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1、冬虫夏草有效成分的研究2009级中药学2班 姓名:魏首咏 学号:200940301048摘 要:冬虫夏草是一种名贵的药用真茵,由于其自身独特的药用价值而成为各国研究的热点。近年来研究者用不同的方法对冬虫夏草及茵丝体的有效成分进行了广泛的研究,目前已弄清的成分包括虫草多糖、蛋白和氨基酸、D一甘露醇、脂肪和脂肪酸、虫草素和生物碱、抗茵活性物质、微量元素、免疫抑制剂等。关键词:冬虫夏草;有效成分冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk)sacc是我国的一种名贵中药材,此药入肺、肾二经,甘温不燥,能滋肺补精益气,具有补虚损、抗癌症、抗衰老,增强人体免疫功能和调节生殖功能的作用1。这些医疗
2、保健作用与其有效成分是密切相关的。近年来,研究者们用不同的方法,对冬虫夏草的有效成分进行广泛深入的研究,本文就这方面的进展作简略的概述。1、虫草多糖据药理学及临床研究表明,虫草多糖可以增强免疫力,抗肿瘤及降血糖等,因此虫草多糖的研究是生物学研究热点问题2。对于真菌多糖的研究以美、日、德、俄等国家处于领先地位,我国尚处于起步阶段3。冬虫夏草虫用盐酸水解,NaOH中和,乙醇沉淀蛋白,标准裴林试剂滴定,测得粗糖为23.87% 4。白云娥等用硫酸一蒽酮比色法测定了粗糖中含糖为42.O%5。袁建国等通过分离纯化及选育,筛选出一株可溶性虫草多糖产量最高的菌株,使原来的虫草多糖含量占菌丝干重的6%7提高到1
3、O%12%;并通过多糖组分分析证明该多糖由甘露糖、半乳糖、葡萄糖等单糖组成3。半乳糖甘露聚糖,系由D一半乳糖与D一甘露糖按等摩尔组成,具有高度的分支结构,其主链均有(12)甘露糖基存在,其支链上亦有(15)呋喃半乳糖 。有人从人工培养基的菌丝体中分得一种多糖CSF10,它由半乳糖、葡萄糖和甘露糖按摩尔比43:33:24构成,分子量约为15万6。沈敏等报道用凝胶过滤法测出冬虫夏草多糖分子量43万,单糖组成为甘露糖:半乳糖:葡萄糖=103:36:1。苏普等在藏药研究中报道从冬虫夏草分离出两种多糖,一种分子量约为23万,单糖组成D一甘露糖和D一半乳糖,摩尔比为3:5;另一种与沈敏等报道的相同7。袁建
4、国等用乙醇分级分离到7种多糖组分,这7种多糖分子量、单糖组成及摩尔比均有差异8。Sasaki等证实来自真菌多糖的抗肿瘤活性与分子量有关,只有当分子量大于16万时,才具有抗肿瘤活性7 。2、蛋白和氨基酸汤腾汉(1947)分析冬虫夏草含粗蛋白为2532 9,69。李楠等也报道冬虫夏草的粗蛋白为2547 ,同时含有天门冬、苏、丝、谷、脯、甘、缬、蛋、异亮、亮、苯丙、酪、赖、组、胱、半胱、精、色等18种氨基酸,其中以谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、亮氨酸含量最高4。药理实验表明天然冬虫夏草谷氨酸、色氨酸及酪氨酸为主要成分,色氨酸为主要的有效成分,同时均含有8种人体必须氨基酸。虫草在临床上的补益、辅助治疗消化
5、系统及神经系统疾病,抑制病菌及增强免疫功能等作用,似乎与其富含上述氨基酸有必然的联系9。3、D一甘露醇Chaher Jee等(1957)报道分离到虫草酸,后证明系甘露醇,含量3.7%10 。日本松本繁(1959)和吉井常人(1979)从冬虫夏草菌丝体中提取到甘露糖醇11 。目前许多人从冬虫夏草中分离出甘露醇单体,并通过物理和化学反应鉴定其结构为D一甘露醇9。汪宝琪等用高碘酸钾一联苯胺显色,采用薄层扫描法,测得西藏产冬虫夏草中D一甘露醇的含量为8.4%12口引。由于冬虫夏草的产地、种类、测定方法的不同,对于其含量报道的差异较大,多数报道为5%8%,最少含量报道为2.94%3.8O% ,最高含量为
6、1141 。虫草不同的部位所含甘露醇的数量也有差异,子座中甘露醇的含量不高于7 ,虫体中甘露醇的含量高于7 ,随着子座的发育,其中的甘露醇的含量也增加6。4、脂肪和脂肪酸 冬虫夏草的粗脂肪含量为9.18%5。也有报道为8.4 g/kg13。其中饱和脂肪酸11.1%13.6% ,不饱和脂肪酸8O.2%82.514。有机酸种类较多,目前已检出有12种,它们是硬脂酸、软脂酸、油酸、亚油酸、14一甲基一十五酸、十五烷酸、十六烷酸、3一十八烷酸、9一十六烯酸、14一甲基一十六烷酸、9一十八烯酸、11一二十烯酸9。5、抗茵活性物质将湿菌丝研碎,加水所得糊状物,能抑制黄色小球菌和粉红色小球菌。菌丝发酵液浓缩
7、后,发现有广谱抗菌物质,对原核生物中的革兰氏阴性和阳性菌、对芽孢收稿日期:2003一1016作者简介:刘彦威(1963一),男,河北辛集市人,教授,在职博士,主要从事微生物与免疫学研究。52 动物医学进展2004年第25卷第3期(总第131期)菌和非芽孢菌、对放线菌中的链霉菌都可以拮抗,对酵母几丝状真菌则没有抗菌活性。这与报道的虫草素抗菌谱不同,且这种抗菌活性物质较耐热,用乙醇沉淀祛除大分子蛋白和多糖后活性不受影响15。与上述实验结果相反,王伟等从粤北虫草中分离一株无孢丝状真菌CR一9512,对革兰氏阴性及阳性细菌、放线菌、丝状真菌和酵母菌在内的26株致敏菌株的抗性测定表明,该菌株对放线菌、丝
8、状真菌无拮抗性,对细菌抗性不明显,而对酵母菌则抗性明显16。6、虫草素和生物碱从冬虫夏草中检出的生物碱有虫草素、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿苷、腺苷、次黄嘌呤核苷、次黄嘌呤9。李楠测得虫草素含量为1.0074。腺苷含量是评价冬虫夏草内在质量的主要指标,夏文娟等用HPLC法分析了13个产地冬虫夏草腺苷的含量,结果13个产地冬虫夏草的腺苷含量为142.53966 ug/g,其中藏草腺苷含量高于川草,在川草中,炉草腺苷含量高于滇草,灌草最低17。Li等用高效毛细管电泳法测定天然和人工冬虫夏草中核苷成分的含量,结果显示人工虫草的核苷含量明显高于天然虫草;新采集的天然虫草中核苷类物质含量极低,而
9、采集日久者核苷成分含量较高;因此腺苷在天然冬虫夏草质量控制中的应用价值尚值得进一步研究18。7、微量元素冬虫夏草微量元素研究报道较多,但报道的种类和含量有差异。目前报道的微量元素有3O余种,以P和Mg的含量最高,较高是Al、Fe、Ca、Na、Zn;其次K、Si、Mn、Sr、Ba、Cu、Zr等;较少是Ni、Nb、Ce、Cs、As、Be、Ga、B、Ti、Li、Hg、Pb等;另外还有Y、Yb、Cd、Pt、Rb、Br9。沈晓云等通过对冬虫夏草及虫草菌丝微量元素分析表明,大量元素Na、K、Ca、Mg、P的含量,虫草菌丝高于冬虫夏草,微量元素中Mn含量两者相近,Cu、Co、V、Ni、Cr的含量,天然虫草高
10、于虫草菌丝,Fe、Zn、Cd、Si、Mo、Ba、Li、Sr、Ti、Al的含量,虫草菌丝高于冬虫夏草19。有人推测冬虫夏草的抗癌作用与含P、Co、Fe、Cu有关。也有报道冬虫夏草直接抗癌作用不强,但它能增强环磷酰胺、6一巯基嘌呤作用,这种协同增强抗癌作用是否与冬虫夏草含有多种微量元素有关,有待与进一步探讨9。8、其他成分李楠报道冬虫夏草中含有超氧化物歧化酶(SOD),含量为65 mg/g蛋白质4。这种酶作为细胞的保护酶,具有清除氧自由基的功能,保护细胞和组织免受阴离子损伤,使机体得益而抗衰防老。冬虫夏草中含有多种维生素,Bl22.64.4 ug/kg、Bl401635 mg/kg、VE 223
11、3O1 mgkg14 。牛昌烈等用HPLC法分析了冬虫夏草多胺类,检出1,3一二氨基丙烷、腐胺、精胺、尸胺等2。最近有人用硅胶柱色谱,从藏冬虫夏草分离到8个化合物,分别为棕榈酸、麦角甾醇、胆甾醇、麦角甾醇过氧化物、谷甾醇、咖啡因、啤酒甾醇和神经酰胺21。参考文献:1 陈国栋冬虫夏草类生态、培植应用M北京;科学技术出版社,1995 i 911002 余晓斌,罗长才,缪 静冬虫夏草多糖提取工艺的优化J中草药,200233(12);108610873 袁建国,程显好,侯永勤,等冬虫夏草多糖的研究开发J精细与专用化学品,2002,(7);15174 李楠。宋健国刘金云,等蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较L
12、J吉林农业大学学报,1995,17(增刊):80-835 白云娥李青山王 毅,等冬虫夏草多糖的含量测定J山西医科大学学报,2000,31(2):129-1306 罗玉秀冬虫夏草的研究现状J青海大学学报(自然科学版),2003,21(2):38407 许周善周晓燕冬虫夏草多糖的研究进展J工业微生物,200030(1)l 56578 袁建国。程显好。侯永勤等功能因子冬虫夏草多糖的研究开发J中国食品添加剂。1999。(2);18229 纪莎。施小兵,易 骏冬虫夏草化学成分研究概况J福建中医学院学报。1999。9(2):464710 宁美英,李青山,刘玉明,等冬虫夏草的化学成分分析测定方法J山西医科大
13、学学报。2000。31(6):54855011 吴畏。高新华。催明星,等北冬虫夏草(Cordycops militaris)的研究应用概况(综述)J上海农业学。2000。16(增刊):9910412 汪宝琪,庞志功西藏冬虫夏草有效成分研究(之-)J西藏科技,1995,(2)l161813 张智。谢意珍。李森柱冬虫夏草研究进展J微生物学杂志。2002。22(5)l 515314 程显好,白毓谦冬虫夏草菌丝体及发酵液中抗菌活性物质的初步研究J中国食用菌,1996,14(3):373815 陆龙喜。刘淑梅,时连根,等冬虫夏草研究的新进展J生物学通报。2002。37(6)l4-616 王伟。陈椹昌,钟英长,等粤北一种虫草分离菌的抗酵母现象J微生物学通报。2003。30(2);1-417 夏文娟。曾晓英,袁海龙等不同产地冬虫夏草腺苷含量的测定J中国中药杂志2001,26(8):54054218 Li Shaoping,Li Ping,Ji Hui。et a1The nucleosides C on tents andtheir V ariation in natural cordy
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