扎、灭菌稀释样液稀释样液倒平板、培养倒平板、培养观察、计数观察、计数 配制培养基配制培养基玫瑰红钠琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基注：注：1.1.在加入药品后微温溶解，滤过后在加入药品后微温溶解，滤过后加入玫瑰红钠、葡萄糖加入玫瑰红钠、葡萄糖 2.2.玫瑰红钠固体在加入玫瑰红钠固体在加入1000ml1000ml水时水时加入加入0.0133g0.0133g 玫瑰红钠液体在加入玫瑰红钠液体在加入1000ml1000ml水时应水时应加入加入10ml10ml蛋白胨蛋白胨琼脂琼脂磷酸氢二钾磷酸

2、氢二钾硫酸镁硫酸镁玫瑰红钠玫瑰红钠葡萄糖葡萄糖水水5g+1g5g+1g14g+2.614g+2.6g g1g+o.2g1g+o.2g0.5g+0.5g+o.1go.1g10ml+2m10ml+2ml l10g+210g+2g g1000ml+1000ml+200ml200ml注释注释 蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必须的微量元素；玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长；琼脂是培养基的凝固剂.同时玫瑰红钠可供霉菌和酵母菌的计数，但霉菌的生长可抑制其他菌种的生长，故在玫瑰红钠培养基中处于优势生长地位。葡萄糖琼脂养

3、基培葡萄糖琼脂养基培蛋白胨蛋白胨琼脂琼脂酵母菌膏酵母菌膏葡萄糖葡萄糖水水5g5g14g14g5g5g20g20g1000ml1000ml注：加入药品后，微热温溶解，注：加入药品后，微热温溶解，滤过后再加入葡萄糖滤过后再加入葡萄糖清洗、烘干、制无菌水清洗、烘干、制无菌水1.1.清洗培养皿、移液管、试管（清洗移清洗培养皿、移液管、试管（清洗移液管要将管内的水滴甩干净，以防烘液管要将管内的水滴甩干净，以防烘干时耗时过长）干时耗时过长）2.2.将培养皿、移液管放于烘箱中烘干将培养皿、移液管放于烘箱中烘干3.3.在在4 4支试管中分别加入支试管中分别加入9ml9ml蒸馏水，塞蒸馏水，塞紧，用纸包扎，一会

4、灭菌紧，用纸包扎，一会灭菌包扎、灭菌包扎、灭菌1.1.烘干的移液管，烘干的移液管，在管口处塞上棉在管口处塞上棉花，不能松也不花，不能松也不能紧，然后与报能紧，然后与报纸成纸成3030度至度至4545度度包扎起来包扎起来2.2.将烘干的将烘干的8 8个培养皿个培养皿包扎起来包扎起来3.3.将培养基、培养皿、移将培养基、培养皿、移液管、试管一起放入灭液管、试管一起放入灭菌锅内灭菌菌锅内灭菌3030分钟分钟( (121121、103kpa103kpa) )稀释样液稀释样液1.1.将将8 8个培养皿分为个培养皿分为4 4组，编号组，编号1 1、2 2、3 3、4 42.2.将移液管、试管分别编号将移液

5、管、试管分别编号1 1、2 2、3 3、4 43.3.1 1组组，用，用1 1号移液管在号移液管在1 1号试管中取无菌水，分别向号试管中取无菌水，分别向1 1组培养基中加入组培养基中加入1ml1ml无菌水无菌水 2 2组组，用，用1 1号移液管取号移液管取1ml1ml的川贝枇杷糖浆注入的川贝枇杷糖浆注入2 2号试号试管，用管，用2 2号移液管吹打混匀，再分别取号移液管吹打混匀，再分别取1ml1ml样液于样液于2 2组培养皿中组培养皿中 3 3组组，用，用2 2号移液管在号移液管在2 2号试管中取号试管中取1ml1ml样液注入样液注入3 3号号试管中，用试管中，用3 3号移液管吹打混匀，再分别取

6、号移液管吹打混匀，再分别取1ml1ml样液样液于于3 3组培养皿中组培养皿中 4 4组组，用，用3 3号移液管在号移液管在3 3号试管中取号试管中取1ml1ml样液注入样液注入4 4号号试管中，用试管中，用4 4号移液管吹打混匀，再分别取号移液管吹打混匀，再分别取1ml1ml样液样液于于4 4组培养皿中组培养皿中 倒平板、培养倒平板、培养1.1.在无菌环境中将培养基倒入培养皿中在无菌环境中将培养基倒入培养皿中 注：培养皿要持平，到后盖上皿盖，放在试验台上注：培养皿要持平，到后盖上皿盖，放在试验台上正反旋转几次，以正反旋转几次，以 使培养皿中液体混匀使培养皿中液体混匀2.2.将培养皿放于培养箱中

7、培养将培养皿放于培养箱中培养7272小时小时观察、计数观察、计数一、菌落计数一、菌落计数1.1.选取菌落数在选取菌落数在30cfu-300cfu30cfu-300cfu之间、无蔓延菌落生长的平板之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数计数菌落总数2.2.低于低于30cfu30cfu的平板记录具体菌落数，大于的平板记录具体菌落数，大于300300的可记录为多可的可记录为多可不记，每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。不记，每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。3.3.其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平

8、板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以半个平板后乘以2 2，代表一个平板菌落数。，代表一个平板菌落数。4.4.当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，则将每条单链当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数作为一个菌落计数二、菌落总数计算方法二、菌落总数计算方法1.1.只有一个稀释度平板的菌落数在适宜计数范围内，计算两只有一个稀释度平板的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再用平均值乘以相应稀释倍数，个平板菌落数的平均值，再用平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或毫升）中菌落总数结果。作为每克（或毫升）中菌落总数结果。2.2.若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内，按若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内，按下式计算下式计算n=c/(n1+0.1n2)d平板菌落数之和平板菌落数之和第一平板菌落数第一平板菌落数第二平板菌落数第二平板菌落数稀释因子稀释因子空白对照空白对照稀释稀释1010倍倍稀释稀释100100倍倍稀释稀释1000倍倍结果结果1.1.稀释稀释1010倍