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文档简介

1、医学微生物学消毒与灭菌003消毒与灭菌公元325年,古希腊出现世界上以在传染病流行时收容病人和为穷人提供医务服务的首家医院。由于医院的客观条件极差,医院感染情况非常严重。 产褥热是当时欧洲医院感染中造成损失最大、问题最严重、研究最多、并最终得到解决的问题。Thomas Lightfoot曾认为“产院是引导产妇走向死亡之门”。由于产褥热的危害和影响,直至1940年,在某些发达国家仍有50%的产妇不愿到医院分娩。1843年,Holmes发现产褥热与医生在尸检后不洗手就检查产妇与接生有关。 英国外科医生Lister(1827-1912)首先简明细菌与感染的关系,并提出消毒的概念,并于1867年发表了

2、著名的有关外科无菌操作技术的论文,其中大部分原则仍沿用至今。Halstead在John Hopkinks 医院工作时,因其未婚妻(手术室护士)对升汞洗手过敏,便请Goodyear公司于1889年制作了两付橡胶手套,从此开创了外科手术时戴手套的新纪元。细菌为单细胞生物,极易受外界条件的影响。若环境适宜,生长繁殖极为迅速;若环境变化过剧,细菌因代谢障碍而生长受到抑制,其至死亡。根据这一现象,可以采用多种物理、化学或生物学方法来抑制或杀死外环境中的病原微生物,以切断传播途径,从而控制或消灭传染病。另外,微生物学实验室和外科手术室等为防止微生物的污染或感染,也需杀灭物品或器械上的微生物。以下术语常用来

3、表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。消毒与灭菌的常术语1、消毒(disinfection)杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂。一般消毒剂在常用的浓度下,只对细菌的繁殖体有效,对其芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。2、灭菌(sterilization)杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高,包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。3、抑菌(bacteriostasis)抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂(bacteriostat)为各种抗生素,可在体内抑制细菌的繁殖,或在体外用于抑菌试验以检测细菌对

4、抗生素的敏感性。4、防腐(antisepsis)防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品在高浓度时为消毒剂,低浓度时常为防腐剂。5、无菌(asepsis)不存在活菌的意思。无菌操作 防止细菌进入人体或其它物品的操作技术,称为无菌操作。例如进行外科手术时需防止细菌进入创口,微生物学实验中要注意防止污染和感染。6.净化:指能显著减少或破坏一定空间中微生物数量和生物活性的方法。第一节 物理消毒灭菌法消毒与灭菌的方法一般可分为1、物理学方法 包括以下热力、紫外线、辐射、超声波、滤过、干燥和低温等。2、化学方法一、热力灭菌法高温对细菌具有明显的致死作用,因此最常用于消毒和灭菌

5、。多数无芽胞细菌经5560作用3060min后死亡。湿热80经510min可杀死所有细菌繁殖体和真菌。细菌的芽胞对高温有很强的抵抗力,例如炭疽芽胞杆菌的芽胞,可耐受510min煮沸,肉毒梭菌的芽胞则需煮沸35h才死亡。热力灭菌法分类: 干热灭菌 湿热灭菌在同一温度下,后者的效力比前者大。这是因为:湿热中细菌菌体蛋白较易凝固;湿热的穿透力比干热大;湿热的蒸气有潜热存在。水由气态变为液态时放出的潜热,可迅速提高被灭菌物体的温度。(一)干热灭菌法主要有以下几种 1焚烧、烧灼、干烤、红外线 干热的杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性。一般细菌繁殖体在干燥状态下, 80100经1h可被杀死;芽胞则需160

6、170经2h才死亡。1.焚烧直接点燃或在焚烧炉内焚烧。是一种彻底的灭菌方法,但仅适用于废弃物品或动物尸体等。2.烧灼直接用火焰灭菌,适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌。3.干烤利用干烤箱灭菌,一般加热至160170经2 h。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,例如玻璃器皿、瓷器、玻质注射器等的灭菌。4.红外线红外线是一种0.771000m波长的电磁波,尤以110m波长的热效应最强。但热效应只能在照射到的表面产生,因此不能使物体均匀加热。红外线的杀菌作用与干热相似,利用红外线烤箱灭菌所需的温度和时间亦同于干烤。此法多用于医疗器械的灭菌。(二)湿热灭菌法1.巴氏消毒法用较低温度杀灭

7、液体中的病原菌或特定微生物,而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。此法由巴斯德创用以消毒酒类,故名。目前主要用于牛乳等消毒。方法有两种:一是加热至61.162.830min;另一是71.7经1530s钟(广泛采用此法)。2.煮沸法在1个大气压下,水的煮沸温度为100,一般细菌的繁殖体5min能被杀死,细菌芽胞常需煮沸12h才被杀灭。此法常用于 消毒食具、刀剪、注射器等。水中加入2碳酸钠,既可提高沸点达105,促进芽胞的杀灭,又可防止金属器皿生锈。3. 流动蒸气消毒法又称常压蒸气消毒法,是利用一个大气压下100的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体经1530min可被杀灭,但芽胞常不被全部杀灭

8、。该法常用的器具是Arnold消毒器,我国的蒸笼具有相同的原理。4. 间歇蒸气灭菌法利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌的目的。将需灭菌物置于流通蒸汽灭菌器内100加热1530min杀死其中的繁殖体;但芽胞尚有残存取出后放37孵箱过夜,使芽胞发育成繁殖体次日再蒸一次,如此连续三次以上,可达到灭菌的效果。此法适用于 一些不耐高热的含糖、牛奶等培养基。若有些物质不耐100,则可将温度减低至7580,每次加热时间延长至3060min,次数增加至3次以上,也可达到灭菌目的。5.高压蒸气灭菌法是一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于蒸气的压力。在一个大气压下,蒸气的温度是100。如果蒸气被限制在密闭

9、的容器中,随着压力升高,蒸气的温度也相应升高。高压蒸汽灭菌器(autoclave)就是根据这一原理制成的,在103.4kPa(1.05kg/cm2)蒸气压下,温度达到121.3,维持1520min,可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。常用于 一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。u 由于高压蒸气灭菌法所需要的时间较长。近年来,在此基础上又研发了一种新型的预真空压力蒸汽灭菌器。即灭菌内空气抽出约98,再送入蒸汽,灭菌时间只需要34分钟,特别适用于周转快的物品。6.超高温杀菌(UHT): 135150和 28s对牛乳或其他液态食品:果汁、及果汁饮料、豆乳、茶、酒、矿泉水等最大优点

10、:杀死产品中的微生物能较好地保持食品品质与营养价值。二、辐射杀菌法1、紫外线波长200300nm的紫外线(包括日光中的紫外线)具有杀菌作用杀菌机理:其波长在200-300nm有杀菌作用,其中以265-266nm最强,这与细菌 DNA吸收光谱范围一致。细菌DNA吸收紫外线后,使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶以共价结合成二聚体,改变了DNA的分子构型,干扰了DNA的复制和转录,导致细菌变异或死亡紫外线的特点:紫外线穿透力较弱,普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线应用范围:空气消毒 物体表面故只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒用于不耐热品的物体表面的消毒副作用:对人体皮肤、眼睛有

11、损伤作用,使用时应注意防护2、电离辐射l 包括 高速电子、X射线、射线和射线等。l 射线可由加速器产生,其穿透性差,但作用时间短,安全性好。l 射线多用钴-60为放射源,其穿透性强,但作用时间慢,安全措施要求高。l 电离辐射具有较高的能量,在足够剂量时,对各种细菌均有致死作用。l 杀菌机制:干扰DNA合成,破坏细胞膜,引起酶系统紊乱及水分子经辐射后产生游离基和新分子的过氧化氢产生。l 应用: 常用于大量一次性医用塑料制品的消毒; 亦可用于食品的消毒,而不破坏其营养成分 3、微波u 微波是一种波长为11000mm左右的电磁波,u 可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质,但不能穿透金属表面。u 消毒中常

12、用的微波有2450MHZ与915MHZ两种,u 应用:多用于食品、食品食具、非金属器械、检验室用品、无菌病室的药杯及其它用品的消毒。u 杀菌机理:主要靠热效应发挥作用,微波通过介质时,使极性分子快速运动,摩擦生热,里外温度同时上升。u 缺点:但微波的热效应必须在一含水里的条件下才能显示出来,在干燥条件下,即使再延长消毒时间也不能达到有效灭菌。 三、滤过除菌法 滤过除菌法(filtration)是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到无菌目的。 所用的器具是滤菌器(filter),滤菌器含有微细小孔,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。 滤过法主要用于 一些不耐高温的

13、灭菌的血清、毒素、抗生素、 空气等的除菌。滤菌器的除菌性能,与滤器材料的特性、滤孔大小、静电作用等因素有关。滤菌器的种类很多,目前常用的有薄膜滤菌器、素陶瓷滤菌器、石棉滤菌器(亦称Seitz滤菌器)、烧结玻璃滤菌器等。 薄膜滤菌器:孔径0.220.45mm时,可除去细菌;20100nm时可除去病毒 玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器 实验室常用陶瓷布氏漏斗除菌(G6)用于除菌的微孔滤膜孔径在0.45um以下,最小的为0.1um 醋酸纤维孔径0.3um0.7 um 玻璃 G2 10 um 15 um;G4 3 um 4 um常用的有蔡氏滤菌器、玻璃滤菌器、薄膜滤菌器空气除菌采用生物洁净技术:通

14、过初、中、高三级高效分子空气过滤哭器,除掉空气中0.55um的尘埃微粒,并采用合理的气流方式来达到空气洁净的目的。微生物通常附着在尘埃上,在一定意义上讲,滤过了空气中的尘埃,也就清除了细菌等微生物。初级过滤采用塑料泡沫海绵,过滤率在50%以上;中效过滤用无纺布,过滤率在50%90%之间;高效或亚高效过滤用超细玻璃滤低,过滤率为99.95%99.99%。这种经高度净化的空气形成一种细薄的气流,以均匀的速度向同一方向输送,均匀分布于室内,不产生涡流,聚集尘埃,通过回风口把它带出房间。空气持续向外流通,使室内维持正压,可防止相邻房间的细菌侵入秋为层流空气。凡在送风系统上装有高效或亚高效过滤系统的房间

15、,一般统称为生物洁净室。生物洁净室在医院里可用作无菌护理室和无菌手术室。四、超声波杀菌法超声波:是不被人耳感受高于20千周/秒的声波 超声波可裂解多数细菌,尤其是革兰阴性菌更为敏感,但往往有残存者。应用:目前超声波主要用于粉碎细胞,以提取细胞组分或制备抗原等。机制:超声波裂解细菌的机制主要是它通过水时发生的空(腔)化作用,在液体中造成压力改变,应力薄弱区形成许多小空腔,逐渐增大,最后崩破。崩破时的压力可高达1000个大气压五、干燥与低温抑菌法有些细菌的繁殖体在空气中干燥时会很快死亡,例如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、霍乱弧菌、苍白密螺旋体等。但有些细菌的抗干燥力较强,如溶血性链球菌在尘埃中存活25

16、d,结核分枝杆菌在干痰中数月不死。芽胞的抵抗力更强,如炭疽芽胞杆菌的芽胞耐干燥20余年。干燥法常用于保存食物,浓盐或糖渍食品可使细菌体内水分逸出,造成生理性干燥,使细菌的生命活动停止,从而防止食物变质1.干燥法常用于保存食物浓盐或糖渍食品可使细菌体内水分逸出,造成生理性干燥,使细菌的生命活动停止,从而防止食物变质。2.低温可使细菌的新陈代谢减慢,当温度回升至适宜范围时,又能恢复生长繁殖u 故常用作保存细菌菌种。u 冷冻真空干燥法:为避免解冻时对细菌的损伤,可在低温状态下真空抽去水分,此法称为冷冻真空干燥法(lyophilization)。冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法,一般可保存微生物

17、数年至数十年。第二节化学消毒灭菌法定义:是用化学药品进行消毒的方法。 许多化学药物能影响细菌的化学组成、物理结构和生理活动,从而发挥防腐、消毒甚至灭菌的作用。 化学消毒剂的特点:一般都对人体组织有害,只能外用或用于环境的消毒。 应用要适度、适量而且消毒时间不能过长。 要注意消毒剂对人类的毒副作用、对环境的污染作用和对物体的腐蚀作用,既使之达到消毒的目的,又对环境的污染和对人类健康的损害。化学消毒剂的分类从杀菌机制分类根据化学消毒剂的杀菌机制不同,主要分以下几类:促进菌体蛋白质变性或凝固,例如酚类(高浓度)、醇类、重金属盐类(高浓度)、酸碱类、醛类;干扰细菌的酶系统和代谢,例如某些氧化剂、重金属

18、盐类(低浓度)与细菌的SH基结合使有关酶失去活性;损伤菌细胞膜,例如酚类(低浓度)、表面活性剂、脂溶剂等,能降低菌细胞的表面张力并增加其通透性,胞外液体内渗,致使细菌破裂。按照消毒能力划分,化学消毒剂的种类o 高效消毒剂:可杀灭所有种类的微生物;包括: 氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛类消毒剂、环氧乙烷等。o 中效消毒剂:能杀灭除芽胞以外的微生物,包括: 含碘消毒剂、醇类消毒剂等。p 低效消毒剂:杀死细菌繁殖体,包括:季铵盐类、氯已定、高锰酸钾一、消毒剂的主要种类(一)酚类 石炭酸、来苏、洗必泰等酚类化合物, 1作用原理:损伤细胞膜、蛋白质变性、灭活酶类低浓度时破坏菌细胞膜,使胞质内容物漏出;高浓

19、度时使菌体蛋白质凝固。也有抑制细菌脱氢酶、氧化酶等作用石炭酸3%5%或来苏儿2%: 地面、器具表面的消毒洗必泰0.01%0.05% : 皮肤消毒,术前洗手、阴道冲洗等(二)醇类1、杀菌机制 在于去除细菌胞膜中的脂类,并使菌体蛋白质变性。(去膜脂类,蛋白变性)2、乙醇最常用,浓度为7075时杀菌力最强,更高浓度因能使菌体表面蛋白质迅速凝固,杀菌效力反而减低。3、异丙醇的杀菌作用比乙醇强,且挥发性低,但毒性较高。4、应用 两者主要用于皮肤消毒和浸泡体温计等。(三)重金属盐类(蛋白变性、酶失活)n1、杀菌机制 高浓度时易与带阴电荷的菌体蛋白质结合,使之发生变性或沉淀,又可与细菌酶蛋白的SH基结合,使

20、其丧失酶活性。2、应用 硝酸银1%蛋白银1%5%新生儿滴眼,预防淋病奈瑟菌感染、硫柳汞0.1% 皮肤、手术部位消毒、生物制品防腐、升汞0.05%0.1%非金属器皿的消毒、红汞(2水溶液)皮肤、粘膜、小创伤消毒、(三)氧化剂1、杀菌机制 酶活性的丧失依靠其氧化能力,可与酶蛋白中的SH基结合,转变为SS基,导致酶活性的丧失2、过氧化氢 在水中可形成氧化能力很强的自由羟基,破坏蛋白质分子结构。3、过氧乙酸 为强氧化剂,易溶于水,对细菌繁殖体和芽胞、真菌、病毒等都有杀灭作用,应用广泛;但稳定性差,易分解并有刺激性与腐蚀性,不适用于金属器具等的消毒。4、用于消毒的卤素有碘和氯两类,碘多用于皮肤消毒;氯多

21、用于水的消毒。氯化合物有漂白粉、次氯酸钙、次氯酸钠等高锰酸钾 0.1% 皮肤尿道、蔬菜、水果消毒 过氧化氢 3%创口、皮肤粘膜消毒 过氧乙酸 0.2%0.3%塑料、玻璃器材消毒 碘酒 2.0%2.5%皮肤消毒 0.20.5 ppm 氯饮水及游泳池消毒 10%20% 漂白粉地面、厕所与排泄物消毒 过氧乙酸和含氯化合物溶液对呼吸道病毒(如)有很好的杀灭作用(四)表面活性剂又称去污剂,新洁尔灭、杜灭芬1、特点:易溶于水,能减低液体的表面张力,使物品表面油脂乳化易于除去,故具清洁作用。2、杀菌机制:能吸附于细菌表面,改变胞壁通透性,使菌体内的酶、辅酶、代谢中间产物逸出,呈现杀菌作用。3、表面活性剂分类

22、: 有阳离子型、阴离子型和非离子型三类。因细菌带阴电,故阳离子型杀菌作用较强。阴离子型如烷苯磺酸盐与十二烷基硫酸钠解离后带阴电,对革兰阳性菌也有杀菌作用。非离子型对细菌无毒性,4、有些反而有利于细菌的生长,例如吐温80(tween 80)对结核分枝杆菌有刺激生长、并有使菌分散的作用。 5、常用于消毒的表面活性剂有新洁尔灭、杜灭芬等。(五)烷化剂1、杀菌机制 在于对细菌蛋白质和核酸的烷化作用,杀菌谱广,杀菌力强。2、常用的有甲醛、环氧乙烷和戊二醛等。3、甲醛与环氧乙烷的杀菌作用主要是取代细菌酶蛋白中氨基、羧基、巯基或羟基上的氢原子,使酶失去活性。4、戊二醛主要是取代氨基上的氢原子5、环氧乙烷应用

23、:广泛用于医疗器械、一次性用具的灭菌、皮革和密闭容器或房间的气体灭菌 特点:沸点比较低(10.4),易挥发,可用气态进行灭菌,能穿透包裹物,对分枝杆菌、病毒、真菌和细菌芽胞均有较强的杀菌力,所以它是目前最为常用的灭菌剂。缺点 :对人体有一定毒性,且有些烷化剂,如丙脂等可能有致癌作用。消毒药类别作用机制常用消毒剂用途酚类蛋白质变性、损伤细胞膜、灭活酶类石炭酸3%5%或来苏儿2%地面、器具表面的消毒、皮肤消毒洗必泰0.01%0.05%皮肤消毒,术前洗手、阴道冲洗等醇类蛋白质变性与凝固、干扰代谢乙醇70%75%510min异丙醇50%70%皮肤、医疗器材温度计消毒重金属盐类氧化作用、蛋白质变性与沉淀

24、,灭活酶类红汞(2水溶液)皮肤、粘膜、小创伤消毒升汞0.05%0.1%非金属器皿的消毒硫柳汞0.1%皮肤、手术部位消毒生物制品防腐硝酸银1%蛋白银1%5%新生儿滴眼,预防淋病奈瑟菌感染氧化剂氧化作用、蛋白质沉淀高锰酸钾0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒过氧化氢3%创口、皮肤粘膜消毒过氧乙酸0.2%0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2.0%2.5%皮肤消毒0.20.5 ppm氯饮水及游泳池消毒10%20%漂白粉地面、厕所与排泄物消毒氧化剂氧化作用、蛋白质沉淀二氯异氰尿酸钠4ppm水消毒漂粉精0.51.5地面、墙壁、家具消毒饮水消毒(0.30.4/kg)二氯异氰尿酸钠3%空气及排泄物消毒氯胺0.2%0

25、.5%室内空气及表面消毒表面活性剂损伤细胞膜、灭活氧化酶等酶活性、使蛋白质沉淀0.05%0.1%新洁尔灭(新洁尔灭)外科手术洗手,皮肤粘膜消毒,浸泡手术器械0.05%0.1%杜灭芬皮肤创伤冲洗,金属器械、塑料、橡皮类消毒氯已定(洗必泰)0.010.05术前手术、阴道冲洗烷化剂菌体蛋白质及核酸烷基化10%甲醛物体表面消毒,空气消毒50mg/L环氧乙烷手术器械、敷料等消毒2%戊二醛精密仪器、内窥镜等消毒染料抑制细菌繁殖,干扰氧化过程2%4%龙胆紫浅表创伤消毒酸碱类破坏细胞膜和细胞壁,蛋白质凝固5ml/m310ml/m3醋酸加等量水蒸发空气消毒生石灰(按1418比例加水配成糊状)地面、排泄物消毒1

26、、酚 类v 作用:菌体蛋白凝固;损伤细胞膜;灭活酶类。v 浓度:石炭酸为3%- 5%、来苏儿为2%。v 用途:地面、器具表面和皮肤的消毒。2 、醇 类v 用机制:使菌体蛋白变性与凝固;干扰细菌代谢。v 浓度:乙醇70%-75%。用途:用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡3 重金属盐类:使蛋白质变性和沉淀;酶活性丧失。v (1)2%红汞:皮肤、粘膜和小创伤v (2)0.05-0.01%升汞:非金属器皿(3)1%硝酸银新生儿滴眼,预防淋球菌感染4 氧化剂:氧化作用;使蛋白质变性。v (1)0.1%高锰酸钾:皮肤、尿道、水果v (2)3%过氧化氢:创伤、皮肤粘膜v (3)2%-2.5%碘酒:皮肤消毒v (

27、4)0.2ppm-0.5ppm氯:饮水和游泳池v (5)10%-20%漂白粉,地面、厕所与排泄物 消毒5、表面活性剂损伤细胞膜;影响酶的活性;蛋白质沉淀(1)0.05%-0.1%新洁尔灭:皮肤粘膜、手术器械(2)0.05-0.1%杜灭芬:伤口冲洗,金属器械、塑料、橡皮类消毒6、烷化剂: 使菌体蛋白和核酸的烷基化 缺点:有一定的毒性(1)10%甲醛:物品表面、空气(2)2%戊二醛: 精密仪器、内窥镜等按照消毒能力划分,化学消毒剂的种类o 高效消毒剂:可杀灭所有种类的微生物;包括: 氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛类消毒剂、环氧乙烷等。o 中效消毒剂:能杀灭除芽胞以外的微生物,包括: 含碘消毒剂、醇类

28、消毒剂等。p 低效消毒剂:杀死细菌繁殖体,包括:季铵盐类、氯已定、高锰酸钾(一)高效消毒剂1.特点:可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物2.适用于:不能耐受热力灭菌,但要进入人体内部的物品(如内窥镜、塑料外科器材等)的消毒3.种类: 含氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛类消毒剂、环氧乙烷(一)高效消毒剂1、含氯消毒剂 其有效成分按有效氯含量计算。 有效氯含量指某含氯消毒剂所含有的与其氧化能力相当的氯量占消毒剂总量的比值。 有效氯含量表示方法:百分比或 mg/L常用的有:漂白粉、次氯酸钠、二氯异氰酸钠杀菌机制:这类制剂在水中可产生氯、次氯酸及新生态氧O三者均具有强大的杀菌作用。氯可氧化细菌SH基,次氯酸

29、盐可与胞质成分作用形成氮氯复合物,干扰细胞代谢,且杀菌谱广,作用快。应用:物品表面、饮用水、皮肤、排泄物、污水等消毒缺点:对金属制品有腐蚀作用。(一)高效消毒剂2、过氧化物消毒剂常用的有:过氧化氢、过氧乙酸杀菌机制:依靠其强大的氧化能力来灭菌,可使酶蛋白中的SH基转变为SS基,导致酶活性的丧失。过氧化氢:36的过氧化氢可杀死大多数细菌。 1025可杀死所有的微生物,包括细菌的芽胞还可用于空气消毒:熏蒸过氧乙酸:强氧化剂,易溶于水,杀菌谱广,杀菌力台,无残留性,但稳定性差,闪有刺激性与腐蚀性 不适用于:金属器具等的消毒, 可 用 于:物品表面和皮肤消毒.二氧化氯u 杀菌机制:依靠其强大的氧化能力

30、来灭菌, 二氧化氯在水中溶解饱和后,即可以气态向空中自然逸散,当空气中有效尝试达到4mg/m3,即可杀死99.99的细菌、病毒、真菌。u 二氧化氯是当前新型的、安全无毒、广谱高效的空气消毒净化剂(一)高效消毒剂3、醛类消毒剂u 常用的有: 戊二醛、甲醛(二者均为烷化剂)u 特点:高效、广谱、快速的杀菌作用u 杀菌机制:对细菌蛋白质和核酸的烷化作用。u 2戊二醛对橡胶、塑料、金属器械等物品无腐蚀性, 适用于:精密食品、内窥镜的消毒 但是:对皮肤有刺激性。由于甲醛对人有潜在毒性的作用,其使用有限,主要用于HEPA滤器的消毒(一)高效消毒剂4、环氧乙烷u 为杂环类化合物,沸点为10.8温标,易蒸发,

31、u 多用为气体消毒剂 u 杀菌机制:与甲醛相同,u 优点:有穿透力,杀菌广谱高效,杀灭芽胞能力强,对多数物品无损害作用u 缺点:其作用受气体浓度、消毒温度、温度的影响。 易燃性,对人有一定的毒性u 其在空气中的浓度不得超过1ppm。灭菌后物品中残留的环氧乙烷应挥发至规定的安全浓度方可使用。u 常用灭菌要求是:浓度8001200mg/L; 相对湿度5560. 50 6小时(二)中效消毒剂 1.含碘消毒剂 2.醇类消毒剂n 不能杀灭细菌芽胞,但能杀灭细菌繁殖体(包括结核分枝杆菌)、真菌、大多数病毒。n 适用于:纤维内窥镜、喉镜、阴道窥器、麻醉器材1.含碘消毒剂:常用为碘酊、碘伏 杀菌机制:沉淀蛋白

32、和强大的氧化能力 碘酊为碘的乙醇溶液,碘伏为碘与载体的结合物(常为聚乙烯吡咯酮碘)。 多用于皮肤黏膜、体温计以及其他物品表面的消毒 碘酊对皮肤有刺激性,消毒后需以75乙醇将其擦净, 碘伏着色易洗脱,刺激性较轻微。2. 醇类消毒剂 醇类的杀菌活性随着碳链的长度增加而增加(最高活性见于58个碳原子)常用的有:乙醇或异丙醇,可迅速杀死细菌繁殖体、结核分枝杆菌、某些真菌和有包膜病毒。杀菌机制:去除细胞膜中的脂类,并使蛋白质变性。乙醇浓度7075杀菌能力最强,异丙醇的杀菌能力较乙醇强,且挥发性低,但毒性较高。应用:一般多用于医疗器材、皮肤的消毒和浸泡体温计。(三)低效消毒剂 季铵盐类、氯已定、高锰酸钾特

33、点:可杀灭多数细菌繁殖体,但不能杀灭细菌芽胞、 结核分枝杆菌和某些抵抗力较强的真菌和病毒1.季铵盐类 扎苯溴铵(商品名称:新洁尔灭)特点:溶液无色、无臭、刺激性轻微,属于阳离子表面活性剂杀菌机制:能吸附于细菌表面,改变胞壁通透性,使菌体内的酶、辅基、代谢中间产物逸出,呈现杀菌作用。表面活性剂又称去污剂,易手溶于水,能减低液体的表面张力,使得物品表面油脂乳化易于除去,故具有清洁作用。表面活性剂有三种类型:阳离子型、阴离子型、非离子型 因细菌带有阴性电荷,故阳离子型杀菌作用较强,但不得与阴离子表面活性剂(如肥皂)使用。应用:可用于皮肤、黏膜、物体表面、 地面消毒。2. 氯己定(商品名:洗必泰) 为

34、双胍类化合物。其溶液无色、无臭、刺激性轻微、不宜与阴离子表面活性剂使用应用:可用于皮肤、黏膜、物体表面、 地面消毒。3.高锰酸钾: 具有氧化作用,多用于皮肤、黏膜冲洗、浸泡消毒以及食(饮)具、蔬菜、水果的消毒。第三节 消毒灭菌的应用一、医疗器械物品的消毒(一)高危器械物品 1.什么是高危器械物品?是指用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。2.高危器械物品包括 针头、注射器、手术器械、注射液体、敷料、静脉导管、尿道插管 3.处理:所有这些物品都应该灭菌。4.灭菌的方法:最好应用高压蒸汽灭菌法灭菌5.对于不能耐受热力灭菌的物品,可采用 消毒剂:高效消毒剂,如环氧乙烷、戊二醛等。(二)中

35、危器械物品 1.定义:用时不进入无菌组织,但接触黏膜的器械。2.种类:呼吸机、胃镜、支气管、阴道窥器、体温计、口腔器械等3.处理:采用消毒即可4.消毒方法:流通蒸汽、煮沸、过氧乙酸、醇类、戊二醛浸泡但浸泡的物品,用前必须彻底清洗,以免引起超敏反应等副作用。4.如果器械性能允许,最好用高压蒸汽灭菌或钴60电离辐射消毒。(三)低危器械物品 1.定义:只接触未损伤皮肤, 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。2.包括:治疗盘、治疗车、食品器皿、便盆等3.处理:使用后清洗、消毒处理即可(四)快速周转的医疗器械 对医疗工作中快速周转的关键和半关键性器械 ,例如:纤维内窥镜、牙钻、牙

36、科手术器械等的消毒2.对快速周转的医疗器械要求: 灭菌既要时间短、又不损伤器材,难度较大。3.处理:目前常用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂处理、中效或低效消毒与低热(60)协同等方法二、室内空气消毒灭菌 1.物理消毒法 紫外线照射(1.5W/m3,1h)最常用;缺点:l 必须在无人状态下才能进行l 紫外线消毒有死角,不彻底l 产生的臭氧不仅气味难闻、且超过一定浓度后,可导致胸闷、憋气、头痛、肺水肿甚至窒息等严重副作用滤过除菌:空气通过孔径小于0.2m的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃2化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸:过氧乙酸雾、熏蒸可用0.5的水溶液,剂量为30ml/m3,喷后密闭1小时

37、 熏蒸按0.751 g/m3,1小时过氧化氢:3溶液喷雾, 30ml/m31小时二氧化氯溶液喷洒:二氧化氯在水溶液中过饱和后,即可以气态向空气中自然逸散,当空气中有效浓度达4 mg/m3,即可杀死99.99的细菌、病毒、真菌中草药点燃烟熏。艾叶(1 g/m3)点燃烟熏可有效抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、白喉棒状杆菌、肺炎链球菌等三、手和皮肤的消毒l 用肥皂和流动水经常并正确洗手l 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。l 人体手上的细菌可分为暂住菌和常驻菌两大类l 暂住菌 是原来不存在的,经接触而附着在皮上,与宿主皮肤结合不紧密,易用机械方法或化学方法清除l 常驻菌 为皮肤上定植的正常菌群,常寄

38、居在皮肤毛囊和皮脂腺开口处,藏身于皮肤缝隙深处,大部分无致病性。 l 流行病学资料显示,医护人员手上的污染菌主要是暂住菌,录不认真进行清洁和消毒,则可通过医疗、护理等工作直接或间接接触病原体,造成交叉污染。由医护人员的手传播细菌而造成的医院感染约占30l 1.用肥皂和流动水经常并正确洗手是预防许多病原微生物感染的有效方法l 2.被病原微生物污染时应用消毒剂消毒。75乙醇、0.40.5氯己定、0.2过氧乙酸水溶液、0.050.1次氯酸钠水溶液、含有效碘10g/L的碘伏配制液及其他配制并辅以皮肤保护剂的各种新型混合制剂。四.粘膜的消毒l 新生儿预防淋病奈瑟菌性眼结膜炎可用1硝酸银或2蛋白银滴眼;l

39、 口腔粘膜消毒可用3过氧化氢;l 冲洗尿道、阴道、膀胱等可用0.01%0.1%氯己定(洗必泰)或0.1高锰酸钾。五.皮肤 70乙醇、 2.5%碘酒、2红汞均可应用。六.病人排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等,一般多用含50g/L有效氯的次氯酸钠、漂白粉等消毒作用1小时也可等量的20漂白粉、5石炭酸或2来苏,搅拌均匀,作用2h再倾去。七.病人污染物品的消毒1.日常生活用具 l 煮沸1530分钟或流通蒸汽消毒30分钟,l 0.5过氧乙酸浸泡30分钟。2.家具:用0.20.5过氧乙酸擦洗、喷洒3.污染的食品、果品禁止再食用,可用200g/L的漂白粉乳剂处理2小时或煮沸30分钟或焚烧:4.衣服被褥:用流

40、通蒸汽消毒30分钟 或用含有5有效氯的消毒液作用30分钟 或用15过氧乙酸1g/m3熏蒸1小时5.运输工具:用0.5过氧乙酸擦洗、喷洒表面或2过氧乙酸8ml/m3熏蒸1小时八.饮水的消毒自来水用氯气,少量的饮用水可用漂白粉消毒。九 环境的消毒 . 1、厕所、阴沟可用生石灰,其有效成分是氢氧化钙。2、病人居住过的房间、地面、墙壁、门窗可用0.20.5过氧乙酸200ml/m33060分钟,含氯消毒液3060分钟于房间无人时喷洒,注意药物的腐蚀性。l 常用福尔马林(甲醛溶液)加热法:12.525ml/m3熏蒸1224hl 福尔马林混合高锰酸钾法:福尔马林40ml加高锰酸钾30g/m3, 熏蒸1224

41、 h;l 肝炎病房可用过氧乙酸3g/m3熏蒸90min。l 甲醛(实验室)12.525ml/m3加热熏蒸1224h3、垃圾可焚烧 或用10g/L有效氯的消毒液喷洒4、污水:有效氯消毒(总余氯量大于65mg/L)处理十.5、手: 一般用2来苏。当疑有肝炎病毒污染时,用0.2%0.4%过氧乙酸浸泡12min后,流水冲洗。 或用2碘酊涂擦后用70乙醇擦洗。 6、浅表创伤使用2%-4%龙胆紫。 二、消毒剂的应用病人排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等,一般多用等量的20漂白粉、5石炭酸或2来苏,搅拌均匀,作用2h再倾去。皮肤2.5%碘酒、70乙醇、2红汞均可应用。粘膜新生儿预防淋病奈瑟菌性眼结膜炎可用1硝

42、酸银或2蛋白银滴眼;口腔粘膜消毒可用3过氧化氢;冲洗尿道、阴道、膀胱等可用0.01%0.1%洗必泰或0.1高锰酸钾。饮水自来水用氯气,少量的饮用水可用漂白粉。厕所、阴沟可用生石灰,其有效成分是氢氧化钙。空气常用福尔马林(甲醛溶液)加热法:12.525ml/m3熏蒸1224 h;或福尔马林混合高锰酸钾法:福尔马林40ml加高锰酸钾30g/m3, 熏蒸1224 h;肝炎病房可用过氧乙酸3g/m3熏蒸90min。手一般用2来苏。当疑有肝炎病毒污染时,用0.2%0.4%过氧乙酸浸泡12min后,流水冲洗。或用2碘酊涂擦后用70乙醇擦洗。第四节 影响消毒剂作用的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三

43、、微生物的数量 四、消毒剂性质、浓度与作用时间 五、温度 六、酸碱度 七、有机物八、化学拮抗物一、微生物的种类n 微生物对消毒药剂的敏感程度如下: 真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。n 不同种或同种不同株微生物内存在的抗性相差也很大 如在肠杆菌科内,D值可从几分钟到1小时。金黄色葡萄球菌在70时D值一般小于1分钟,相比之下,表皮葡萄球菌为3分钟,曾分离过一株金黄色葡萄球菌在70时D值竟高达14分钟。因此,从一种微生物得到的灭活数据不能推导到另一种微生物。n 一种可杀灭细菌的消毒剂不一定能灭活病毒。n 灭活朊粒需要的能量就是正常热力灭菌的6倍,由于直接脑组织、神经组织

44、(包括视网膜)和扁桃体的器材为传播朊粒的高危器材,在消毒灭菌时就应考虑到这一。n 肝炎病毒、特别是乙型肝炎病毒也比其他病毒和大多数细菌繁殖体对热和消毒剂的抗性强。n 同一消毒剂对不同微生物的杀菌效果不同, 例如一般消毒剂对结核分枝杆菌的作用要比对其他细菌繁殖体的作用差; 70乙醇可杀死一般细菌繁殖体,但不能杀灭细菌的芽胞; 必须根据消毒对象选择合适的消毒剂。二、微生物的物理状态n 消毒灭菌前微生物的生长情况显著影响它们的抵抗力。在营养缺陷下的微生物比在营养丰富的情况下生长的微生物具有更强的抵抗力。细菌繁殖体的抵抗力从开始直到对数期的后期通常较强,自稳定期才开始不规则的下降三、微生物的数量p 微

45、生物的最初数量越大,所需要消毒的时间就越长,p 消毒灭菌前严格的洗涤和清洁是保证消毒灭菌成功的基本步骤。p 如果这点不可能做到,如实验室的培养物,就必须延长消毒灭菌的时间。四、消毒剂性质、浓度与作用时间 n 各种消毒剂的理化性质不同,对微生物的作用大小也有差异。 表面活性剂对革兰阳性菌的杀灭效果比对革兰阴性菌好; 龙胆紫对葡萄球菌作用较强。氧化剂中的过氧乙酸和含氯化合物对环境和空气中的病毒作用效果好。n 同一种消毒剂的浓度不同,其消毒效果也不同。 绝大多数消毒剂在高浓度时杀菌作用大,当降至一定浓度时只有抑菌作用,但醇类例外,70乙醇或5080异丙醇的消毒效果最好。(因过高浓度的醇类使菌体蛋白质

46、迅速脱水凝固,影响了醇类继续向内部渗入,降低了杀菌效果。n 消毒剂在一定浓度下,对细菌的作用时间愈长,消毒效果也愈好。五、温度 温度升高可提高消毒效果。2戊二醛杀灭每毫升含104个炭疽芽胞杆菌的芽胞, 20时需15min, 40时为2min, 56时仅1min即可六、酸碱度 消毒剂的杀菌作用受酸碱度的影响。戊二醛本身呈中性,其水溶液呈弱酸性,不具有杀芽胞的作用,只有在加入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。新洁尔灭(扎苯溴铵)的杀菌作用是pH愈低所需杀菌浓度愈高, 在pH3时所需的杀菌浓度,较pH 9时要高10倍左右。七、有机物 环境中有机物的存在,能够影响消毒剂的效果。n 病原菌常随同排泄物、分泌物一起存在,这些物质可阻碍消毒剂与病原菌的接触,并消耗药品,因而减弱消毒效果。n 湿度、穿透力、表面张力,以及拮抗物质的存在等,亦对消毒灭菌的效果有影响。

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