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文档简介
1、 一、尿液微量白蛋白的测定一、尿液微量白蛋白的测定 v尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用 v尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用 v尿微量白蛋白在炎症方面的应用尿微量白蛋白在炎症方面的应用 v其他其他 二、二、 Bence-Jones protein: v实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物,单聚体分子量实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物,单聚体分子量 为为2.3万。万。 v凝溶蛋白:凝溶蛋白:pH4.55.5,5656条件加热出现白色混条件加热出现白色混 浊及凝固,浊及凝固,100 100 煮沸以后混浊消失或明显减退,再煮沸以后混浊消失或明显减
2、退,再 冷却时又可重新凝固。冷却时又可重新凝固。 v蛋白电泳时可在蛋白电泳时可在2 2至至球蛋白区带间的某个部位球蛋白区带间的某个部位 出现出现M M区带。区带。 检测方法:检测方法: q对甲苯磺酸沉淀筛选实验:灵敏度对甲苯磺酸沉淀筛选实验:灵敏度3mg/L q热沉淀法验证热沉淀法验证 q乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳:乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳:M带带 q免疫固定电泳:区带电泳分离蛋白后,立即将浸免疫固定电泳:区带电泳分离蛋白后,立即将浸 有特异抗有特异抗L链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋 白带的位置上,使之产生抗原抗体的复合物反应
3、。白带的位置上,使之产生抗原抗体的复合物反应。 q免疫扩散实验:用特异的免疫扩散实验:用特异的L链血清进行免疫扩散实验。链血清进行免疫扩散实验。 临床意义:临床意义:多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症 三、三、2-microglobulin 四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查 五、五、TammHorsfall protein 六、尿液酶测定六、尿液酶测定 尿液酶的来源:尿液酶的来源: 血液的酶:血液的酶:淀粉酶、溶菌酶淀粉酶、溶菌酶 肾实质的酶:肾实质的酶:肾小管刷状缘肾小管刷状缘(-GT、AAP、LAP、 ALP
4、、-GLU)、)、溶菌体溶菌体(NAG、ACP、-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸 苷酶)、苷酶)、胞浆胞浆(LDH)及线粒体及线粒体(AST) 尿路及生殖系统的酶:尿路及生殖系统的酶:前列腺前列腺(ACP、NAG)、)、精液精液 (LDH、hyaluronic acid)、)、肿瘤细胞肿瘤细胞 尿液酶测定时尿液标本的处理方法:尿液酶测定时尿液标本的处理方法: v尿液通常为弱酸性,且蛋白质浓度较低,不利于尿尿液通常为弱酸性,且蛋白质浓度较低,不利于尿 酶活力的保存,因此必须酶活力的保存,因此必须及时测定和处理及时测定和处理。 v大部分尿酶活性比血浆酶活性低,在测定时适当加大部分尿酶活性比血浆酶活性低,在测
5、定时适当加 大标本用量或延长酶作用时间。大标本用量或延长酶作用时间。 v尿液中含有较高浓度的低分子物质,如尿素、尿酸、尿液中含有较高浓度的低分子物质,如尿素、尿酸、 肌酐、硫酸盐、磷酸盐等,他们可能是某些酶的抑制肌酐、硫酸盐、磷酸盐等,他们可能是某些酶的抑制 剂,因此必须对尿液标本进行预处理:剂,因此必须对尿液标本进行预处理:超滤法、透析超滤法、透析 法、凝胶过滤法法、凝胶过滤法 1.N-乙酰乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶氨基葡萄糖苷酶 (N-acetyl- D-glucosaminidase, NAG) NAG是一种位于溶酶体内的酸性水解酶,存在于所是一种位于溶酶体内的酸性水解酶,存在于所 有组织
6、中,以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。有组织中,以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。 临床应用:临床应用: 各种肾脏疾病:急慢性肾功能不全、肾病综合症各种肾脏疾病:急慢性肾功能不全、肾病综合症 肾移植排斥反应:早期诊断肾移植排斥反应:早期诊断 药物性肾损害:药物性肾损害: 其他系统疾病:糖尿病肾病、高血压肾病其他系统疾病:糖尿病肾病、高血压肾病 2.-葡萄糖苷酶(葡萄糖苷酶( -glucosdiase, -GLU) -GLU主要存在于主要存在于肾小管上皮细胞刷状缘,肾小管上皮细胞刷状缘,在血在血 清中的含量极低,且分子量大(清中的含量极低,且分子量大(9万),不易通过肾小万),不易通过肾
7、小 球,因而尿中的球,因而尿中的-GLU主要来自肾小管上皮细胞。主要来自肾小管上皮细胞。 测定:用麦芽糖做底物,经测定:用麦芽糖做底物,经-GLU的水解作用生的水解作用生 成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。 临床意义:临床意义:肾小管损伤的敏感指标肾小管损伤的敏感指标 3.谷氨酰转移酶(谷氨酰转移酶(-glutamyl transferase,-GT) q-GT广泛存在于人体各组织中,以肾、肝、胰等组广泛存在于人体各组织中,以肾、肝、胰等组 织含量最高。织含量最高。 q尿中尿中-GT浓度较高,原尿无需预先浓缩。浓度较高,原尿无需预先浓缩。 q用用-谷氨酰对硝基苯胺做底物,测定游历的对硝基苯谷氨酰对硝基苯胺做底物,测定游历的对硝基苯 胺量。胺量
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