不同商品柘木中槲皮素和山萘酚的含量测定

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减不同商品柘木中槲皮素和山萘酚的含量测定(作者：单位：邮编：)作者：李正言，翟延君，滕 宇，伍伟超【摘要】 目的测定柘木药材中双指标成分槲皮素与山萘酚的含量， 为柘木商品药材的质量控制提供方法。 方法采用高效液相色谱法，以 槲皮素和山萘酚为指标，对购自广西不同商品柘木药材进行含量测 定。结果不同商品柘木中槲皮素和山萘酚的含量有显著差异。结论实验方法简便、快速、准确，可为鉴定柘木的药用部位和控制柘木药材 的质量提供参考。【关键词】 柘木；槲皮素；山柰酚；高效液相色谱法柘木为桑科植物柘树 Cudrania tricuspidata(Carr.)Bur.的干燥根及

2、木材1。柘木始载于本草拾遗，1977年版中国药典曾将柘树 的根收载于穿破石项下2，是我国传统的中药材。柘树广泛分布于我 国的华南、华东、西南以及河北以南地区。民间多用柘木的水煎液治 疗消化系统的癌症3，能明显改善病人生活质量，延长生存期。柘木 糖浆作为消化系统癌症治疗中的辅助治疗药物具有较好的临床疗效。文献报道柘木中含有黄酮、生物碱及多糖等多种成分，现代药理研究 证明黄酮类成分具有体外抗肿瘤的作用4。本实验采用HPLC法， 以槲皮素和山萘酚为指标，对购自广西不同商品的柘木药材进行了含 量测定，通过双指标成分含量来评价柘木商品药材的质量和鉴定药用 部位，为柘木商品药材的质量控制提供参考。1仪器与

3、试药1.1仪器Agile nt 1100液相色谱仪；DAD检测器；电子天平（上 海天平仪器厂）；KQ-250型超声清洗器（昆山超声仪器有限公司）。1.2试药实验所用药材购于广西各地，经广西中医学院中药鉴 定教研室廖月葵老师鉴定为桑科柘属植物柘树Cudrania tricuspidata（Carr.）Bur.的干燥根及木材。槲皮素（批号：10129905）、 山萘酚（批号:1108612200303）购自中国药品生物制品检定所；甲醇为 色谱纯（天津科密欧公司）；水为亚沸纯化水、磷酸、盐酸为分析纯。2方法与结果2.1 色谱条件 色谱柱为 Dikma Diamonsil-C18，（5 町i，200

4、mm M.6 mm）；流动相为甲醇-0.1%磷酸水（48 ：2）；检测波长365 nm; 体积流量：1 ml min-1。理论塔板数按槲皮素和山萘酚峰计均大于 5 000。见图1。a.对照品b.供试品1-槲皮素2-山萘酚图1高效液相色谱图2.2供试品溶液的制备 精密称取柘木药材粉末（过60目筛）2 g，置于50 ml圆底烧瓶中，加甲醇25 ml，称重，回流提取2 h，冷 却，补足失重，过滤，精密移取续滤液10 ml,加入25%的盐酸10 ml, 水浴回流水解30 min，快速冷却，转移至25 ml容量瓶中，用甲醇 定容至刻度，取样，过滤，作为供试品溶液。2.3对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对

5、照品 5.10 mg、山萘酚对照品5.05 mg,各加甲醇溶解定容至25 ml，作为贮存 溶液。各取5 ml按11混合后，定容至25 ml容量瓶中，配成混合 对照品溶液，浓度分别为40.8ml-1和40.4ml-1。2.4标准曲线的制备精密吸取对照品溶液 （槲皮素和山萘酚）1，2，3，4，5，6 gl注入高效液相色谱仪中，以进样量为横坐 标，色谱峰面积为纵坐标进行回归，得标准曲线回归方程。槲皮素： Y=165.12X-33.991 ，r=0.999 9，线性范围：0.040 80.245 血;山 萘酚：Y 二 168.47X-45.532, r= 0.999 6 ，线性范围：0.040 4 0

6、.242 g g。2.5精密度实验取含槲皮素和山萘酚的混合对照品溶液，进样5 g，按上述色谱条件，连续进样5次，记录槲皮素、山萘酚的峰面 积，计算RSD分别为0.89%与0.92% （n=5），表明精密度良好。2.6稳定性实验取柘木供试品溶液，分别在 0，2，4，6，8，10 h测定，结果槲皮素峰面积的 RSD为1.47%，山柰酚峰面积的 RSD为1.15%。表明溶液中槲皮素和山萘酚在 10 h内稳定性良好。2.7重复性考察 取样品5份，按供试品方法制备。分别精密吸 取20 g，根据槲皮素、山萘酚色谱峰面积测定含量，计算 RSD分 别为 1.18% 与 1.31%（n二5）。2.8回收率实验精

7、密称取已知准确含量的样品4.0 g ,置圆底烧瓶中，精密加入槲皮素对照品 0.660 mg、山萘酚对照品1.233 mg , 按供试品的方法制备。精密吸取 20 “，根据色谱峰面积测定含量。 结果表明，本方法回收率均在95%105%之间，RSD分别为1.41% 与1.63%，符合有关规定。2.9样品测定按上述“2.2 ”项方法制备供试品溶液，测定不同商 品柘木中槲皮素和山萘酚的含量。结果见表1。表1不同商品柘木中 槲皮素和山萘酚的含量药用部位1广西省南宁市郊区0.090.20根2广西省南宁市江西 村0.090.22根3广西省南宁市尹岭岩0.100.21根4广西省扶绥县国医药店0.090.43根

8、5广西省南宁市九塘21号店面0.110.20根6广 西省南宁市大明山0.100.21根7广西省邕宁九塘1号店面0.090.31 根8广西省南宁市武鸣县 0.140.30根9广西省金秀县0.060.23根10广西省灵山县0.030.28根11广西省南宁市九塘4号店面0.220.06 茎12广西省南宁市郊吴圩0.200.08茎13广西省窑阳县0.290.05茎14广西省上林县0.210.35茎及根15广西省邕宁九塘 2号店面0.030.05品种质量有问题3讨论本实验之前比较了采自同一产地柘木不同药用部位槲皮素与山 萘酚的含量，结果发现根的山萘酚含量均0.2 mg g-1，而槲皮素的 含量均较低；茎

9、的槲皮素含量均0.2 mg g-1，而山萘酚含量均较低。 根据这一结论可以看出，本实验 15个样品中，110号样品由于山萘酚的含量均0.2 mg g-1，且槲皮素的含量较低，此商品药材鉴定 为柘木的根；11 13号样品由于槲皮素的含量均0.2 mg g-1 ,山萘酚 的含量较低，由此鉴定该商品药材为柘木的茎。14号样品由于槲皮素和山萘酚的含量均0.2 mg g-1，该商品药材为柘木的根及茎混合 品。15号商品药材槲皮素与山萘酚的含量均很低，因此判定该样品 的品种质量有问题。据文献报道柘木中黄酮类化合物槲皮素与山萘酚大多以糖苷的 形式存在，实验中发现，未水解的样品槲皮素和山萘酚的含量很低， 水解

10、后含量显著升高，因此本实验采取酸水解方法进行前处理，对于酸水解条件的选择，考察了盐酸的不同浓度、加酸量、水解时间和不 同提取方法。结果发现，随着酸浓度的增加，槲皮素与山萘酚的含量 也增加，在盐酸浓度大于 25%后含量增加并不明显且考虑到酸浓度 太高对色谱柱的损害，因此选用25%的盐酸10 ml，加热回流30 min。流动相的pH值对色谱峰的峰形及分离度影响很大，色谱条件 最终确定流动相为：甲醇-0.1%磷酸水（48 ：2），色谱峰分离度良好。 本实验的方法简便，可靠，可用于分析鉴定柘木的不同药用部位，评 价柘木商品药材的品种与质量，为柘木商品药材的鉴定与质量控制提 供参考。【参考文献】1 江苏新医学院.中药大辞典（下册）M.上海：上海科学技术出版社，1998 : 1502.2 国家药典委员会 冲国药典，I部S.北京：人民卫生出 版社，1977: 443.3 丁红华，陈拣珲，朱莉菲，等