牛奶掺杂检验方法

1、牛奶掺杂检验方法第一章 鲜奶掺杂系统分析 第一节 掺杂物质的分类 按掺杂物质的理化性质可以分为：1、电解质物质 向牛奶中添加电解质物质，可以提高牛奶的比重，以便掺水。 以食盐为代表的中性盐类如：食盐、土盐、芒硝、硫酸铅、化肥（硫 酸氨、碳酸氨）、硝酸盐及亚硝酸盐等。 向牛乳中添加各种碱类物质如：NaHC03、Na2CO3、石灰水等。 增加奶质混浊度物质如：洗衣粉等。2、非电解质类物质加入这类物质的目的也是增加比重，便于掺水，此类物质包括： 尿素、蔗糖、牛尿等。3、胶体类物质这类物质能增加牛奶的黏度，检质时没有稀薄感，同时又可掩盖 各种能增加比重的各类掺杂物质。4、防腐类物质这类物质能不同程度地

2、起到杀菌和抑菌作用，但加入量往往很 少，不易引起牛奶各种物理、化学性质的改变。常用的防腐剂类物质 如下： 防腐剂类物质：甲醛、苯甲酸、水扬酸、硼酸及其盐类双氧水、亚硝酸钠等。 抗菌素类物质：青霉素、链霉素、红霉素、氨卡霉素等。 农药：敌敌畏等第二节 可掺杂物质的系统检验1、系统检验方法的应用1）、对电解质类：食盐、芒硝、硫酸铅、和某些化肥， NaHC03、Na2CO3、石灰水、洗衣粉等物质的检验。应以检验电导率为主，结合滴定酸度，牛奶比 重和脂肪含量三项指标检测结果综合分析。2）、对非电解质物质：如尿素、牛尿、蔗糖等物质掺杂检验，以测定乳样的冰点为主。 结合观察滴定酸度、比重和脂肪含量的测定结

3、果综合判定，如确有掺 杂，再进行单一定性检验。3）、掺胶体类物质的检验如米汤、豆浆、豆饼水、稀薄的动物胶及水的掺杂等，此类物质 检出应以乳样的乳清比重测定为主，再结合冰点，滴定酸度、脂肪含 量的测定结果进行综合判定，如怀疑有胶体物质，再进行掺杂物质的 定性检验。4）、对加有防腐剂，抗菌素及农药的牛乳，先队牛乳进行活性试验， 如果活性试验不合格，牛乳应进行防腐剂，抗菌素和农药的定性试 验。5）、向牛奶中掺有白陶土、白鞋粉等物质，由于这类物质是不溶解 的，所以可以采用静置或离心沉淀的方法观察试管底部和壁上的沉淀 物，而后再检查掺了哪种物质。现将系统检验方法图示如下:牛奶样品检验酸度、比重和脂肪含量

4、冰点异常乳清比重异常活性试验异常电导值异常静止或离心沉淀电解质类 物质检验非电解质 定性检验胶体物质 定性检验防腐剂、抗菌素 农药检验检出杂质2、牛奶系统检验指标综合判定牛奶掺杂是十分复杂的，有时会有多重掺假，再加上各种检验方 法本身的局限性，采用检测指标的综合判定是非常必要的。 电解质类物质的检出，应以电导值检测为主，结合牛乳的比 重、滴定酸度和脂肪含量测定结果判定，其原因是：当电导值异常时，基本可以肯定是异常乳，但当被检乳样品来源 于乳房炎或结核病理异常乳时，要综合脂肪含量测定结果判定。当脂 肪含量正常时，说明掺假可能性小。当牛奶电导值正常时，有可能是掺的电解质类物质，并掺入相对 量少的水

5、造成的，这时比重低，脂肪含量和滴定酸度也可能低，只有 综合判定才能正确运用电导值测定，不使遗漏。 通过电导值测定之后，再进行冰点测定，用以检出非电解质类晶体物质，其测定结果异常，基本可以肯定是异常乳，但对掺假乳， 病牛乳和酸败乳的区别，还需参考比重、滴定酸度和脂肪含量测定。 如果冰点异常，滴定酸度降低，脂肪含量亦低，说明掺假，掺 杂、掺水的可能性大。 如果冰点异常，滴定酸度较高，脂肪含量正常，比重亦正常 时，可能是高酸度乳。 如果冰点低，滴定酸度稍低，脂肪含量正常，比重也正常，可 能是病牛乳。 如果牛乳冰点较高 ,滴定酸度较低 ,脂肪含量较低 , 比重也低 ,这可 能是掺水或掺稀薄的胶体物质

6、. 检测胶体物质掺假时，基本以乳清比重测定为主，参考常规理 化分析，一般乳清比重小于 1.027，酸度和脂肪皆低，可进一步验证掺 水或掺胶体物质。 一般活性试验异常，牛奶 pH 值降不下来，或下降较慢，都可 以怀疑掺了抗菌素、防腐剂或农药，应进一步定性。掺杂检验方法第一节 非常规系统检验方法1、牛奶电导率的测定2、牛奶冰点测定3、乳清比重测定正常牛乳中，乳糖及矿物质含量比较稳定，因此可以用乳清比重来确定牛乳可能掺水、米汤、豆浆、豆饼水和稀薄动物胶等。 器材 5mL 吸管 250mL 烧杯 45 个 500mL 玻璃漏斗 水浴锅或恒温箱 乳比重计 定性滤纸 200mL 三角烧杯 试剂 ：20%醋

7、酸，取冰醋酸 20mL，加水至100mL。 方法：取乳样200mL于250mL烧杯中，加入20%醋酸4mL,于40C 水浴下放置，使蛋白质凝固后过滤，最后转入量筒，按牛乳比重测定 方法测定。 结果判定正常牛乳乳清比重为 1.0271.030，如果低于 1.027，至少掺 5 %的水或掺了相应的液体。4、牛乳的活性试验 原理：凡掺有抗菌物质的牛乳，都有阻抑微生物繁殖的因素，即抑 菌作用，由于牛乳本身就是细菌生长发育的良好培养基，当有抑制细 菌的物质存在时，加入发酵剂后，乳的正常活性就会改变。 器材 300mL 三角瓶 恒温水浴锅 酸度计 （pH 计） 温度计 试剂：酸牛乳发酵剂，要求乳酸菌活性良

8、好，也可用市售酸奶代用。 方法：将200mL牛乳于300mL三角瓶中，加热70C杀菌，而后迅速冷 却到42C,加入2.5%酸牛奶发酵剂，测pH值或做滴定酸度，通常pH 值为6.4左右，而后将三角瓶置于 42C水浴上保温培养，每隔30分钟 测定一次 pH 值，一般测定 4 次（包括保温前的一次测定），即 90 分 钟后 pH 值应由 6.4 下降到 5.7 或者更低，这样的牛乳为活性试验正 常。 结果判定如果 90分钟，牛乳 pH 值下降缓慢或下降不到 pH 值 5.7以下或 不下降，则说明牛乳中有抗菌物质。第二节 非常规快速检验方法1、 陈旧奶的检验方法一：煮沸试验鲜奶5mL ,加热煮沸 态，

9、判定乳的酸度。判定： 有少量絮块有较多凝块全部为凝块1 分钟，加等量中性水，观察凝固状酸度约为 27 0T酸度约为 28 0T酸度约为 30 0T酸度在 2526 0T 即出现凝块，判定为不新鲜乳方法二：酒精试验本试验系乙醇的脱水作用，改变了酪蛋白的安定性，陈旧乳即 出现凝固现象，但因牛的生理失调，先天性酪蛋白失常亦可出现低 酸度酒精凝固乳。检验方法：牛乳与70%的乙醇等量混合（一般 1 2ml）, 5秒钟观察结 果，多数乳品厂均应用68%乙醇，个别厂家定为65%，温度反映有 明显影响，因此定为20C，用变性乙醇对试验无明显影响。本试验不适于检验羊奶，因羊奶蛋白质结构与牛奶不同，钙含 量亦高于

10、牛奶，因此在酸度牛奶试验正常时，羊奶则产生凝固。 判定：反应现象程度表示方法酸度不凝新鲜一20 以下极细凝固物不太新鲜士21 22 叮细凝固物不新鲜+22 24 T中型凝固物不新鲜+ +24260T大型凝固物不新鲜+ + +26280T极大型凝固物很不新鲜+ + + +28300T方法三、接触酶试验取检液4滴于凹玻片上，加过氧化氢 2滴，待1 2分钟，观察有 无气泡产生。新鲜乳2分钟不产生气泡。稍微不新鲜乳，1 2分钟开始产生气泡。中等不新鲜乳，3060秒开始产生气泡，面积中等。极不新鲜乳， 2030 秒开始产生气泡，布满全面积。2、 牛乳中掺水的鉴别 相对密度法 正常的牛乳在20C时，相对密

11、度在1.0291.033 之间，掺水后的牛乳，其相对密度将低于此值，（每加10%的水可使比重降低 0.003）。可用比重计来进行测定。操作方法是将混匀的待测 样品小心地倒入 200mL 或 250mL 量筒中，勿使气泡产生，然后小心地 放入比重计，注意不可使比重计的重锤与筒壁相碰撞。静置 23min， 读取相对密度值即可。脱脂牛乳的相对密度会升高，可采用乳清相对密度测定法来鉴 别。 乳清相对密度法 乳清的主要成分是乳糖与矿物质，其含量 是恒定的，因此乳清的相对密度较全乳的相对密度更稳定，通常在 1.0271.030 之间，相对密度低于 1.027 者，则有掺水的可能。检验方 法是取待测乳样20

12、0mL,置于三角瓶内加热，并加入 20%醋酸4mL, 在40C温水中加热至干酪素凝固，冷却后过滤，滤液（即乳清液）按 上述方法测出相对密度值即可。用专用冰点仪（CryoStar I ）进行检测。本检测是最精确的，可以直接测出该乳的冰点值和掺水比例。3、牛乳中掺豆浆或豆饼水的鉴别、 豆浆中含有皂素，皂素可溶于热水或热酒精，并可与氢氧化钠反 应生成黄色化合物。操作步骤：取样品20mL，放入三角瓶中，加入（1:1）乙醇一乙 醚混合液3mL及25% NaOH溶液5mL,摇匀静置5min后观察，如混 合液呈黄色，说明样品中掺有豆浆，如呈暗白色则为正常。采用上述 方法，需同时作空白对照试验。本方法灵敏度不

13、高，当豆浆掺入量大 于 10%时才呈阳性反应。、正常的生鲜牛乳中含铁量v 2mg/kg，而大豆中含铁量100 mg/kg，若生鲜牛乳中掺有豆浆或豆饼水，则乳中含铁量显著增加，所 以可以用铁定性法间接测出乳中是否掺有豆浆或豆饼水。FW+能被氧化亚锡还原为Fe2+，F0与邻二氮菲在pH为29的溶液中，能反应生成 水溶性的橙红色络合物 （C12H8N2）3Fe 2+ 。试剂：氯化亚锡Sn CI2.2H2O 邻二氮菲 C12H8N2 溶液：取 1.0g 邻二氮菲溶于 100mL 乙 醇 中，加水稀释至 100mL。仪器：大试管：18X 200mm ;吸量管：5MI, 10mL。操作：取生鲜牛乳样10m

14、L于大试管中，加入100mg的SnCI2.2H2O，充 分振摇，加 2mL 邻二氮菲溶液，混匀观察，掺豆浆或豆饼水的牛乳呈 粉红色，颜色随掺入量的增加而加深。正常生鲜牛乳试管中无明显的 颜色变化。该法检出限为 5%。、 取一玻璃杯牛奶，用棒搅匀，静置片刻，然后倒入另一杯子 里。如果原来的玻璃杯底部有沉淀物和细渣出现，可是视为有豆浆和 淀粉掺入。另外，牛奶中掺入豆浆时，还可嗅到豆腥味。4、牛乳中掺淀粉或米汤类的鉴别不法者为了提高牛乳的稠度和非脂固体的含量，往往向牛乳中掺入 淀粉或糊精，或直接加入米汤、面粉等淀粉类物质。我们可利用淀粉 类遇碘变为蓝色或蓝紫色的原理进行检验。方法： 取被检乳样 5m

15、L 于试管中，稍稍煮沸，加入数滴碘液（用蒸馏水溶解碘化钾4g，碘2g,移入100mL容量瓶中，加蒸馏水至 刻度），如有上述物质加入，则出现蓝色或蓝青色反应，并出现沉淀 物。含糊精则呈现紫红色。正常牛乳无显色反应。5、牛乳中掺尿类的鉴别 有的掺假者为增加其牛乳的腥味，向牛乳中掺入牛尿，同时为了提高牛乳的比重来掩盖掺水，最终增加牛乳的重量和体积。检验方法： 尿中含有肌酐在 pH 值为 12 的条件下，肌酐与苦味酸 反应生成红色或橙红色的复合苦味肌酐。在这种条件下，苦味酸与肌 酐反应完全而且假肌酐干扰小。取被检乳样5mL，加入10%氢氧化钠溶液45滴，再加饱和苦味 酸溶液（取苦味酸2g，加蒸馏水至1

16、00mL，煮沸，冷却至室温待有结 晶析出时，倒出上清液即得）0.5mL，充分摇匀，放置 1015分钟， 或加热立即观察试管中的颜色变化。正常乳，呈苦味酸固有的黄色， 掺牛尿的乳则呈红褐色或橙红色，尿掺入量越大，红色出现的越快。此法最低检出限为2%,以3%现象最明显。6、牛乳中掺尿素（化肥）的检验牛乳掺水相对密度明显低于正常值，容易被发现，一些不法分子 则采用双掺假来欺骗消费者，即掺水的同时又掺入农村易得到的化 肥，如尿素、硫酸铵等。这样既能增加牛乳的相对密度，增加牛乳中 非脂固体的含量，又能增加使用凯氏定氮法（以测定蛋白质含量）所 得到的含氮量。 尿素能与亚硝酸钠在酸性溶液中反应生成 CO2、

17、N2气体，生鲜牛乳 中若掺有尿素，引入亚硝酸钠后就会发生该反应，若无尿素存在，那么引入的N02就遗留在生鲜牛乳中，可通过检验引入的N02 是否存在 ,判断鲜乳中有无尿素存在 .试剂： 格里斯千试剂：称取89g酒石酸，10g无水对氨基苯磺酸及 1g a 萘胺，小心在研钵中研细，混匀，密封干燥保存在棕色 瓶中。 1% 亚硝酸钠溶液：取 1g 亚硝酸钠，用少量蒸馏水溶解 后，定容到 100mL 容量瓶中。 浓硫酸： d： 1.84操作：取生鲜牛乳样3mL，加入到试管中，准确加入 NaN02溶液、浓硫 酸1mL，摇匀放置5min，待气泡稍落，加入黄豆粒大的格里斯千试剂 (约0.3g0.5g)，混匀观察

18、试管中的颜色变化。正常乳呈紫红色，掺 尿素的乳样试管中无颜色变化、或略呈黄色。本法灵敏度为0.01%，要求NaN02的浓度及加入量都要准确。 牛乳中掺硫酸铵的鉴别向试管中加入1mL牛乳试样，再依次加入 0.5mL0.2%氢氧化钠溶 液、 2%次氯酸钠溶液及 5%苯酚溶液，置试管于沸水浴中加热约 20s， 如果混合液迅速变成蓝色，则说明测定的牛乳中掺有化肥硫酸铵。7、牛乳中掺入洗衣粉的检验 洗衣粉中含有十二烷基苯磺酸钠，在紫外光下发荧光，可利用此原 理进行鉴别。鉴别步骤如下：取待测牛乳 510mL 于试管中，在 365nm 波长紫外分析仪下观察 荧光。同时用天然乳作对照。掺有洗衣粉的牛乳发出银白

19、色荧光，正 常乳为无荧光的黄色。此法的检出限量为 0.1%。 洗衣粉中通常含有十二烷基苯磺酸钠和硫酸钠的成分，烷基苯磺酸 钠和次甲基蓝能发生反应生成蓝色的化合物，易溶于有机溶剂。选用 三氯甲烷提取时，此蓝色化合物进入三氯甲烷层，使三氯甲烷层出现 蓝色。试剂：0.1%次甲基蓝C16H18N3SCI 3出0溶液：取0.25g次甲基 蓝溶于100mL蒸馏水中，加入浓硫酸1.7mL，再加蒸馏水稀释至250mL,配成的溶液贮存于棕色的试剂瓶中。 三氯甲烷 CHCI3仪器 ：试管、吸管。操作：取生鲜牛乳样 1mL 于试管中，加 0.1%次甲基蓝溶液 10 滴，混 匀，再加三氯甲烷35mL,振摇数秒中静止，

20、观察上层三氯甲烷层的 颜色变化。如果三氯甲烷层呈无色或淡灰色，乳层呈蓝色（未作用的 次甲基蓝的颜色），则判定检验呈阴性结果，若三氯甲烷层呈浅蓝 色，说明洗衣粉掺入量10mg% ;三氯甲烷层呈天蓝色者，检出量30mg%;三氯甲烷层蓝色者，检出量50mg% ;孚1层蓝色很淡、或乳 层全部褪去，而三氯甲烷层呈深蓝色者，检出量为50100mg%。该法最低检出限为 10%，有机硫酸盐，有机醋酸盐、氯化物、 硝酸盐、硫氰化物等可产生干扰反应。8、牛乳中掺石灰水的检出正常牛乳中含钙量小于 1%，如果向牛乳中加入适量的硫酸盐后， 再加玫瑰红酸钠及氯化钡则呈现红色外观。如果是掺有石灰水的牛 乳，则生成硫酸钙沉淀

21、，呈现白土样外观。操作步骤如下：取待测乳样 5mL ，加入 1%的硫酸钠、 1%的玫瑰红酸钠和 1%氯 化钡溶液各 1 滴，摇匀，观察颜色变化，天然乳为黄色，掺石灰水者 为白土色。本法检出灵敏度为 100 ppm。9、牛乳中掺明胶的鉴别11、牛乳中掺蔗糖的鉴别牛乳掺水后相对密度下降，为了增加相对密度，有些掺假者掺水 后有掺糖。、牛乳中是否掺糖，可利用蔗糖与间苯二酚的蓝色反应来判 断，原理是适量的牛乳酸化后可以和间苯二酚发生明显的蓝色反应。取牛乳15 mL于小烧杯中，加0.1g间苯二酚及1mL浓盐酸，在 电炉上加热煮沸，观察颜色变化，有蓝色出现则为正常乳，如果掺有 蔗糖则呈红色。、另外，可用钼蓝

22、法进行鉴别。方法是：取牛乳 10mL于小烧杯 中，力口 0.5g钼酸铵，混匀，加10mL10%盐酸溶液，混匀，置于 80C 水浴中加热，如果呈现蓝色则表示掺有蔗糖。、蔗糖与硫酸反应脱水生成羟甲基咲喃甲醛，再与蒽酮缩合成蓝 绿色化合物，如有还原糖存在时，先用碱使还原糖转向异构化，然后 再进行蔗糖的测定。试剂： 0.1%蒽酮溶液：取 0.1g 蒽酮溶于 100mL 3： 1 H2SO4 溶液 中 ， 用时先配。仪器：试管、吸量管 1mL， 5mL。操作：取生鲜牛乳样1mL于试管中，加蒽酮试剂2mL，振荡观察试管 中颜色变化，若在 5min 内变为透明绿色，则说明有蔗糖掺入。该方法的灵敏度为 0.1

23、%。12、 牛乳中掺入硫酸盐的鉴别（芒硝：Na2SO4 IOH2O和石膏：Ca2SO4 2H2O ）掺入硫酸盐的生鲜牛乳， SO42 的含量较高，可以利用玫瑰红酸钠 与 BaCl2 作用，生成红色的玫瑰红酸钡，当， SO42 进入时， SO42 与Ba2-反应生成较细腻的BaSO4沉淀，使玫瑰红酸钡的红色褪去的反 应，检出有过量的硫酸盐存在于牛乳中。试剂：20% CH3COOH溶液：用市售36%的分析纯醋酸稀释而得。 1% BaCl2溶液：取1g BaCl2 2内0用少量蒸馏水溶解，稀释到 100mL。 0.2% 玫瑰红酸钠 C6Na2O6 水溶液：取 0.2g 玫瑰红酸钠溶 于少量蒸馏水，稀

24、释到 100mL。仪器：试管、吸量管。操作：取生鲜牛乳样5mL,力口 CH3COOH 2滴，BaCl2 5滴，玫瑰红酸钠2 滴，充分振荡，若试管中呈黄色，则为阳性结果，掺入了芒硝。若呈 红色，则为阴性结果，属于质量正常牛乳。红色褪去的程度与SO42的含量成正比，红色全部褪去时 SO42-的含量约0.115%。13、牛乳双掺假的鉴别（ 1 ） 理 化检验 双掺假是指牛乳脱去脂肪后再加水，简称脱脂又加水。牛奶经双 掺假后，其理化指标的改变较大，除了测牛奶的比重以外，还要测定 牛奶的脂肪含量。根据测得的结果，加以综合判断，参见表：表1比重 20/4 C脂肪，%结果判断1.0281.032 3.0全乳

25、1.0341.037V 3.0脱脂乳1.0181.029V 3.0加水乳1.0281.034V 2.0脱脂又加水(2)感官鉴别14、牛乳中掺山羊乳的鉴别表：牛乳中掺山羊乳量判定表掺入量，%沉淀量，%掺入量，%沉淀量，%50300.8100.1401.0150.2501.4200.4纯山羊乳整个乳柱呈胶冻状悬浮250.5纯牛乳无15、乳中血与脓的鉴别取少量的二胺基联苯，溶解在盛有 2mL 95%酒精的试管内，加入 2mL 3%的过氧化氢溶液，摇匀后再加入 34滴冰醋酸。在上述配制的试液中，加入45mL待测牛乳，如有血与脓存在时，2030s后液体呈现深蓝色。16、生牛乳与熟牛乳的鉴别生牛乳中有过氧

26、化氢酶，能分解过氧化氢而与色素作用，牛乳加 热后过氧化氢酶即被破坏。检测步骤如下：取5mL待测牛乳放入实干中，加入 0.2mL 1%过氧化氢，摇匀，再 加入0.2mL 2%的对苯二胺，摇匀。生牛乳或加热至 78C以下者呈青蓝 色，加热至7980C者，30s后呈淡灰青色，加热至80C以上者无颜色 出现。17、牛乳中掺入食盐的鉴别牛乳掺水后相对密度下降，为了增加相对密度，掺假者可能会掺 水后又掺盐来迷惑消费者。我们可根据下述原理来进行检验。原理：CrO42_、C均可与Ag +反应生成难溶性沉淀，但因二者溶度积 不同，Ag2CrO4沉淀遇一定浓度的C而褪色，Ag +与C作用生成AgCl沉淀，褪色程度

27、与C含量成正比，AgCI白色沉淀因CrO42 的浓 存在而呈黄色。方程式：2 Ag+ + CrO42- = AgzCrO（红褐）TAg+ + C= AgCI （白）1 r试剂：0.009N AgNO3溶液：称取1.533g AgNOs溶于少量蒸馏水,然后移入1000mL容量瓶中稀释到刻度，制得溶液保存于棕色瓶中。 10% K 2CrO4 溶液：称取 K2CrO4 10g ，用少量蒸馏水溶解， 然后移入 100mL 容量瓶中稀释至刻度。 仪器：试管、吸管 1mL，5mL 。操作：吸取 AgNO3 溶液 5mL 于试管中，滴加 K2CrO4 2 滴，混匀，试管 呈红褐色，再取生鲜牛乳样 1mL 于

28、试管中，充分摇匀，如红褐色消失 变为黄色，说明生鲜牛乳中Cl 含量超过 0.16%，折合成 NaCl 为0.26%以上，可断定乳中有 NaCl 掺入，该生鲜牛乳为异常乳。18、牛乳中掺入碱的鉴别为掩盖牛乳的酸败现象，降低牛乳的酸度，防止牛乳因酸败而发生 凝结，可能向已酸败的牛乳中加入碳酸钠（苏打）或碳酸氢钠（小苏 打）。加碱后的牛乳不仅滋味不佳，而且细菌易于生长繁殖，对人体 健康有害。因此，检验牛乳中掺碱是很重要的。（1）、 生鲜牛乳中如掺有碱性物质，可使指示剂溴麝香草酚蓝变蓝 色。溴麝香草酚蓝（亦称为溴百里香酚蓝）是一种酸碱指示剂， PH 值 变化范围在 6.07.6。颜色由黄变蓝，加碱的生

29、鲜牛乳氢离子浓度发生 了变化，因而使溴麝香草酚蓝显示出与正常牛乳不同的颜色，同时根 据颜色的不同，还可判断其加碱量的多少。试剂：0.04%溴麝香草酚蓝 C27H28O5Br2S 乙醇（ 95%）溶液：称取 0.04g 溴麝香草酚蓝溶于少量 95%乙醇溶液，然后将溶液转移到 100mL 容量瓶中，再用 95%乙醇溶液稀释至刻度。 仪器：试管、吸管、洗瓶（内装蒸馏水）。操作:先用洗瓶冲洗试管，然后取生鲜牛乳样 5mL于试管中，将试管保 持倾斜位置，沿管壁小心向试管中加入 0.04%溴麝香草酚蓝乙醇溶液5 滴，而后将试管轻轻斜转 23回，使其更好地相互接触，但且勿使阴 天相混合，然后把试管垂直放置，

30、2min后根据环层指示剂的颜色特征 判定检验结果。同时用未掺碱的正常生鲜牛乳作空白对照。掺碱量的判定：根据环层颜色的变化判定结果如下表，对照试管中指示剂无颜色变化，生鲜牛乳中含碱量折算成 NaHCO3的量。见下表：表:生鲜牛乳中含 NaHCO3的浓度单位环层颜色特征生鲜牛乳中含 NaHCO3的浓度单位环层颜色特 征无%黄0.5%青绿0.03%黄绿0.7%淡青0.05%淡绿1.0%青0.1%绿1.5%深青0.3%深绿掺水的生牛乳、掺石灰水、洗衣粉以及乳房炎牛乳均可呈现出黄绿 色至深青色的颜色变化。（2）现场检验可用玫瑰红法。取待检样品5mL,置于试管中，加入5mL0.05%玫瑰红乙醇溶液，混匀，

31、观察颜色。未加碱者呈黄色，加碱呈红色，并且红色深浅与加碱量成正比3)溴甲酚紫法 19、牛乳中掺入葡萄糖的鉴别原理：葡萄糖具有还原性，在加热的强碱液中能使铜离子Cu2+还原为亚铜离子 Cu ，班氏定性试剂是一种在碱性中含有铜离子柠檬酸 钠的复合剂，葡萄糖能使试剂中的Cu2+还原为Cu+，形成黄色的氢氧化铜或红色的氧化铜。试剂：班氏定性试剂称取柠檬酸钠(Na3C6 H5 O7 2 H2O) 173g，无水碳酸钠100g或 结晶碳酸钠 200g ，放入 2000mL 三角瓶内，加蒸馏水约 700mL 加热， 并用玻璃棒不断搅拌使其溶解，溶解后待冷至室温。另在 200mL 三角 瓶中，称入硫酸铜结晶(CuS04 5 H2O) 17.3g，加蒸馏水约100mL 加热溶解，将硫酸铜溶液慢慢倒入前液，倒时不断搅