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文档简介

1、第二章 细胞生物学实验技术一、名词解释1显微分辨率(microscopic resolution)-在一定条件下利用显微镜所能看到的精细程度。2放射自显影技术(autoradiography)-用于整个细胞时,可以确定放射性标记物在细胞内的定位。用于凝胶或琼脂平板时,能鉴定出放射性的条带或菌落。3双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis)-根据分子质量及等电点的不同将复杂的蛋白质混合物分开。这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上千种蛋白质。4倒置显微镜(inverted microscope)-一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的活细胞生长及分裂状态的特殊

2、显微镜。与普通光镜相比,其光源、聚光镜和物镜的位置是倒置的,即光源在上,物镜在载物台的下方。另外,其聚光镜和物镜有较长的工作距离,以方便放置有一定厚度的培养瓶。二、简答题1电子显微镜为何不能观察活标本?因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件。2简述冷冻蚀刻术的原理和方法。冷冻蚀刻(freezeetching)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,让样品中的冰在真空中升华,而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。当大量的冰升华之后,对浮雕表面进行铂一碳复型,并在腐蚀性溶液中除去生物材料,复型经重蒸水多次清洗后,捞在载网上作电镜观察。3比较投射电子显

3、微镜和扫描电子显微镜。答:都是用于放大与分辨微小结构,都是通过标本电子束的影响来探测标本结构。TEM:电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或者显像屏上。用于研究超薄切片标本,有极高的分辨率,可给出细微的胞内结构。SEM:电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于显像屏上。可以反映未切片标本的的表面特征。4扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么?扫描隧道显微镜(scanning tunneling microscope,STM) 由Binnig等1981年发明,是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的。当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠,外加一电压(2mV2V),

4、针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出,形成隧道电流。电流强度和针尖与样品间的距离有一指数关系,当探针沿物质表面按给定高度扫描时,因样品表面原子凹凸不平,使探针与物质表面间的距离不断发生改变,从而引起电流不断发生改变。将电流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态。扫描隧道显微镜的分辨率很高,横向为0.10.2nm,纵向可达0.001nm。它的优点是三态(固态、液态和气态)物质均可进行观察,而普通电镜只能观察制作好的固体标本。优越性:1)高分辨率 原子级分辨率,横向为1埃,纵向为0.1埃。2)可直接绘出三维立体结构图像;3)可在常压、空气甚至溶液中探测样品,且可避免高能电子束的破坏作用;4

5、)成像快;5)不需要任何透镜,体积小。5比较差速离心和密度梯度离心。都是利用离心力对细胞匀浆悬浮物中的颗粒进行分离的技术。差速离心通常用于分离细胞器和较大的细胞碎片,分离的对象都比介质密度大。密度梯度离心也可分离较大颗粒和细胞器,但更多用于分离小颗粒和大分子物质。介质形成一个密度梯度,所分离的物质密度小于介质底物的密度。6在进行细胞组分的分离时,实验方案设计的一般原则是什么?根据所分离的物质具有一定的体积和密度,通过离心力场的作用加以分离,根据这两个因素可设计速度离心、等密度离心(蔗糖 CsCl)。7用细菌质粒和噬菌体基因组克隆真核生物的DNA有什么不同?都是储存和扩增真核生物DNA片段的技术

6、,当克隆DNA数目为几十到几百个碱基时细菌质粒是合适的载体。对于较长的DNA分子,病毒载体更合适。在长满菌苔的平板上可聚集成百上千的噬菌斑,每个都可以用于筛选目的基因。第三章 细胞的结构与起源一、名词解释1模板组装(template assembly)-指由模板指导,在一系列酶的作用下,合成新的、与模板完全相同的分子。这是细胞内一种极其重要的组装方式,DNA和RNA的分子组装就属于此类。2酶效应组装(enzumatic assembly)-相同的单体分子在不同的酶系作用下,生成不同的产物。3自体组装(self assembly)-生物大分子借助本身的力量自行装配成高级结构,现代的概念应理解为不

7、需要模板和酶系的催化,以别于模板组装和酶效应组装。4细胞社会学(cell sociology)-细胞社会学是从系统论的观点出发,研究细胞整体个细胞群体中细胞间的社会行为(包括细胞间识别、通讯、集合和相互作用等),以及整体和细胞群对细胞的生长、分化和死亡等活动的调节控制。二、简答题1举例说明内膜系统的形成对真核生物细胞是有利的。如吞入一些物质象食物颗粒,把它们隔离起来而独自享用。而原核细菌无法捕食大块食物,而是通过输入物质在环境中分解食物,一起分享。2真核生物和原核生物细胞的共同点有哪些?重点是四点:1)有DNA;2)有核糖体;3)分裂法增殖;4)都有质膜。3真核生物和原核生物细胞的区别有哪些?

8、区别原核细胞真核细胞大小110m10100m细胞核无核膜有双层的核膜染色体形状环状DNA分子线性DNA分子数目一个基因连锁群2个以上基因连锁群组成DNA裸露或结合少量蛋白质DNA同组蛋白和非组蛋白结合DNA序列无或很少有重复序列有重复序列基因表达RNA和蛋白质在同一区间合成RNA在核中合成和加工;蛋白质在细胞质中合成细胞分裂二分或出芽有丝分裂和减数分裂,少数出芽生殖。内膜无独立的内膜有,分化成各种细胞器鞭毛构成鞭毛蛋白微管蛋白光合与呼吸酶分布质膜线粒体和叶绿体核糖体70S(50S+30S)80S(60S+40S)营养方式吸收,有的行光合作用吸收,光合作用,内吞细胞壁肽聚糖、蛋白质、脂多糖、脂蛋

9、白纤维素(植物细胞)真核细胞与原核细胞最根本的区别可以归纳为两条:第一是细胞膜系统的分化与演变。真核细胞以膜系统的分化为基础,首先分化为两个独立的部分核与质,细胞质内又以膜系统为基础分隔为结构更精细,功能更专一的单位各种重要的细胞器。细胞内部结构与职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。第二是遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。这与第一点相互密切联系,由于真核细胞结构与功能的复杂化,遗传信息量相应随之扩增,即编码结构蛋白质与功能蛋白质的基因数首先大大增多。遗传信息重复序列与染色体多信性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重大标志。遗传信息的复制、转录与翻译的装置和程序也相应复杂化,真核细

10、胞内遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性与区域性,而在原核细胞内转录与翻译可同时进行,这也是两者区别的重要特征。4为什么说以多细胞的形式生存比较优越?真核细胞以失去血细胞快速生长为代价而变得精巧复杂,但可以通过分化进行功能特化。多细胞生物能利用单细胞生物所不能利用的食物来源,如吸收土壤养分、光合。但单细胞生物也有优点,如快速适应环境。第四章 细胞质膜及其表面结构一、名词解释1载体蛋白(carrier protein)-细胞膜的脂质双分子中分布着一类镶嵌蛋白,其肽链穿越脂双层,属于跨膜蛋白。载体蛋白转运物质进出细胞是依赖该蛋白与待转运物质结合后引发空间构象改变而实现的。2通道蛋白(channel

11、protein)-细胞膜上的脂质双分子层中存在着一类能形成孔道,供某些分子进出细胞的特殊蛋白质(跨膜蛋白)。3简单扩散(simple diffusion)-又称自由扩散,属被动转运的一种。指脂溶性物质或分子质量小且不带电荷的物质在膜内外存在浓度差的条件下沿着浓度梯度通过细胞质膜的现象。分子或离子的这种自由扩散方式的跨膜转运,不需要细胞提供能量,也不需膜蛋白的协助。4易化扩散(facilitated diffusion)-也称协助扩散,属被动转运的一种。指小分子物质在细胞质膜的两边存在浓度差以及膜中存在特定蛋白质的条件下沿着浓度梯度所进行的跨膜转运。该过程不需消耗细胞的代谢能,但必须有载体蛋白的

12、协助。以这种方式通过膜的物质主要是非脂溶性的或带有电荷的小分子。易化扩散是通过载体蛋白的变构而完成的。5通道扩散(channel diffusion)-是细胞质膜对小分子物质被动转运的一种类型。是由膜上的通道蛋白完成的协助扩散。6侧向扩散(lateral diffusion)-又称侧向迁移。在同一单层内的脂分子经常互相换位,其速度相当快,这种运动始终保持脂分子在质膜中的排布方向,亲水的基团朝向膜表面,疏水的尾指向膜的内部。7翻转扩散(transverse diffusion)-又称翻转(fliop-flop)。它是指脂分子从脂双层的一个小叶翻转到另一个小叶的运动。8离子通道(ion chann

13、el)-一种跨膜的孔洞结构,为在电化学梯度作用下穿越脂双层膜的离子提供了亲水性的通道。9协同运输(cotransport)-又称耦联主动运输,它不直接消耗ATP,但要间接利用自由能,并且也是逆浓度梯度的运输。运输时需要先建立电化学梯度,在动物细胞主要是靠Na+泵,在植物细胞则是由H+泵建立的H+质子梯度。二、简答题1脂双分子层的结构由其脂质分子的特殊性质所决定,假如出现下列情况之一,将会怎样?1)假定磷脂只有一条烃链而非两条;是一种去垢剂。脂质头的直径比烃尾的直径大得多,因而该分子的形状是圆锥形而不是圆柱形,分子聚集在一起是微团,而不是双层。2)假定烃链比正常的短,例如只有约10个碳原子长;形

14、成了脂双层更具流动性,脂双层更不稳定,因较短的烃尾疏水性弱,所以形成双层的力量减弱。3)假定所有的烃链都是饱和的;则形成的双层具有很弱的流动性。4)假定所有的烃链都是不饱和的;更具流动性。5)假定双层含有混合的两种脂质分子,一种具有两条饱和的烃尾,另一种具有两条不饱和的烃尾;饱和分子趋向于互相聚集,流动性大大降低的小区域,则脂双层表面没有均一性。2为什么大多数跨膜蛋白的多肽链以-螺旋或-折叠横跨脂双层?在-螺旋和-折叠内,多肽主链的极性肽键却能被疏水Aa侧链挡住而完全避开脂双层的疏水环境,肽链内部的氢键稳定。3为什么用细胞松弛素处理细胞可增加膜的流动性?一些膜内侧蛋白质与细胞骨架成分肌动蛋白丝

15、相连,形成一个整体,松弛素可破坏肌动蛋白丝即破坏细胞骨架,从而增加膜的流动性。4动脉硬化的细胞学基础是什么?由于膜脂的组成成分发生变化,使膜的流动性降低。如胆固醇比值,卵磷脂/鞘磷脂。5构成细胞质膜的膜蛋白有哪些生物学功能?1)保护:为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;2)运输:选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排出;(作为运输蛋白,转运特定物质进出细胞)3)通信:提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息的跨膜传递;(作为受体,起信号接收和传递作用)4)提供酶结合位点:为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;(作为酶,催化相关的代谢反应)5)介导细胞连接:导细胞与细胞、细

16、胞与基质之间的连接;(作为连接蛋白,起连接作用)6)形成细胞表面的特化结构。参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。6哺乳动物的红细胞之所以成为研究衰老的重要模型,主要原因是什么?首先是红细胞数量大,取材容易(体内的血库),极少有其它类型的细胞污染; 其次成熟的哺乳动物的红细胞中没有细胞核和线粒体等膜相细胞器,细胞膜是它的惟一膜结构, 所以分离后不存在其它膜污染的问题。7为什么带3蛋白又叫阴离子传递蛋白?具有阳离子转运功能。8将以下化合物按膜通透性递增次序排列:核糖核酸、钙离子、葡萄糖、乙醇、氮分子、水。N2(小而非极性)乙醇(小而略有极性)H2O(小而极性)G(大而极性)Ca2+(小而电荷)

17、RNA(很大且带电荷)9简述水通道蛋白AQP1的结构组成。AQP是由四个相同的亚基构成,每个亚基的分子质量为28KDa,每个亚基有6个跨膜结构域,在跨膜结构域2与3、5与6之间各有一个环状结构,是水分子通过的通道。10动物细胞与植物细胞主动运输的比较。动物只有Na+/K+-ATPase,通过这两种离子的转运建立电化学梯度。植物质膜中具有H-ATPase,并通过对质子运输建立电化学梯度。11Na+/葡萄糖协同运输的主要特点是什么?无需直接消耗ATP,但需要依赖电化学梯度,载体蛋白有两种结合位点,分别结合Na+和G,载体蛋白借助Na+/K+泵建立的电化学梯度将Na+和G同时转运到胞内,胞内释放的N

18、a+又被Na+/K+泵泵出细胞外,建立Na+梯度。第五章 物质的跨膜运输与细胞通信一、名词解释1整联蛋白(integrin)-又称整合素,是细胞质膜中能够结合RGD序列的受体之一,是由两种不同的亚基组成的异源二聚体。2细胞黏着(cell adhesion)-在细胞识别的基础上,同类细胞发生聚集形成细胞团或组织的过程叫细胞黏着。3细胞黏着分子(cell adhesion molecule)-参与细胞黏着的分子称为细胞黏着分子。4胞间连丝(plasmodesma)-植物细胞壁内的一种狭窄的管道,通过该管道,使一种细胞的原生质与邻近细胞的原生质保持联系。任何通过细胞壁延伸的和邻近细胞的纤维状胞浆连接

19、物都称之为胞间连丝。胞间连丝可进行细胞间的通信,以及小分子溶质在相邻植物细胞间的交换。5细胞连接(cell junction)-机体各种组织的细胞彼此按一定的方式相互接触并形成了将相邻细胞连接起来的特殊细胞结构,这些起连接作用的结构或装置就称为细胞连接。6紧密连接(tight junction)-是相邻细胞间的局部紧密结合,在连接处,两细胞膜发生点状融合,形成与外界隔离的封闭带,由相邻细胞的跨膜连接糖蛋白组成对合的封闭链。7通讯连接(communication junction)-以细胞之间建立的连接通道为基础的细胞连接方式,这种通道既使细胞之间彼此结合,又介导细胞之间的通讯联系,即依靠某些亲

20、水分子或离子在通道间的流动沟通信息。8细胞外被(cell coat)-也称为细胞被,是由细胞质膜中糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂的寡聚糖链向外伸展,交织而成的一种绒毛状结构。9受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase)-使酪氨酸磷酸化的膜受体类。10表面受体(surface receptor)-位于细胞质膜上的受体称为表面受体。11细胞内受体(intracellular receptor)-位于胞质溶胶、核基质中的受体称为细胞内受体。12表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)-表皮生长因子是一种小肽,由53个氨基酸残基组成,与应答细胞表面的特异受

21、体结合,一旦结合,变促进受体二聚化并使细胞质位点磷酸化。13GTP结合蛋白(GTP-binding protein,G-protein)- 包含两大类G蛋白,一类是与7次跨膜结构域超家族受体结合的异三聚体G蛋白,参与信号转导;另一类是小的胞质G蛋白。二、简答题1比较黏着斑和带连接的结构组成和功能。粘着斑连接位于上皮细胞紧密连接的下方,依借粘着蛋白与肌动蛋白相互作用,将两个细胞连起来。根本区别是:1)带是细胞与细胞之间的粘着连接;斑是细胞与细胞外基质进行连接。2)参与带连接的膜整合蛋白是钙粘着蛋白,而参与斑连接的是整联蛋白,带是两细胞膜上的钙粘着蛋白之间连接。斑是整联蛋白与胞外基质中的纤连蛋白连

22、接。因整联蛋白是纤连蛋白的受体,所以是受体与配体的结合所介导的。2比较黏着斑和半桥粒。粘着斑和半桥粒这两种细胞粘着结构在不同的基膜上形成,粘着斑在体外将细胞结合在人工基膜上,而半桥粒在体内将细胞结合在基膜上。结构上的差异是粘着斑与细胞内肌动蛋白纤维相关联,而半桥粒与细胞内的角蛋白纤维相关联。3说明间隙连接的结构特点和作用。间隙连接(gap junction) 存在于大多数动物组织。在连接处相邻细胞间有24nm的缝隙,而且连接区域比紧密连接大得多,最大直径可达0.3m。在间隙与两层质膜中有大量蛋白质颗粒,是构成间隙连接的基本单位,称连接子(connexon),由6个相同或相似的跨膜蛋白亚单位环绕

23、而成,直径8nm,中心形成一个直径约1.5nm的孔道。通过向细胞内注射分子量不同的染料,证明间隙连接的通道可以允许分子量小于1.5KD的分子通过。这表明细胞内的小分子,如无机盐离子、糖、氨基酸、核苷酸和维生素等有可能通过间隙连接的孔隙。间隙连接的功能包括:1)参与细胞分化:胚胎发育的早期,细胞间通过间隙连接相互协调发育和分化。小分子物质即可在一定细胞群范围内,以分泌源为中心,建立起递变的扩散浓度梯度,以不同的分子浓度为处于梯度范围内的细胞提供”位置信息”(positional information),从而诱导细胞按其在胚胎中所处的局部位置向着一定方向分化。2)协调代谢:例如,在体外培养条件下

24、,把不能利用外源次黄嘌呤合成核酸的突变型成纤维细胞和野生型成纤维细胞共同培养,则两种细胞都能吸收次黄嘌呤合成核酸。如果破坏细胞间的间隙连接,则突变型细胞不能吸收次黄嘌呤合成核酸。3)、构成电紧张突触:平滑肌、心肌、神经末梢间均存在的这种间隙连接,称为电紧张突触(electronic synapses)。电紧张突触无须依赖神经递质或信息物质即可将一些细胞的电兴奋活动传递到相邻的细胞。4比较紧密连接和间隙连接。在结构和功能上都不同。紧密连接形成“带”环绕在细胞外围,限制了组织中细胞溶质的渗漏,在上皮组织中最普遍。间隙连接位于相邻细胞之间,允许细胞间的小分子物质流通。5下列物质:谷氨酸、mRNA、环

25、腺苷酸、shh蛋白(sonic hedgehog,shh)、Ca2+、G蛋白、质膜磷脂,哪个(或哪些)信号会通过间隙连接或胞间连丝,从一个细胞扩散到另一个细胞?胞质小分子如Asp、Ca2+、cAMP可迅速穿过间隙连接或胞间连丝。而胞质大分子mRNA 和G蛋白则不能。Shh蛋白是分泌蛋白,因此根本不可能穿过间隙连接,因为连接的两个细胞膜在这里是各自分开的。6比较纤连蛋白和整联蛋白。均参与细胞粘着,但一种是细胞外基质蛋白,一种是整合膜蛋白。纤连蛋白与胞外基质中的其它成分及细胞表面蛋白都有结合位点(包括整联蛋白)。整联蛋白是跨膜异二聚体,与纤连蛋白、其它RGD序列(Arg-Gly-Asp)的蛋白和E

26、CM蛋白(细胞外基质蛋白)有结合位点。在一些细胞中可相互作为配体。7说明细胞外基质的主要组成及它们的主要功能。可分为三大类:1)蛋白聚糖由糖胺聚糖以共价键的形式与线性多肽连接而成的复合物。能形成水溶性的胶状物,是ECMA的基础物质。2)结构蛋白如胶原和弹性蛋白赋予细胞外基质一定强度和柔性。3)粘着蛋白如纤连蛋白和粘连蛋白。促使细胞基质结合。其中胶原和蛋白聚糖为基本骨架。在细胞表面形成纤维网状复合物,再经纤连蛋白或层粘连蛋白及其它连接蛋白直接与细胞表面受体连接或附着在受体上。由于多数受体是膜整合蛋白并与胞内骨架相连,因此胞外基质通过膜整合蛋白将胞外、胞内连成一个整体。8胶原蛋白是水不溶性蛋白,它

27、的合成和装配过程怎样?目前发现20个左右的基因分别在不同的组织中编码不同类型的胶原,是在膜结合核糖体上起始合成的,然后进入内质网,通过内质网和高尔基体的加工修饰和装配最后分泌到细胞外基质中。9为什么青霉素对革兰氏阳性菌具有抑制作用?能抑制参与肽聚糖装配后形成肽侧链的酶活性。因为G-的细胞壁中肽聚糖含量很少,所以对G-不太敏感。10蛋白聚糖的糖基富含负电荷。如果不富含负电荷,其特性将有何变化?蛋白聚糖强烈的吸胀能力以及因此而占据较大体积能力依赖于它的负电荷可吸引阳离子云(主要为Na+),而Na+又通过渗透作用引入大量的水,从而使聚糖有独特性质。不带电荷的多糖如纤维、淀粉、糖原,易于紧密结合形成纤

28、维或颗粒状结构。11蛋白聚糖在细胞外基质中的作用是什么?是多糖蛋白质复合物,介导细胞与细胞的相互作用,为细胞提供机械保护,且对于接近质膜的粒子构成屏障。12何谓RGD序列?RGD序列:是许多整合蛋白的配体。此序列在许多重要的细胞外基质蛋白中存在,包括纤连蛋白、层粘连蛋白及其它细胞外蛋白。是Arg、Gly、Asp (D)的单字符的缩写。13植物的初生壁和次生壁是如何形成的?细胞壁的分泌合成是逐步、分层次进行的,合成越早,最后离质膜越远。首先形成的是中间层,主要成分是果胶,是两细胞共有的,起到将两细胞连接的作用。分泌合成的第二个区带是初生壁,与动物细胞的质膜相当,次生壁是细胞停止生长后分泌形成的,

29、增加细胞壁厚度和硬度。14如何证明革兰氏阳性菌细胞壁中胞壁质具有骨架作用决定细胞的形态?用溶菌酶溶解水解壁中的胞壁质,可以证明。溶解后,杆状细菌全部变成了球形。15信号分子与受体结合的主要特点有哪些?1)特异性;2)高亲和力;3)饱和性;4)可逆性;5)引起生理反应16为什么说蛋白激酶C是脂和钙依赖性的激酶?因为PKC激活时需要二酰甘油(DAG)和钙离子的协同作用。17G蛋白偶联受体与酶联受体的主要不同点是什么?G蛋白偶联受体都属于7次跨膜的蛋白质,在信号传导中全部与G蛋白偶联,酶联受体都属于单次跨膜受体。第六章 细胞内功能区隔与蛋白质分选一、名词解释1内膜系统(endomembrane sy

30、stem)-是指内质网、高尔基体、溶酶体和液泡(包括内体和分泌泡)等四类膜结合细胞器。广义上的内膜系统概念也包括线粒体、叶绿体、过氧化物酶体、细胞核等细胞内所有膜结合的细胞器。2受体介导的内吞作用(receptor-mediated endocytosis)-是胞吞作用的一种类型,主要用于摄取特殊的生物大分子。3内体(endosome)-是来自质膜的细胞内小泡,是一种含有游离的受体与配体的酸性非溶酶体小泡。4信号识别颗粒(signal recognition partical,SRP)-是一种核糖核蛋白复合体,与信号肽、核糖体相结合形成SRP-信号肽-核糖体复合物,由SRP介导引向内质网膜上的

31、SRP受体,并与之结合。5信号序列(signal sequence)-指将蛋白质定位于细胞中特定位置的短氨基酸序列,位于新合成的分泌蛋白的N端。二、简答题1糖原贮积病的病因是什么?II型糖原累积病(Pompe病):溶酶体缺乏-1,4-葡萄糖苷酶,糖原在溶酶体中积累,导致心、肝、舌肿大和骨骼肌无力。属常染色体缺陷性遗传病,患者多为小孩,常在两周岁以前死亡。2临床上医务人员在抢救休克患者时,通常要给患者注射大量的糖皮质类固醇药物,其目的是什么?休克患者缺氧,会造成细胞质pH下降,溶酶体不稳定易破裂,目的是稳定溶酶体的膜,防止溶酶体破裂。3讨论共翻译转运及翻译后转运的主要区别。翻译后转移Post-t

32、ranslation translocation:在细胞质基质中完成多肽链的合成(翻译),再转运至膜结合的细胞器(如,线粒体、叶绿体、微体、细胞核等)或细胞质基质的特定部位。共翻译转移Co-translation translocation:在细胞质基质中多肽链的合成起始后,边合成边转入内质网腔中,随后经高尔基体运至溶酶体、质膜、分泌到细胞外(还包括内质网和高尔基体中的蛋白质)。4比较膜结合核糖体的蛋白质合成和游离核糖体的蛋白质合成。在与内质网结合的核糖体上合成的蛋白质带有一特定的序列,与一信号识别颗粒(SRP)结合,由内上的SRP受体识别。这些蛋白质属于分泌出细胞的蛋白质或与特定细胞器结合的

33、蛋白质以及整合蛋白。无这些信号序列的蛋白质在游离核糖体上合成,构成细胞质、细胞核、线粒体或叶绿体的蛋白质。5信号序列(肽)假说的核心内容是什么?是说明共翻译转运机制的一种学说,通过对信号序列的识别使核糖体锚定在内质网上,并通过信号序列将新生肽转入内质网后进行运输。6Hsp70家族中的分子伴侣在正常细胞和应激细胞中可完成不同的功能,试列举几种功能。1)稳定新生肽链;2)维持多肽折叠活性;3)维持新生肽链的转运活性;4)协助蛋白质降解;5)促进蛋白质寡聚体的装配与解离;6)使热变性的蛋白质恢复活性。第八章 细胞核与染色体一、名词解释1多线染色体(polytene chromosome)-在昆虫体内

34、,这种染色体扩增方式可产生合成大量蛋白质所需的众多基因拷贝。由于这些巨大染色体结构上的条带与特定的基因有关,因此通过研究其交换频率可提供可视的遗传图谱证据。2常染色质(euchromatin)-是转录活跃的DNA部分,在间期细胞核中为解旋的细纤维丝,折叠盘曲度小,分散度大。常染色质含有单一和重复顺序的DNA,在一定条件下可进行复制和转录,是正常情况下经常处于功能活跃状态的染色质。3异染色质(heterochromatin)-是指间期或分裂前期核内染色很深的块状结构。异染色质的DNA分子与组蛋白等紧密结合,螺旋缠绕紧密,很少转录,功能上处于静止状态,是低活性的染色质。4染色单体(chromati

35、d)-是染色质的四级结构,又称子染色体。在细胞分裂中期,染色质转变成染色体,每条染色体都是通过着丝粒连接两条染色单体而形成的。这两条染色单体互称为姐妹染色单体。5着丝粒(centromere)-是在主缢痕处两条染色单体相连处的中心部位,即主缢痕的内部结构。着丝粒的位置是鉴别染色体类型的一个重要标志。6动粒(kinetochore)-是指在主缢痕处两条染色单体的外侧表层部位的特殊结构,是纺锤丝微管的连接处,是微管蛋白的组织中心之一。7次缢痕(secondary constriction)-是染色体上主缢痕以外的另一个凹陷,常分布于染色体臂中或在短臂近动粒处。次缢痕也是染色体的一个固定的形态特征,

36、所以也可作为鉴别染色体的标志。8核仁组织区(nucleolus region)-是存在于细胞内特定染色体区段,常位于染色体端部的次缢痕处,含有主要rRNA基因,是产生核仁的部位。二、简答题1真核生物细胞能否象原核生物一样,可以没有核膜,并且DNA的转录与蛋白质翻译也是偶联的?不能,因为真核生物的基因有内含子,初级转录物必须经过加工。2为什么真核细胞需要细胞核作为独立的区室,而原核细胞没有核也能生存?因为真核基因的表达机制比原核更复杂。原核基因没有内含子,因而一条mRNA在转录后立即翻译而不需要加工。实际上在核糖体中大多数mRNA在转录结束前就开始翻译了。真核转录后在翻译前转录物必须经过剪接。核

37、膜将转录与翻译的过程在空间、时间上隔离开来,初始RNA转录物分布于核内,经加工形成mRNA,才被转运离开核进入质中翻译。3简述核孔鱼笼模型的主要特点。核孔复合物(NPC)是一种轮形结构,呈八面对称。只有一中央运输蛋白,向外伸出8个辐条,与核面的核质环及细胞质环相连,在胞质环表面常有8个细胞颗粒位于其上,而胞质环上分别有肌纤丝伸向核质、胞质,形成笼形结构。4核定位信号是一种永久性的信号,这对生命活动有什么意义?重复使用,有利于细胞的重建过程。5比较前导肽与核定位信号的区别。核定位信号与前导肽的主要区别:1)核定位信号可以重复使用,即永久性;2)核定位信号由核孔复合物识别。6染色体的绳珠模型有什么

38、特点?是染色体的一级结构。由核小体组成,各核小体之间有连接DNA相连。核小体又称为核体。核粒是染色体的基本结构单位,由200bp(160240bp)的DNA与五种组蛋白结合而成。其中4种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各两分子组成八聚体的小圆盘,是核小体的核心结构。146bp的DNA在圆盘外围绕1.75圈,1分子H1与DNA结合,锁住核小体DNA的进出口,起稳定核小体的作用。两个核小体间的连接DNA长度因种属和组织而异,一般60bp。7染色体骨架与核基质有何不同?染色体骨架是一个密集、纤维状的染色体支架结构。当蛋白质从分裂中期的染色体中抽提出来后就只剩下骨架了。大的环形DNA还连在骨架上。

39、核基质是与核被摸的内部相连的一个纤维状网络结构。它是间期核抽提除去蛋白质后得到的。因此核骨架出现于分裂期的细胞。而核基质出现于分裂间期的细胞,具有一些共同的蛋白质,但也有各自独特的蛋白质。8比较异染色质与常染色质。二者都是分裂间期的染色质形态,但压缩程度不同。异染色质保持高度浓缩状态,转录不活跃,而常染色质是松散的,可作为转录模板。9为什么在真核生物的细胞中不能同时见到细胞核和染色体?染色体是遗传物质的高级结构,这种结构只有在细胞分裂时才会出现,便于均等分配。为了均等分配遗传物质,不仅遗传物质要凝集成染色体,同时核膜要解体,此时见不到细胞核。仅在新细胞生长时,需要基因活动,需要蛋白质合成,因此

40、染色体必须去凝集,此时见不到染色体,但此时为了稳定遗传物质,保证基因转录的微环境,必须形成完整的核,所以在真核生物的细胞中不能同时见到细胞核和染色体。10动粒与着丝粒有何不同?都指染色体上与有丝分裂纺锤体相连的点。动粒在显微镜下是染色体上一个与微管相连的密集区域。着丝粒是染色体上进行正确分离所必需的区域。11何谓人工染色体?何谓YAC文库?利用天然染色体的功能元件,构建重组染色体,大大提高了插入外源基因的能力,并且在宿主细胞内稳定的复制和遗传,称为人工染色体。如果以酵母染色体的ARS、CEN、TEL序列构建载体,即酵母人工染色体(YAC),以YAC为载体构建的文库就是YAC文库。第九章 核糖体

41、与核酶一、名词解释1核酶(ribozyme)-指具有催化活性的RNA,即化学本质是核糖核酸(RNA),却具有酶的催化功能。二、简答题1原核和真核生物核糖体在生物发生上有何不同?细胞内的核糖体是自我装配的。核糖体的生物发生包括蛋白质与RNA的合成、核糖体亚基的组装。首先,原核生物rRNA基因的重复次数比真核低得多,而且细菌的5s rRNA基因与另外两种r RNA基因组成一个转录单位。真核生物核糖体亚基的装配地点在细胞核的核仁部位,而原核亚基的装配在细胞质中。2真核和原核核糖体的主要区别是什么?真核细胞80S核糖体蛋白和rRNA的数量和体积均比原核70S的大,因此其机体约为原核的2倍。而大小亚基(

42、40S与60S)也比原核的大。但从含量上看,原核细胞的RNA含量比真核多。原核生物核糖体上有一个E位点便于脱氨酰tRNA的离开。第十章 细胞骨架一、名词解释1中间纤维(intermediate filament,IF)-是细胞骨架中最复杂的一种蛋白质纤维系统,其直径介于微管和微丝之间,约10nm。中间纤维与细胞核的固定、物质运输和有丝分裂等过程有关。2基体(basal body)-基体是纤毛和鞭毛的微管组织中心,不过基体只含有一个中心粒而不是一对中心粒。基体又称动质体(kinetosome),负责鞭毛和纤毛的合成。3细胞松弛素B(cytochalasin B)-又称松胞素,是第一个用于研究细胞

43、骨架的药物,是真菌分泌的生物碱。细胞松弛素(细胞松弛素B及其衍生物)在细胞内与微丝正端结合,并引起F-肌动蛋白解聚,阻断亚基的进一步聚合。4鬼笔环肽(phalloidin)-从一种毒菇中分离的剧毒生物碱,与细胞松弛素的作用相反,只与聚合的微丝结合,而不与肌动蛋白单体分子结合。与聚合的微丝结合后,抑制了微丝的解体,因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。第十一章 细胞繁殖及细胞周期一、名词解释1细胞周期(cell cycle)-通常将通过细胞分裂产生的新细胞生长到下一次细胞分裂形成子细胞结束为止所经历的过程成为细胞周期。2同步化(synchronization)-培养物中的所有细胞都处于细胞周期的

44、相同阶段,称为细胞的同步化。3周期蛋白(cyclin)-指在整个真核生物的细胞周期中,浓度随细胞周期的变化而时升时降的几个相关的蛋白质。4限制点(restriction point)-是哺乳动物细胞周期控制G1期进入S期的调节点。5M期促进因子(M phase-promoting factor,MPF)-是一种蛋白质,其含量在有丝分裂前迅速上升,在有丝分裂后迅速下降,被认为是触发有丝分裂的物质。6关卡(checkpoint)- 指监控细胞周期事件的发生、发展过程是否严格按程序进行的控制点。7有丝分裂(mitosis)-有丝分裂是细胞周期M期进行的分裂活动。在这个时期,通过纺锤丝的形成和运动以及

45、染色体的形成,将S期复制的DNA平均分配到两个子细胞的过程,由于纺锤丝的出现,故称为有丝分裂。8减数分裂(meiosis)-是特殊的核分裂方式,染色体仅复制一次,而进行两次连续的核分裂(减数分裂、)。9胞质分裂(cytokinesis)-核分裂(有丝分裂)完成后是细胞的原生质体分裂的过程。有丝分裂后期,将细胞膜、细胞骨架、细胞器以及可溶性蛋白质等均等分配,并形成两个新的子细胞的过程称为胞质分裂。胞质分裂通常开始于有丝分裂后期,直到两个新细胞核形成后才结束。10P53蛋白(P53 protein)-磷酸化蛋白,是一种常见的肿瘤抗原,在多种转化细胞中表达。P53被认为是肿瘤抑制基因的产物,而不是癌

46、基因产物。二、简答题1比较有丝分裂的中期与早中期。都处于有丝分裂的早期阶段,早中期其特点是染色体和纺锤体结合,以及染色体向赤道板移动。在中期,染色体全部排列在赤道板上,中期是有丝分裂的“节点”,在染色体正确地排好之前,细胞会一直处于中期。2在减数分裂前期发生染色体联会的生物学意义是什么?同源染色体的分离、自由组合的交换、一方面保证了物种遗传的稳定性,另一方面增加了生物遗传的多样性。3染色体交叉的意义是什么?交叉提供了染色体上易于发生重组的位点。4简述P53蛋白的作用。P53蛋白是一种防止细胞癌变的转录因子,可调节一种周期蛋白-colr抑制蛋白的合成,这种物质是进入S期所必需的。第十二章 细胞分

47、化和癌细胞一、名词解释1细胞决定(cell determination)-细胞分化具有严格的方向性,细胞在未出现分化细胞的特征前,分化的方向就已由细胞内部的变化及受周围环境的影响而决定,这一现象称为细胞决定。2细胞分化(cell differentiation)-受精卵产生的细胞在形态、功能和蛋白质合成方面发生稳定性差异的过程称为细胞分化。3奢侈基因(luxury gene)-是与各种分化细胞的特殊性状有直接关系的基因,丧失这种基因对细胞的生存并无直接影响,只在特定的分化细胞中表达,常受时间和空间的限制。4持家基因(house-keeping gene)-也叫管家基因,是维持细胞基本生存所不可缺少的基因,但是对细胞分化一般只起协助作用。5干细胞(stem cell,SC)-成体的许多组织中都保留一些未分化的细胞,当机体需要时这些细胞便可按发育的途径分裂分化产生特定的细胞。机体组织中这种未分化细胞称为干细胞。6转决定(transdetermination)-一般胚胎细胞一旦决定,那么沿着特定类型进行分化的方向是稳定的;但在果蝇中发现了某

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